1、有关乳制品中乳糖检验方法探析摘要:本文主要针对乳与乳制品中乳糖的检验方法展开讨论,经过大量的实验后,发现此方法与 GB/T5413-1997 方法相互进行比较的话,此方法具有更高的准确性。 关键词:乳糖 检验方法 一、绪论 乳糖是乳制品组成成分之一,乳糖含量的多少直接关系到乳及乳制品质量的好坏,是评价乳及乳制品的重要方面之一,这就说明了对乳糖进行检验是一项非常具有必要性的工作。为了把对乳及乳制品中的乳糖进行检验的工作做得更好,节约下更多的时间,大幅度提高检验工作的效率,在平时的日常工作当中,对我们不断进行研究,对于乳及乳制品检验乳糖含量的这些工作有了一些新的认识和新的方法,在实际操作之后,同样
2、取得了不错的效果。 二 、目的与要求 本试验方法需要在恒温的条件下进行培养,最适宜的温度为 30,可以对奶粉进行检验,也可以对乳清粉以及乳糖中所含有的微生物和计算方法进行检验。 三、定义及原理 本实验需要制定标准,通常为 30条件下进行需氧培养后得到的具有具体数目的菌落。通常情况下,要对样品进行稀释处理,稀释的标准为十进位,再在培养皿中进行接种工作,此后可以在 30的恒温条件下进行培养,时间至少要达到 72 小时。选用的计量单位则为微生物(个)/克。 四、选用仪器 此项实验所需要的仪器不算复杂,主要是玻璃器皿以及其他的一些辅助设备。 1.仪器:微生物检验室经常需要使用到的辅助设备大概有以下几种
3、:可以借助加压来达到灭菌手段的灭菌锅、可以提供源源不断热风的烘箱、可以保持恒定温度的培养箱,精度值较高的 PH 值测定仪、具有高精度的精密天平、水浴锅以及放大倍数各异的放大镜。此后还需要一些玻璃器皿,例如稀释瓶,它的容量要在 150250 毫升这个范围标准内,试管所占的容积大概在 20 毫升左右,这一设备的用途主要是用来盛装培养基,选用的吸管嘴要求是完好无损的,并且具有明显的刻度。同时培养皿一定要做到光洁透明,只要达到了较高的光洁度,才不会在实验过程中影响对菌落的计数。这里需要强调的一点是,如果条件不允许的话,也可以选用材质为耐热塑料的培养皿来代替玻璃质地的培养皿。 2.选用的材料和试剂:首先
4、要必备的工具就是漏斗,还需要对溶液进行过滤的滤纸;在擦拭和蘸取溶液的时候,要选用脱脂消毒棉花来完成此项工作;在对溶液进行酸碱度的测试时,要选用的材料为 PH 试纸;需要一定量的碳酸氢钠溶液,浓度标准为 1 克分子;同样需要的还有盐酸溶液,其浓度标准也为 1 克分子。 3.细菌培养基:整个实验过程中,细菌培养基是最为关键的一环,它的组成部分比较多,首先需要的是酵母浸膏,需要的数量为 2.5 克;需要蛋白胨,数量为 50 克;葡萄糖和脱脂奶粉两样,每样各需要 1 克;还需要可以使溶液容易成型凝固的琼脂 1015 克;最后需要的就是水,大概需要 1000 毫升左右。这里我们有一点需要注意,就是如果此
5、培养基被用光之后,如果条件强迫必须对另外一种没有脱脂奶粉成分的培养基进行使用时,一定要考虑到把里面的脱脂奶粉补齐。 针对培养基的成分,也有一定的要求:对酵母浸膏、蛋白胨等进行使用的时候,要确保满足符合细菌培养的一系列要求。对于脱脂奶粉来说,里面不应该出现具有抑制细菌生长功能的物质,现行阶段里,在使用之间一定要用已知的不具有抑制细菌生长功能的脱脂奶粉进行对比试验。如果选用的固体培养基是通过购买的方式得来,那么首先要做的就是补充脱脂奶粉,然后再用碳酸氢钠溶液和盐酸溶液进行酸碱度的调节。具体培养基是怎样生产出来的呢?首先将酵母浸膏等材料按照事先说好的科学比例一样一样地溶解到水中,再选用小火进行加热,
6、此时向水中加入洋菜并且徐徐搅拌直到洋菜全部融化为止,将溶液一直煮到沸腾停止,凉置后进行过滤。再用氢氧化钠溶液或者是盐酸溶液对 PH 值进行调节。 这样制得培养基以后,将上述溶液分别加入不同的三角烧瓶和试管内,在装入试管的时候需要进行长达 15 分钟的高温杀毒。培养基需要在暗室中进行保存,并且保质期极短,一般来说不会超过三个月。 五、操作方法 1.玻璃器皿的准备:首先要将吸管以及培养皿等放进烘箱内进行长达一小时的杀菌工作,在这项工作进行的过程当中,用来盛装培养皿的器具一律不要靠得太近,当灭菌结束后,赶在第一时间内把所含的水蒸汽烘干。 2.培养基的溶解:首先,要把实验需要用到的培养基放到沸水或者是
7、蒸汽中进行溶解,然后转移到水溶锅的上面进行保温处理。这里有一点需要注意的是,为了达到一样的培养基温度,可以将一些琼脂溶液放到热和冷却的装置里面。在对赝品进行检查之前,一定要将赝品摇晃或者是混合均匀,一定要在无菌的条件下打开瓶口,选用同样无菌的工具进行测量,再按照一定的方法进行接种。第一次样品稀释的比例可以选择为 1:10,想要让奶粉更好地溶解,在稀释的过程中可以加入无菌的玻璃珠。再利用无菌吸管把每种稀释浓度的样品分别吸出来,整个接种过程里面要注意的是吸管前端一定不能和培养皿发生接触,接种时不同的浓度同样要选择无菌试管。 3.培养基的注入:观察注入后的培养基,可以看到培养基以圆周的方式进行运动,
8、注入后要将培养皿放到安全的角落,凝固以后再进行恒定培养。这里有一点需要注意的就是把握好时间,这里面稀释和注入的过程是不能超过 15 分钟的。此时培养皿中的培养基已经培养完成,可在每个培养皿中选取 10300 个菌落,再利用公式计算就可以得到我们想要的一些数据。 实际情况中,一模一样的样品或进行平行试验的时候,经常要出现与实际结果相比较大出一些的误差存在。如果发生这样的情况,一定要再次进行检验。 六、结束语 通过一系列的试验可以看出此种检验乳糖的方法同以往相比较的话,运算过程较从前大大简化,通过将检验而来的结果互相比较的话,运用此种方法对乳糖进行检测是切实可行的。 参考文献: 1 钟洪秀,侯彩霞. 利用毛细管电泳测定乳糖的分析J. 中国乳制品. 2008(10) 2 谢合欢,王蓝天,刘金鑫,刘大海,张飞虹,于谦. 借助光折射法来进行牛乳乳糖质量分数测量的可行性分析J. 激光工艺. 20109(09) 3 钟其人,侯赛飞. 不同乳糖检测方法的对比分析J. 乳制品科技. 2009(07) 4 王海洋,贾爱琳,邹昊钦,苗任枫,彭丽霞. 低乳糖测量的研究J. 中国工业科技. 2011(09) 作者简介: 曲海波(1980-) ,女,工程师,从事食品检测方面的研究工作。