1、 填空题 1、分子生物学研究内容主要包括以下四个方面： DNA 重组技术 、基因表达调控研 究 基因组、功能基因组与生物信息学 和 生物大分子的结构功能研究 2、原核生物中一般只有一条染色体且大都带有单拷贝基因，只有很少数基因是以多拷贝形式存在，整个染色体DNA 几乎全部由 功能基因 与 调控序列 所组成。 3、核小体是由 H2A、 H2B、 H3、 H4 各两个分子生成的 八聚体 和由大约 200bp DNA 组成的。八聚体在中间， DNA 分子盘绕在外，而 H1 则在核小体的外面。 4、错配修复系统根据“ 保存母链 ， 修正子链 ”的原则，找出错误碱基所在的 DNA 链，进行修复。 5、基
2、因表达包括 转录 和 翻译 两个阶段， 转录 阶段是基因表达的核心步骤， 翻译 是 基因表达的最终目的。 6、 10 位的 TATA 区和 35 位的 TTGACA 区是 RNA 聚合酶与启动子的结合位点，能与因 子相互识别而具有很高的亲和力。 7、核糖体小 亚基负责 对模板 mRNA 进行序列特异性识别 ，大亚基负责 携带氨基酸及 tRNA 的功能 8、 DNA 后随链合成的起始要一段短的 _ RNA 引物 _，它是由 _ DNA 引发酶 _ 以核糖核苷酸为底物合成的。 9、帮助 DNA 解旋的 _单链 DNA 结合蛋白 _与单链 DNA 结合，使碱基仍可参与模板反应。 10、真核生物的 m
3、RNA 加工过程中 ,5 端加上 _帽子结构 _，在 3 端加上 _多腺苷化尾 _，后者由 _ poly(A)聚合酶 _催化。如果被转录基因是不连续的，那么， _内含子 _一定要被切除，并通过 _剪接 _过程将 _外显子 _连接在一起。这个过程涉及很多 RNA 分子，如 U1 和 U2 等，它们被统称为 _ snRNA _。它们分别与一组蛋白质结合形成 _ snRNP _，并进一步地组成 40S 或 60S 的结构，叫 _剪接体 _。 二、选择题 1、 c 2、 a 3、 d 4、 b 5、 b 6、 ace 7、 c 8、 bc 9、 ac 10、 cd 1、证明 DNA 是遗传物质的两个关
4、键性实验是：肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是：（ C ） (a)从被感染的生物体内重新分离得到 DNA，作为疾病的致病剂 (b)DNA 突变导致毒性丧失 (c)生物体吸收 的外源 DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 (d)DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 2、 1953 年 Watson 和 Crick 提出：（ A ） （ a）多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 （ b） DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本 子代双螺旋杂合链 （ c）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 （ d）遗传物质通常是 D
5、NA 而非 RNA 3、原核细胞信使 RNA 含有几个功能所必需的特征区段，它们是：（ D ） （ a）启动子， SD 序列，起始密码子，终止密码子，茎 环结构 （ b）启动子，转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的 SD 序列和 ORF，尾部序列，茎环结构 （ c）转录起始位点，尾部序列，由顺反子间区序列隔开的 SD 序列和 ORF，茎环结构 （ d）转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的 SD 序列和 ORF，尾部序列 4、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述 （ B ） （ a） 因子、 核心酶和双链 DNA 在启动子形成的复合物 （ b）全酶、模板 DNA 和新生 R
