1、一 免疫学概论（张利宁）： Burnet 克隆选择学说和克隆清除学说的内容是什么？ 根据该学说，免疫系统如何区别“自我”和“非我”？ 免疫学的十大前言和热点问题？ （一） Burnet 克隆选择学说（ Clonal selection theory ）： （ 1）在机体发育的早期，体内存在无数种抗原特异性淋巴细胞克隆，每一种 克隆具有特异性 （ 2）胚胎期，抗原与自身成分反应的淋巴细胞克隆结合而被清除，因此，在 成熟的淋巴细胞库中没有这些克隆 （ 3）出生后淋巴细胞与相应抗原的相互作用，引起淋巴细胞的特异性活化和 分化 （ 4）分化后的所有效应细胞具有相同的特异性 Clonal deletio
2、n 克隆清除： 胚胎期，能够识别并结合自身抗原的淋巴细胞克隆被清除或者抑制， 这个过程称为克隆清除，形成禁忌克隆，成熟的淋巴细胞库中没有这些克隆， 出生后机体对自身成分产生免疫耐受。 免疫系统如何区别自我和非我： 自己：胚胎时期和免疫系统接触过的物质 非己（抗原）：胚胎时期没有和免疫系统接触的物质，包括异种抗原、同种 异型抗原、自身抗原 （二） 十大免疫学前言和热点问题： 天然免疫应答和调节机制 T 细胞分化机制及功能调节 B 细胞分化发育和功能活化 NK 细胞活化和功能调节 ILC 细胞分化和功能调控 免疫调节的表观遗传学机制 miRNA 参与免疫应答调控 感染型疾病发病机制和干预策略 自身
3、免疫性疾病发病机制和干预策略 肿瘤的发病机制和干预策略 答案： 列举十大免疫学的前言和热点问题 （ 石永玉 ） 1.免疫识别的结构基础和相关机制 -关键科学问题 适应性免疫： TCR 、 BCR 、抗原表位 固有免疫模式识别受体 如， Toll 样受体 (TLR)：至少有 11 种人的 TLR 和 13 种鼠 TLR NOD 样受体（ NLR） RIG-1 2.免疫系统发生、免疫细胞及亚群 （ 1.）免疫细胞的发育： 淋巴系细胞的发育 ：如 T 细胞在胸腺的发育成熟、 B 细胞在骨髓的发育成熟过程和在外周免疫器官的成熟过程（抗体类型的转换） 髓系细胞细胞 （ DC、巨噬细胞及其亚群形成等） G
4、r-1+CD11b+髓系来源抑制细胞（ MDSC） （ 2）细 胞亚群的发现 T 细胞亚群： Th1,Th2, Th9， Th17,Treg,TFHNK 细胞亚群： NK 亚群： p46+CD3-NK 亚群的发现 DC 亚群：调节性 DC 3.免疫调节的细胞和分子机制 免疫调节细胞： Treg； CD4+CD25+Foxp3+ DCreg：具有免疫负调控作用的 DC M2 NKreg 免疫调节分子： CTLA4、 PD-L1 TLR 和 NLR 的免疫负调控分子 4. 免疫记忆（固有免疫具有记忆性） 免疫记忆是适应性免疫的重要特征，是疫苗研究的重要理论基础，是免疫学的研究热点之一 记忆性 B
5、细胞和记忆性 T 细胞 记忆细胞的分化模式： CD4 和 CD8 阳性细胞均可由效应性 T 细胞分化 不同免疫细胞亚群可影响记忆性 T 细胞的产生 转录因子 Foxo3a 在人中枢型记忆 CD4+的存活中发挥重要作用 IL-15 是记忆性 T 细胞（ CD4+和 CD8+）维持其功能的重要细胞因子 目前：对记忆性 T、 B 细胞的许多特性 尚不清楚 5. microRNA 与免疫细胞分化发育及免疫应答的调节 microRNA 是细胞内长度为 18-25 个碱基的寡聚核 苷酸，其在进化过程中高度保守并具有广泛的生物学功能 通常作用于 mRNA 的 3 -非编码区，进而在转录水平上调控基因的表达。
6、 目前在哺乳动物已发现 800 多个，很多功能未知，是研究的热点 已知 microRNA 在免疫细胞的分化发育、免疫应答的调节中发挥重要作用： T、 B 细胞： miR17-92， miR-150 及 miR-155 固有免疫细胞： miR16,miR-146 6.炎症复合体 炎症复合体（ inflammasome）是胞浆内一组复杂的多蛋白复合体 ,是胱天蛋白酶（ caspase） -1 活化所必 需的反应平台 ,调控白介素（ interleukin,IL） -1、 IL-18、 IL-33等促炎细胞因子的加工及活化 ,参与天然免疫系统的激活 . 核苷酸结合寡聚化结构域样受体（ nucleot
7、ide-binding and oligomerization domain-like receptors,NLRs）是胞浆内重要的模式识别受体 ,能感知胞内病原微生物产物及代谢性应激 ,起始炎症复合体的组装 ,是构成炎症复合体的核心成分 . 7.表观遗传学（ Epigenetics） 表观遗传学（ epigenetics）是指不涉及 DNA 序列改变的基因或者蛋白表达 的变化， 并可以在发育和细胞增殖过程中稳定传递的遗传学分支学科， 主 要包括 DNA 甲基化， 组蛋白修饰，染色质重塑，基因沉默和 RNA 编辑等 调控机制。如 Fox3 启动子区甲基化修饰对 Treg 的调控 8.系统生物学
