1、毛细管气相色谱法测定托拉塞米有机溶剂残留量（2）摘 要：目的 建立气相色谱（GC）测定托拉塞米中甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯 5 种有机残留量的测定方法。方法 采用直接进样毛细管气相色谱法，色谱柱为：DB-624 色谱柱（30m530 m3.0 m） ，载气为氮气，FID 检测器，DMSO 为溶剂。结果 此色谱条件下被测物均能得到很好的分离，峰面积与质量浓度呈良好的线性关系，回收率良好。结论：方法简便、灵敏，结果准确、可靠，适用于托拉塞米中有机残留量的检测。 关键词：托拉塞米 有机残留量 毛细管气相色谱法 托拉塞米是新一代高效髓袢利尿剂，于 1993 年在德国上市，次年在美国上市。托拉
2、塞米有利尿、排 Na+和排 C1-作用，但不显著改变肾小球滤过率、肾血浆流量和酸碱平衡。作用于髓袢升支粗段，干扰管腔细胞膜的 Na+、K+、2C1-同向转运体系，抑制 C1-和 Na+的重吸收，使管腔液NaCl 的浓度增高，渗透压增大，肾髓质间液的 NaCl 减少，渗透压梯度降低，从而干扰尿的浓缩过程，使尿 Na+，Cl-和水的排泄增加。由于在原药合成过程中使用了有机溶剂甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯，在成品中可能会有一定量的残留。按中国药典 2010 年版（附录）规定，该 5 种有机溶剂均有残留限量。笔者参考了有关文献采用直接进样毛细管气相色谱法，测定了托拉塞米原料药中甲醇、乙醇、二氯
3、甲烷、乙酸乙酯、甲苯的残留量。方法简便、灵敏，结果准确可靠。 一、仪器与试药 1.仪器 Agilent 7890A 2.试药 托拉塞米原料药 3 批 二、方法与结果 1.色谱条件 DB-624（30m530m3.0m）毛细管柱； 程序升温，起始 40，保持 10min，以每分钟 10升至 100，保持 2min，再以每分钟 40升至 220，保持 3min； FID 检测器，检测器温度 250；进样口温度：200；分流比：5：1； 以 DMSO 为溶剂，直接进样 1l。 2.供试品溶液与对照品溶液的制备 对照品溶液：精密称取甲醇 0.3g，乙醇 0.5g 二氯甲烷 0.06g，乙酸乙酯 0.5
4、g 和甲苯 0.089g，置 50ml 容量瓶中，加 DMSO 稀释并定容到刻度，摇匀；精密量取 5ml，置 100ml 容量瓶中，加 DMSO 稀释并定容到刻度，摇匀。 供试品溶液：取供试品 0.1g，精密称定，加 1mlDMSO 溶解，摇匀。 3.系统适用性溶液 取 DMSO 空白溶剂 1l 进行测定，结果表明溶剂无干扰。取对照品 溶液 1l 进行测定，记录色谱图，甲醇 tR5.9min，乙醇tR8.0min，二氯甲烷 tR10.8min，乙酸乙酯 tR14.4min，甲苯tR19.3min。结果表明，各被测溶剂之间分离良好。 4.线性范围及标准曲线 取甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯
5、适量，精密称定，用DMSO 稀释制成一系列溶液，照上述色谱条件分别进行测定，以被测物峰面积为纵坐标，以被测物的质量浓度为横坐标进行线性回归。上述 5 种被测物的线性范围（g/ml）依次是：30.0360， 50.0600，6.072.0，50.0600，8.9106.8。回归方程及相关系数依次是： Y1 = 1206.3X1 - 3.8843，r1=0.9998； Y2 =1502.9X2 - 13.1780，r2=0.9999； Y3= 1577.4X3 - 0.9426，r3=0.9999； Y4= 5350.2X4 - 12.9950，r4=0.9997； Y5 =7191.7X5 -
6、2.2386， r5=0.9999。 5.精密度实验 在上述色谱条件下，取对照品溶液，连续进样 6 次，计算对照品溶液中被测溶剂的 RSD 依次为甲醇 3.56% ，乙醇 3.72%，二氯甲烷 2.96%，乙酸乙酯 2.82%，甲苯 3.76%。 6.最低检测限 取对照品溶液用 DMSO 逐步稀释，依据 S/N3，确定甲醇，乙醇，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲苯的最低检测限依次是1.2，9.6，3.8，1.2，0.5。 7.回收率实验 取甲醇 0.30g，乙醇 0.5g，二氯甲烷 0.06g，乙酸乙酯 0.5g，甲苯 0.89，精密称定，置已加少许 DMSO 的 10ml 容量瓶中，加 DMSO 至刻
7、度，摇匀。移取储备液 1.0ml，置 10ml 容量瓶中，加 DMSO 至刻度，摇匀，即得每 1ml 中含甲醇 3000g，乙醇 5000g，二氯甲烷 600g，乙酸乙酯 5000g，甲苯 890g 的混合溶液。 溶液 1： 精密移取混合溶液 0.8ml，置 10ml 容量瓶中，加 DMSO 至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 80%溶液。 溶液 2： 精密移取混合溶液 1.0ml，置 10ml 容量瓶中，加 DMSO 至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 100%溶液。 溶液 3： 精密移取混合溶液 1.2ml，置 10ml 容量瓶中，加 DMSO 至刻度，摇匀，即得对照品溶液的 120%溶液。 取相
8、同批次的托拉塞米 0.1g，精密称定，平行 9 份，分别移取溶液1、溶液 2 和溶液 3 各 1.0ml 溶解，每 3 份加一种溶液，分别摇匀，即得9 份供试品溶液。按外标法以峰面积计算回收率。回收率依次分别为：103.7%，105.1%，104.4%，102.2%，101.4%，RSD 在 2.42%4.19%之间。8.供试品的测定 照 2.2 项下的方法制备供试品溶液与对照品溶液， 在上述色谱条件下测定，3 批原料药中检测出甲醇分别为 0.001%，0.001%，0.001%，检测出乙醇分别为 0.2%，0.2%，0.2%，其他溶剂未检出。 三、讨论 本方法简便、灵敏、精密度、回收率符合中国药典 2010 年版的要求，因此本色谱方法适用于托拉塞米有机溶剂残留量的检测。