6、NA 形成的复合物 （ c）三个全酶在转录起始点形成的复合物 （ d） 因子、 核心酶和促旋 酶形成的复合物 5、色氨酸操纵子的调控作用是受两个相互独立的系统控制的，其中一个需要前导肽的翻译，下面哪一个调控这个系统？（ B ） （ a）色氨酸 （ b）色氨酰 -tRNATrp （ c） 色氨酰 -tRNA （ d） cAMP 二）多选题 6、 DNA 的变性：（ ACE ） （ a）包括双螺旋的解链 (b）可以由低温产生 （ c）是可逆的 （ d）是磷酸二酯键的断裂 （ e）包括氢键的断裂 7、 DNA 在 30nm 纤丝中压缩多少倍？（ C ） （ a） 6 倍 （ b） 10 倍 （ c）
7、 40 倍 （ d） 240 倍 8、 tRNA 参与的反应有：（ BC ） （ a）转录 （ b）反转录 （ c）翻译 （ d）前体 mRNA 的剪接 9、对于一个特定的起点，引发体的组成包括：（ AC ） （ a）在起始位点与 DnaG 引发酶相互作用的一个寡聚酶 （ b）一个防止 DNA 降解的单链结合蛋白 （ c） DnaB 解旋酶和附近的 DnaC,DnaT,PriA 等蛋白 （ d） DnaB，单链结合蛋白， DnaC,DnaT,PriA 蛋白和 DnaG引发酶 （ e） DnaB 解旋酶， DnaG 引发 酶和 DNA 聚合酶 lll 10、下面哪些真正是乳糖操纵子的诱导物？（
8、CD ） （ a）乳糖 （ b） ONPG （ c）异丙基 - -半乳糖苷 （ d）异乳糖 三、判断题 1、错 2、错 3、正确 4、正确 5、正确 6、错 7。对 8、对 9、对 10 对 1、高盐和低盐条件下由 DNA 单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性（退火）反应。（ ） 2、 B 型双螺旋是 DNA 的普遍构型，而 Z 型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。（ ） 3、所谓半保留复制就是以 DNA 亲本链作为合成新子链 DNA 的模板，这样产生的新的双链 DNA 分子由一条旧链和一条新链组成。（ ） 4、“模板”或“反义” DNA 链可定义为：模板链
9、是被 RNA 聚合酶识别并合成一个互补的 mRNA,这一 mRNA 是蛋白质合成的模板。（ ） 5、 DNA 的 5 -3 合成意味着当在裸露 3 -OH 的基团中添加 dNTP 时，除去无机焦磷酸 DNA 链就会伸长。（ ） 6、在先导链上 DNA 沿 5 -3 方向合成，在后随链上则沿 3 -5 方向合成。（ ） 7、多顺反子 mRNA 是协同调节的原因。 （ ） 8、 Lac 阻遏物是一种由 4 个相同的亚基组成的四聚体。 （ ） 9、 CAP 和 CRP 蛋白是相同的。 （ ） 10、 AraC 蛋白既可以作为激活蛋白，又可以作为阻遏蛋白起作用。 （ ） 三、判断题四、名词解释 2、碱
10、基切除修复 研究发现，所有细胞 中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的 N-糖苷键，在 DNA 链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为 AP 位点。 DNA 分子中一旦产生了 AP位点， AP 核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷 -磷酸键切开，并移去包括 AP 位点核苷酸 在内的小片段 DNA，由 DNA聚合酶 I 合成新的片段，最终由 DNA 连接酶把两者连成新的被修复的 DNA 链 。 3、有意义连（ sense strand） 与 mRNA 序列相同的那条 DNA 链称为编码链（ coding strand）或称有意义连（ sense strand）。
11、4、锌指结构 锌指结构家族蛋白大体可分为锌指、锌钮 (twist)和锌簇 (cluster)结构，其特有的半胱氨酸和组氨酸残基之间氨基酸残基数基本恒定，有锌参与时才具备转录调控活性。重复的锌指样结构都是以锌将一个螺旋与一个反向平行片层的基部以锌原子为 中心，通过与一对半胱氨酸和一对组氨酸之间形成配位键相连接，锌指环上突出的赖氨酸、精氨酸参与 DNA 的结合。 5、物理图 人类基因组的物 理图是指以已知核苷酸序列的 DNA 片段（序列标签位点， sequence-tagged site， STS）为“路标”，以碱基对（ bp， kb， Mb）作为基本测量单位（图距）的基因组图。任何 DNA 序列
