出凝血疾病的检测.pptx

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资源描述

1、中国医学科学院血液病医院临床检测中心止血血栓室 孙海燕,出凝血疾病的检测,生理性止血,血管损伤,血管收缩,血管内皮下组织,5-HT、TXA2等,血凝块形成与维持,纤维蛋白网,加固,血小板血栓,抗凝系统,纤溶系统,XII,XIIa,XI,XIa,IX,IXa,X,Xa,II,IIa,I,Is,Ii,XIII,XIIIa,VII,VIIa,VIII,VIIIa,TF +Ca2+,前激肽释放酶,激肽释放酶,丢失不引起出血,Va,V,Ca2+,PL,HMW-K,PL,凝血瀑布,凝血因子活性测定,凝血因子活性测定,原理:凝血因子活性是通过其纠正乏该因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。梯度稀释已知凝

2、血因子活性的血浆(标准品),与乏该因子的血浆混合,然后做APTT或PT测定,建立参考曲线。受检者血浆与乏该因子的基质血浆混合,测其APTT后PT值,通过标准曲线可计算其凝血因子的活性。因子缺乏或者假性降低:3个浓度当存在狼疮抗凝物等非特异性抗体时,凝血因子活性测定呈现稀释效应,凝血因子活性测定,VIII因子抑制物定量:489 Bethesda,纠正试验,狼疮抗凝物实验室诊断标准,延长的磷脂依赖的凝固时间:APTT、DRVVT、SCT、dPT等抑制的证据:纠正试验延长是磷脂依赖的:DRVVT(或SCT)证实试验、PNP等除外其他的循环抗凝物:因子特异性抗体、DTI、肝素、华法令等补充检测:抗心磷

3、脂抗体、抗2糖蛋白1抗体,*ISTH LA-SSC, 1995 (TH 74:1185) CLSI H-60A (2014),DRVVT (或SCT),DRVVT Screen,RVV,PL (restricted),肝素中和剂,DRVVT Comfirm,RVV,Excess PL,肝素中和剂,阳性:DRVVTScreen/DRVVT Comfirm 1.2,未稀释,1:1,1:2,1:4,1:8,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,0.2ml咪唑,取0.2ml+0.2mlNPP,37孵育2小时,0.2mlNPP+0.2ml咪唑,检测因子活性,计算滴度,患者血浆,Bethesda

4、 Assay操作步骤,因子活性测定,抑制物滴度,凝血四项,遗传性缺乏,获得性缺乏,血友病甲、血友病乙等,肝病、vitk缺乏、华法令治疗、DIC等,因子特异性抗体,狼疮抗凝物,一期止血,一期止血,血小板实验室检测,数量:血小板计数、外周血涂片功能:PFA-100(PFA-200)、血小板聚集试验其他:血小板膜糖蛋白受体、电镜等,PFA-100(200),PFA-100(200)结果解释,血小板聚集试验,血小板与血小板之间相互粘附过程。是形成血小板血栓的基础,也是血小板进一步活化和参与二期止血、促进血液凝固的保证。血小板聚集的要素GPIIb/IIIa ,Fg,Ca2+诱导剂高切变率的条件下,vWF

5、与Fn也参与血小板聚集,21,22,血小板聚集试验在遗传性血小板疾病中的表现,+正常,+增强,反应减弱,-缺乏反应,v差别大,缺乏第二相聚集,血管性血友病(vWD)实验室检测,vWF抗原检测:vWF:AgvWF活性检测:vWF:RCo,vWF:Act凝血因子VIII活性检测:FVIII:C瑞斯托霉素(及小剂量)诱导血小板聚集vWF多聚体分析vWF与胶原结合力:vWF:CB,血管性血友病(vWD)分型,1型:vWF部分缺失3型:vWF完全缺失2型:2A:选择性高中分子量vWF多聚体缺失 2B:功能获得型突变导致vWF与血小板亲和力增加,高分子量vWF多聚体被清除及轻度血小板减少 2M:功能缺失型

6、突变导致vWF与血小板GPIb结合力降低 2N:vWF与VIII结合力降低,导致VIII被清除,vWD的实验室分型诊断,抗凝系统与纤溶系统实验室检测,抗凝蛋白检测: 抗凝血酶III活性测定(ATIII) 蛋白C活性测定(PC) 蛋白S活性测定(游离)(PS free)纤溶系统: 纤溶酶原 tPA PAI-1 D-dimer FDP,易栓症,遗传性:1、抗凝蛋白缺陷:ATIII、PC、PS2、凝血因子缺陷:FV Leiden/FII 20210A、异常纤维蛋白原血症3、纤溶蛋白缺陷:纤溶酶原、tPA缺乏、PAI-1增加4、代谢缺陷:高同型半胱氨酸血症获得性恶性肿瘤、APS、肝病、肾病、凝血因子增

7、加、创伤及围手术期、妊娠、制动、经济舱综合征、避孕药、老龄等等,D-Dimer,对VTE的阴性排除价值增高:老年、新生儿、妊娠、感染、肿瘤、手术、创伤、DIC、VTE、外周动脉病变、溶血、出血、抗血栓治疗、肝肾疾病等,我室的出凝血检测项目汇总,基因检测,分析前因素对结果的影响,出凝血检测的保存条件及间隔(推荐),整合报告,检测科室的职能,检测样本保证结果的准确性提供有临床价值的结果为临床提供必要的咨询,正确解释结果,最大限度提供可利用的信息,整合报告,两种方式:由医师决定患者的检测项目,我们将患者的所有报告整合,就所有的结果做出条理性的解释,阐明其中异常结果的意义,可能会做出诊断性的结论,或者因为对病史了解的局限性只能提出可能性的因素供临床结合患者实际情况矫正,比如用药史,家族史等我们将不同的疾病整合几种不同的检查项目套餐,临床只需根据患者的情况挑选其中一种套餐,我们根据该患者的实际检查结果情况决定接下来做何种检测项目,最后整合报告,出具一整套的诊断性结论的报告,现阶段检测报告的缺陷,只有结果,没有解释检测与临床沟通不足可能导致结果解读不全面,不能最大限度的提供有用信息对患者多次重复的创伤性操作,Thank You,

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