12、，只要知道它在基因组中的位置，都能被用作 STS 标签。物理图的主要内容是建立相互重叠连接的“相连 DNA 片段群”（ contigs），并用 PCR 方法予以证实。 五、简答题 1、解释在 DNA 复制过程中，后随链是怎样合成的。 后随链 的引发过程往 往由引发体（ primosome）来完成。引发体由 6 种蛋白质 n、 n、 n、 Dna B、 C 和 I 共同组成，只有当引发前体（ preprimosome）把这 6 种蛋白质合在一起并与引发酶（ primase）进一步组装后形成引发体，才能发挥其功效。引发体像火车头一样在滞后链分叉的方向上前进，并在模板上断断续续地引发生成滞后链的引物
13、 RNA 短链，再由 DNA 聚合酶 III 作用合成 DNA，直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。由 RNase H 降解RNA 引物并由 DNA 聚合酶 I 将缺口补 齐，再由 DNA 连接酶将两个冈崎片段连在一起形成大分子 DNA。 3、转座作用的遗传学效应。 转座引起插入突变。转座产生新 的基因。转座产生的染色体畸变 。 转座引起的生物进化。 4、因子的作用。 亚基可能与核心酶的组装及启动子识别有关，并参与 RNA 聚合酶和部分调节因子的相互作用。因子可以极大地提高 RNA 聚合酶对启动子区 DNA 序列的亲和力。 因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性
14、识别模板上的启动子。因子不仅增加 聚合酶对启动子的亲和力，还降低了它对非专一位点的亲 和力。 5、原核与真核生物 mRNA 的特征比较。 原核生物 mRNA 的特征： 1. 半衰期短。 2. 许多原核生物 mRNA 以多顺反子的形式存在。 3. 原核生物 mRNA的 5端无帽子结构， 3端没有或只有较短的多聚（ A）结构。 真核生物 mRNA 的特征： 1. 真核生物 mRNA 的 5端存在“帽子”结构。 2. 绝大多数真核生物 mRNA 具有多聚 (A)尾巴。 6、 I 类内含子的自我剪切过程。 在 I 类内含子切除体系中，鸟苷或鸟苷酸的 3 -OH 作为亲核基团攻击内含子 5端的磷酸二酯键
15、，从上游切开RNA 链。再由上游外显子的自 由 3 -OH 作为亲核基团攻击内含子 3位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键相连。 7、 Sanger 双脱氧链终止法。 英国剑桥大学分子生物学实验室 的 F. Sanger 等人于 1977 年发明了利用 DNA 聚合酶的双脱氧链终止原理测定核苷酸序列的方法。由于这种方法要求使用一种单链 DNA 模板和一种适当的 DNA 引物，因此有时也称为引物合成法或酶催引物合成法。它利用了 DNA 聚合酶所具有的两种酶催反应的特性：第一， DNA 聚合酶能够利用单链的 DNA作模板，合成出准确的 DNA 互补链； 第
16、二， DNA 聚合酶能够利用 2， 3-双脱氧核苷三磷酸作底物，将其掺入到寡核苷酸链的 3-末端，从而终止 DNA 链的生长。 9、假定你从一新发现的病毒中提取了核酸。请用最简单的方法确定： 1）它是 DNA 还是 RNA？（ 2）它是单链还是双链？ 确定碱基比率。如果有胸腺嘧啶，为 DNA，如果有尿嘧啶，则为 RNA。如果为双链分子，那么 A与 T（或 U）的量以及 G 或 C 的量应相等。 10、热激蛋白调控的基因表达机制。 许多生物在最适温度范围以上，能受热诱导合成一系列热休克蛋白（ heat shock protein）。受热后 ，果蝇细胞内 Hsp70 mRNA 水平提高 1 000
17、 倍，就是因为热激因子（ heat shock factor， HSF）与 hsp70 基因 TATA 区上游 60bp处的 HSE 相 结合，诱发转录起始。 在没有受热或其他环境胁迫时， HSF 主要以单体的形式存在于细胞质和核内。单体 HSF 没有 DNA 结合能力， Hsp70可能参与了维持 HSF 的单体形式。受到热激或其他环境胁迫时，细胞内变性蛋白增多，它们都与 HSF 竞争结合Hsp70，从而释放 HSF，使之形成三体并输入核内。 HSF 一旦形成三体，便拥有与 HSE 特异结合、促进基因转录的功 能。这种能力可能还受磷酸化水平的影响，因为热激以后， HSF 不但形成三体，还会迅速
18、被磷酸化。 HSF与 HSE的特异性结合，引起包括 Hsp70 在内的许多热激应答基因表达，大量产生 Hsp70 蛋白。随着热激温度消失，细胞内出现大量游离的 Hsp70 蛋白，它们与 HSF 相结合，形成没有 DNA 结合能力的单体并脱离 DNA。 六、问答题 1、描述蛋白质的生物合成过程 。 要点：蛋白质 的生物合成是一个比 DNA 复制和转录更为复杂的过程。它包括： 翻译的起始 核糖体与 mRNA 结合并与氨基酰 -tRNA 生成起始复合物。 肽链 的延伸 由于核糖体沿mRNA5 端向 3 端移动，开始了从 N 端向 C 端的多肽合成，这是蛋白质合成过程中速度最快的阶段。 肽链的终止及释
19、放。核糖体从 mRNA 上解离，准备 新一轮合成反应。 2、比较原核生物和真核生物基因调控的异同点。 1、 转录因子是与称之效应成分的特殊的 DNA 序列相互作用的 DNA 结合蛋白，效应成分位于基因的调节区或启动子区。 在细菌系统中，这些效应成分称为操纵基因部位。转录因子激活还是阻遏转录取决于启动子前后序列和细胞的生理状态。转录因子的 DNA 结合活性常常可以被效应分子调节。 2、 E.coli 中的 lac 操纵子是由一套编码用于乳糖代谢的酶的基因。这些基因被转录为单一一条顺反子 mRNA 的一部分。 lac 操纵子的转录受到 LacI 阻遏物和 CAP 的调控。乳糖和其它的半乳糖苷，例如
20、 IPTG 结合 LacI 阻遏物并且使它的特殊序列结合活性下降 1000 倍。在乳糖存在下， lac 操纵子被转录，合成乳糖代谢需要的蛋白质。 3、 CAP 是 lac 操纵子的正调节剂，当存在乳糖（ LacI 是非活性的）并且葡萄糖水平低时，它能够很强地促进 lac表达。在这样的条件下， CAP-cAMP 复合物结合 lac 操纵基因并直接与 RNA 聚合 酶的亚基相互作用。人们认为这种相互作用可以促进 RNA 聚合酶结合启动子和开放起始复合物的形成。 4、 ara 操纵子受到 AraC 活性的正调节， AraC 既可以作为 ara 操纵子转录的阻遏物，也可以作为它的激活剂，主要取决于细胞
21、内阿拉伯糖和葡萄糖的浓度。在缺少阿拉伯糖时， AraC 是一个阻遏物结合位于 ara 操纵子内的两个分开的操纵基因部位，导致一个抑制 DNA 环的形成。然而当阿拉伯糖存在以及 CAP-cAMP 复合物存在时，抑制DNA 环被破坏， CAP-cAMP 复合物能促进 ara 操纵子的转录。 5、 trp 操纵子从两个水平上控 制色氨酸生物合成酶的生产 , 取决于细胞内色氨酸的浓度。当色氨酸水平高时， Trp阻遏物 -色氨酸复合物形成， Trp 阻遏物结合 trp 操纵子抑制转录。 第二水平调控称之衰减作用，当 Trp-tRNATrp 丰富时和一个终止结构形成时，衰减作用使得转录提前终止，导致RNA
22、 聚合酶从 DNA 上脱落下来。 6、 甾类激素受体是配体依赖性的转录因子，它们通过与靶基因应答成分结合将激素信号直接转导到核。这些受体是诱导还是阻遏转录取决于配体的可利用性和启动子的前后序列。甾类激素受体以同源二聚体与回文 DNA 序列结合 。 7、 大多 数转录因子都含有功能结构域，这些因子中的 DNA结合结构域大体有螺旋 -转角 -螺旋（ helix-turn-helix）、锌指（ zinc fingers）和亮氨酸拉链（ leucine zippers） 3 种主要类型。螺旋 -转角 -螺旋基元由两个 -螺旋和一个 -转角组成，用来结合许多原核生物和某些真核生物中的特异的 DNA 序列
23、； 锌指基元是由锌离子通过配位键与组氨酸和半胱氨酸残基形成的，不同蛋白中的锌指数目不同，锌指蛋白 TFIIIA通过结合于基因的转录部分内的控制区调控小的核糖体 RNA（ 5SrRNA）的转录。 在亮氨 酸拉链基元中相邻链内的亮氨酸象两手手指那样交叉锁住，提供了可将两个 -螺旋结合在一起的疏水堆积相互作用。这种基元被不同的真核生物转录因子用来产生用于结合 DNA 的二聚体结构。 3、衰减作用如何调控大肠杆菌中色氨酸操纵子的表达？ 转录的弱化理论认为 mRNA 转录的终止是通过前导肽基因的翻译来调节的。因为在前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，所以这个前导肽的翻译必定对 tRNATrp 的浓度敏
24、感。当培养基中色氨酸的浓度很低时，负载有色氨酸的 tRNATrp 也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当 4 区 被转录完成时，核糖体才进行到1 区（或停留在两个相邻的 trp 密码子处），这时的前导区结构是 2-3 配对，不形成 3-4 配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将 trp 操纵子中的结构基因全部转录。 而当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在 4 区被转录之前，核糖体就到达 2 区，这样使 2-3 不能配对， 3-4 区可以自由配对形成茎 -环状终止子结构，转录停止， trp 操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸。所以，弱
25、化子对 RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的 位置。 一、填空（每空 1 分， 共 15 分） 1.DNA 修复包括 3 个步骤 ： 核酸外切 酶对 DNA 链上不正常碱基的识别与切除， DNA 聚合酶 I 酶对已切除区域的重新合成， 连接 酶对剩下切口的修补。 2.真核生物的序列大致可以分为： 不重复序列 ，中度重复序列和高度重复序列； 3.转座子的类型有 单拷贝序列 和 复合转座子 ， TnA 家族和转座噬菌体； 4.RNA 的转录包括转录启始， 延伸（延长） 和终止三过程； 5.tRNA 的种类有起始 tRNA， 延伸 tRNA ，同工 tRNA 和校正 tRNA； 6.蛋白
26、质运转可分为两大类：若某个蛋白质的合成和运转是同时发生的，则属于 翻译运转同步机制 运转同步机制；若蛋白质从核糖体上释放后才发生运转，则属于 翻译后运转机制 运转机制； 7.在 PH8.0 时核酸分子带 负 电，在电场下向 正 级移动； 8.质粒 DNA 及其分离纯化的方法主要有 氯化铯密度梯度离心 和碱变性法； 9.乳糖操纵子的体内功能性诱导物是 别乳糖 ； 10.染色体中参与复制的活性 区呈 Y 型结构，称为 复制叉 ； 二、选择选择 1.C;2.D;3.C;4.A;5.D;6.A;7.A;8.A;9.B;10.C 1.DNA 的二级结构指：（ C ）； A：是指 4 种核苷酸的连接及其排
27、列顺序，表示了该 DNA 分子的化学构成； B：是指 DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构； C：是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。 2.下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分（ D ） A： H1 B： H2A 、 H2B C： H3、 H4 D： H5 3.下面那一项不属于原核生物 mRNA 的特征（ C ） A： 半衰期短 B：存在多顺反子的形式 C： 5端有帽子结构 D： 3端没有或只有较短的多聚（ A）结构 4.1972 年，第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是 （ A ） A： EcoR I B:EcoB C:EcoC D:EcoR II 5.下面那项不属于
28、原核生物操纵元的结构 D A：启动子 B：终 止子 C：操纵子 D：内含子 6.下列叙述不正确的是： A A:共有 20 个不同的密码子代表遗传密码 B：每个核苷三联体编码一个氨基酸 C：不同的密码子可能编码同一个氨基酸 D：密码子的第三位具有可变性 7.反密码子中那个碱基对参与了密码子的简并性（摇摆） （ A ） A：第一个 B：第二个 C：第一个与第二个 D：第三个 8.Shine-Dalgarno 顺序 (SD-顺序 )是指 : A A.在 mRNA 分子的起始码上游 8-13 个核苷酸处的顺序 B.在 DNA 分子上转录起始点前 8-13 个核苷酸处的顺序 C.16srRNA3端富含嘧
29、啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征 9.下列有关 TATA 盒 (Hognessbox)的叙述 ,哪个是正确的 : B A：它位于第一个结构基因处 B：它和 RNA 聚合酶结合 C：它编码阻遏蛋白 D：它和反密码子结合 10.tRNA 的分子结构特征是 : C A：密码环 B： 5-端有 -C-C-A C：有反密码环和 3-端 -C-C-A D：有反 密码环和 5端 -C-C-A 三、 判断题（每题 1 分，共 10 分） 1. ;2. ;3. ;4. ;5.; 6. ;7. ;8. ;9. ;10. ; 1 双链 DNA 中作为模板的那条链称为有意义链；（ ） 2 转录原点记为 +1，其上
30、游记为正值，下游记为负值；（ ） 3 tRNA 都必须通过 A 位点到达 P 位点，再由 E位 点离开核糖体； （ ） 4 琼脂糖凝胶分辨 DNA 片段的范围为 0.2 50kb 之间，聚丙烯酰胺凝胶，其分辨范围为 1 个碱基对到 1000个碱基对之间；（ ） 5 在先导链上 DNA 以 5 3方向合成，在后随链上则沿 3 5方向合成；（ ） 6 DNA 的复制需要 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶；（ ） 7 在转录终止子柄部的 A T 碱基对可以增强结构的稳定性；（ ） 8 RNA 聚合酶同操纵基因结合（ ） 9 转座要求供体和受体位点之间有同源性 10.高等真核生物的大部分 DNA 是不
31、编码蛋白质的（ ） 1 突变 是指可以通过复制而遗传的 DNA结构的任何永久性改变。 2 启动子 是一段位于结构基因 5 端上游区的 DNA 序列，能活化 RNA 聚合酶，使之与范本 DNA 准确地相结合并具有转录起始的特异性。 3.翻译 指以新生的 mRNA 为模板，把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、合成多肽链的过程，是基因表达的最终目的。 4.基因工程 是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达。 5. 细菌转化 是指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的 DNA 而导致性状特征发生遗传改
32、变的生命过程。 6. 基因家族 是指 真核细胞中许多相关的基 因常常按功能成套组合，被称为基因家族 9. PCR 是一种在体外快速扩增特定基因或 DNA 序列的方法 , 即在 DNA 聚合酶作用下，经过 DNA 解链（变性）、引物与模板 DNA 相结合（退火）、 DNA 合成（链的延伸）三步，不断重复，最终将目的核酸扩增的技术。 7. 应答元件 是指 能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的 DNA上游序列 简答题 1 简 述真核生物与原核生物转座模式的异同点； 相似处 ： 靶位点中 stagger cut 序列以 DR 形式出现在转座因子两侧 转座因子的 IR 序列是转座酶的识
33、读 和作用的位点 转座子的准确切除将引起靶基因的回复突变 不同点； 原核生物： copy 的复制与转移；转座与切除是不同的事件；非准确切除表现缺失，倒位效应。 真核生物： copy 的复制与转移，但多 数情况为切除后再整合；切除、整合、转座为同一事件的不同过程；非准确切除主要表现 footprint 效应。 2 简述原核生物 RNA聚合酶各组成部分的主要功能； 位于前端的因子使双链解链为单链；位于尾端的因子使单链新聚合为双链、因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板上 的启动子、因子完成 NTP 之间的磷酸酯键的连接、 因子促使 RNApol 与非模板链
34、（ sense strand）结合 3 简述核糖体的活性位点有那些； 核糖体包括至少 5 个活性中心，即 mRNA 结合部位、结合或接受 AA- tRNA 部位（ A 位）、结合或接受肽基 tRNA的部位、肽基转移部位（ P 位）及形成肽键的部位（转肽酶中心），此外还有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。 4 简述抗菌素对蛋白质合成抑制的可能作用方式； 抗菌素对蛋白质合成的作用可能是阻止 mRNA 与核糖体结合（氯霉素），或阻止 AA-tRNA 与核糖体结合（四环素类），或干扰 AA-tRNA 与核糖体结合而产生错读（链霉素、新霉素、卡那霉素等），或作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成。 5 简述
35、分子生物学研究的三大理论和两大技术保证； 三大理论基础 ： 1. 40 年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是 DNA 而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题； 2. 50 年代提示了 DNA 分子的双螺旋结构模型和半 保留复制机制 ,解决了基因的自我复制和世代交替问题； 3. 50 年代末至 60 年代，相继提出了 “中心法则 “和操纵子学说 ,成功地破译了遗传密码，充分 认识了遗传信息的流动和表达。 两大技术保证： 1.DNA 的体外切割和连接， 2.DNA 的核苷酸序列分析技术 生物学研究的三大理论和两大技术保证； 6 简述核酸杂交的原理； 将带有互补的特定核苷酸序列的单链 DN
36、A 或 RNA 混合在一起，其相应的同源区段就会退火形成双链结构。如果退火的核酸来自不同的生物有机体，所形成的双链分子就被称为杂种核酸分子 8. 述 原核生物的转录后调控方式 ； （ 1）可诱导调节 （ 2）可阻遏调节 （ 1）可诱导调节 是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状 态，即在某些物质的诱导下使基因活化。 （ 2）可阻遏调节 这类基因平时都是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。 六、问答题 区别可诱导和可阻遏的基因调控方式。 A 卷 一、填空题： 1. 分子生物学是从 分子水平 研究
37、生命现象 、 生命的本质 。 生命活动及其规律 的科学。 2. 人类基因组包括两个部分 DNA 即 染色体 DNA （或单倍体 DNA）（核内 DNA 0.5 分）和 染色体外 DNA（线粒体 DNA）（核外 DNA0.5 分） 3. 主要的 DNA 修复方式： 重组修复 、 切除修复 和 SOS 修复 。 4. 真核生物转录水平的调控主要是通过 顺式作用元件 、 反式作用因子 和 RNA 聚合酶的相互作用来完成。 5 可用于分析基因转录水平变化的技术有 Northern blot (DNA 芯片 )（ 核酸分子杂交 0.5 分） 和 RT-PCR 。 6. 反义 RNA 是指能与 mRNA
38、互补配对的 RNA 分子。 7. 基因突变主要是 DNA 一级结构的改变，其分子机制可以 是替换、 插入 或 缺失 等。 8. 基因治疗的策略： 基因添加（增补） 、 基因干预 、 基因置换 、导入自杀基因、基因修饰。 9. 在特定环境信号刺激下，有些基因的表达表现为开放或增强，这种表达方式称为诱导表达 ，相反，有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称为 阻遏表达 。10. 写出三种真核细胞转染的方法 磷酸钙共沉淀法 、 电穿孔法 、 DEAE 葡聚糖法 、 显微注射法 、 脂质体介导法 。 二、单项选择题： 1.增强子的作用是 （ B ） A.增强 DNA 复制 B.增强基因转录 C.
39、增强基因稳定性 D.增强 RNA 的稳定性 2.反式作用因子的激活方式不包括 （ D ） A.表达式调节 B.共价修饰 C.蛋白质相互作用 D.DNA 成环 3.以下哪项不是目前使用的研究转录子组 的主要方法 （ D ） A.基因芯片技术 B.表达系列分析 C.差异显示 PCR D.Western blot 4.无义突变是 （ B ） A.产生另一种氨基酸序列不同的蛋白质 B.突变后产生缩短的多肽链 C.产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质 D.突变毫无意义 5.质粒是 （ A ） A.环状双链 DNA B.线性双链 DNA C.环状单链 DNA D.线性单链 DNA 6.可检测基因拷贝数变化的是
40、 （ C ） A.生物质谱技术 B.双向电泳 C.Southern blot D.RNAi 7.以下哪种因素不直接影响转录的是 （ D ） A.启动子 B.阻碍蛋白 C.基因激活蛋白 D.SD 序 列 8.限制性核酸内切酶可对 （ A ） A.双链 DNA 的特异部位进行切割 B.单链 DNA 的特异部位进行切割 C.多肽链的特异部位进行切割 D.mRNA 的特异部位进行切割 9.以下哪项是原核生物基因组的结构特点 （ C ） A.由 DNA 或 RNA 组成 B.有单链、双链之分 C.操纵子结构 D.与组蛋白结合 10.以下哪项属于启 动子和上游启动子元件 （ C ） A.内含子 B. 外显
41、子 C.TATA 盒 D.终止子 三、简答题 : 2.简述乳糖操纵子的结构 有三个结构基因 Z、 Y、 A，（ 1 分），启动子（ P）、（ 1 分），操纵元件（ O）、（ 1 分） CAP 结合位点、（ 1 分），启动子、操纵元件和 CAP 结合位点一起构成糖操纵子的调控区、（ 1 分）（如果不写调控区，写 I 基因是调节基因，编码阻遏蛋白。可给 1 分）。 3.什么是 SOS 修复 ? 指 DNA 损伤严重时，应急而诱导 产生的修复作用，称为 SOS 修复。（ 1）当 DNA 双链发生高密度大片段损伤 , 原有的 DNA 聚合酶活性减低。（ 1）细胞紧急启动应急修复系统，诱导产生新的 DN
42、A 聚合酶或修饰原有的 DNA 聚合酶。（ 1） 这种新的 DNA 聚合酶或修饰的 DNA 聚合酶活性低， 识别碱基的精度差，无校对功能，（ 1）因此易造成 DNA 复制错误，甚至引起基因突变。（ 1） 4.什么是错义突变 ? 由于 DNA 分子中碱基的取代（ 1） ,经转录产生 mRNA 后 ,相应的密码子发生了变化 1 分 , 使决定某一氨基酸的密码子变为另 一种氨基酸的密码子 , （ 1） 能使它所编码的蛋白质的氨基酸组成和排列顺序都发生了改变 1 分。这种基因突变叫错义突变。（ 1） 5.What is RNA interference (RNAi) ? RNAi 即 RNA 干扰（涉
43、）。（ 1）是将一段短双链的 RNA 1 分序列导入机体或细胞中 , （ 1）诱导机体或细胞中与之有同源的序列 mRNA 发生降解，（ 1）导致基因的表达受到抑制 ,甚至表达受到完全抑制的现象。（ 1） 6.简述 PCR 的应用？ 进行 DNA 1 分体外扩增 1 分 , 基因克隆 1 分 , 分析基因拷贝数 1 分 , 基因诊断 1 分。 7.What is gene therapy? 基因治疗（ 1 分）是将目的基因 1 分导入靶细胞内（ 1 分），成为宿主细胞遗传物质的一部分（ 1 分），目的基因表达产物对疾病起治疗作用（ 1 分）。 8.简述人类基因组计划的研究目标及研究内容 研究目标： 阐明构成人类的全部 DNA 的结构（ 1 分）；阐明基因的编码方式和分布特点（ 1 分）； 理解基因及其调控序列之间的相互关系（ 1 分）；理解 DNA 全部序列所蕴藏的意义（ 1 分）。 研究内容：完成遗传图谱、物理图谱、序列图谱、转录图谱分析（ 1 分）。 四、论述题 : 1.已知一个基因的 cDNA 序列，现在要把该基因插入质粒载体中，论述其基因克隆的过程。 获得目的基因（ 1 分） .根据该基因的 cDNA序列从 cDNA文库中获得（ 1 分） ; 人工合成（ 1 分） ; 提取 mRNA,RT-PCR扩增获得目的基因（ 1 分） . 选择合适的载体 (1 分 ).DNA 分子的