8、 系统生物学 （ Systems Biology）：利用计算机和组学等方法研究一个生物系统中所有组成成分（ 基因 、 mRNA、 蛋白质 等）的构成，以及在特定条件下这些组分间的相互关系的学科。 系统生物学不同于以往的实验生物学 仅关心个别的基因和蛋白质，它要研究所有的基因、所有的蛋白质、组分间的所有相互关系。显然，系统生物学是以整体性研究为特征的一种大科学。 系统生物学的理论已用于免疫学的研究 如，免疫细胞活化的信号网络、病原体感染时免疫系统的改变、 自身免疫性疾病中免疫相关基因的变化网络 9.免疫系统和免疫应答的可视化研究 实时动态成像技术（ MRI、 PET 和激光共聚焦技术、活细胞动态
9、观察工作站）和荧光标记技术的发展，可在实体动态关照免疫器官内的免疫细胞或者免疫分子的思维信息，使免疫应答可视化 10. 免疫治疗 肿瘤疫苗 预防性疫苗： HPV 疫苗预防宫颈癌 治疗性疫苗： DC 疫苗在肿瘤治疗中展现出效果 基于免疫细胞的免疫治疗 抗体药物： CTLA-4 抗体 针对信号通路的小分子药物 二 免疫分子（石永玉）： 1. T 细胞活化和抑制相关的细胞受体主要有哪些？举例说明抑制性受体发挥 抑制作用的分子机制。 活化 CD28 ICOS CD2 CD40配体 LAF-1 ICAM-1 抑制 CTLA-4 PD-1 CTLA-4发挥抑制作用机制： CTLA-4表达与活化的 CD4和
10、 CD8阳性 T细胞，其配体亦是 B7分子，但 CTLA-4与 B7分子的亲和力显著高于 CD28与 B7的亲和力。 CTLA-4与 B7分子结合产生抑制性信号，因为 CTLA-4分子的胞质区有免疫受体酪氨酸抑制基序 ITIM， ITIM中的酪氨酸残基被磷酸化后，可募集蛋白质酪氨酸磷酸酶 SHP-1和 SHIP并与之结合，这些磷酸酶通过对 T细胞活化途径中重要信号分子的去磷酸化，从而抑制 T细胞活化信号的转导。 2. IFN-主要种类、来源和抗病毒作用机制？ IFN type I IFN-, IFN-, IFN-, IFN-, IFN-, and IFN- 干扰素（ IFN）是病毒感染的细胞产
11、生一种因子， 主要产生细胞有浆细胞样树突状细胞，淋巴细胞，单核 -巨噬细胞，成纤维细胞 。 机制： 抗病毒作用 型干扰素具有广谱 的抗病毒活性 ,对多种病毒如 DNA病毒和 RNA病毒均有抑制作用；但这种效应不是直接的 ,而是通过对宿主细胞的 作用引起的 .对干扰素敏感的细胞表面存在于干扰素受体 ,核内有 “抗病毒蛋白 ”基因 ,受干扰素作用后该基因活化 ,产生的抗病毒蛋白可阻止病毒 mRNA翻 译 ,并促进病毒 mRNA降解 .干扰素能提高细胞表面 MHC 类分子的表达水平 ,受到病毒感染的细胞表面 MHC 类分子的增加有助于向 Tc细胞递呈抗原 , 引起靶细胞的溶解 .干扰素可增强 NK细
12、胞对病毒感染的杀伤能力 . 三免疫细胞及亚群（高丽芬）： （一）结合自 己课题，列举四个 T 细胞亚群，简述其表型、主要功能以及与你课题的相关性。 1. 根据 TCR 种类： 1) T 细胞： 占脾脏、淋巴结和循环 T 细胞的 95%-99%。 2) T 细胞： 1%-5%，大多数为 CD4-CD8-，少数为 CD8+。主要分布于皮肤和黏膜组织。识别抗原无 MHC 限制性。 2. 根据 CD4 或 CD8 的表达情况 CD4+ T 细胞 : 60%65%为 CD4+CD8- 表型为 TCRCD3 CD4 CD8- 识别抗原时受 MHC 类分子限制 Th CD8+ T 细胞 : 30%35%为
13、CD4-CD8+ 表型为 TCRCD3+CD4-CD8+，主要为 CD8 CTL 细胞亚群 识别抗原具有 MHC 类分子的限制性 Tc 3. 根据 T 细胞活化阶段 初始 T 细胞（ nave T cells) （ CD45RA+CD62L+） 活化 T 细胞 效应 T 细胞 记忆 T 细胞 （ CD45RO+） （ CD45RO+） 初始 T：参与淋巴细胞再循环，存活短； 效应 T：向外周免疫组织迁移，介导免疫效 应，存活短； 记忆 T：向外周免疫组织迁移，介导免疫效应，存活长，参与 再次免疫应答。 4. 根据 T 细胞功能 辅助性 T 细胞 (Th1, Th2,-) -CD4+ Th1:
14、CD3+CD4+IFN-+ Th2: CD3+CD4+IL-4+ 杀伤性 T 细胞 (Tc1, Tc2)-CD8+ Tc1: CD3+CD8+IFN-+ Tc2: CD3+CD8+IL-4+ 功能： 释放穿孔素和颗粒酶使靶细胞裂解； 诱导靶细胞程序死亡； 释放 IFN-、 TNF- 和 TNF- 等细胞因子，参与细胞免疫应答及免疫调节。 调节性 T 细胞 (Treg) CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg： （ 1）胸腺来源 Treg 细胞 (tTreg 细胞 ) 、外周血来源 Treg 细胞 (pTreg 细胞 ) （ 2）自然调节性 T 细胞（ nTreg）、适应性调节性 T 细胞
15、（ aTreg 或 iTreg）-Tr1(IL-10),Th3(TGF-beta) CD8+Treg： CD8+CD28-Tregs CD8+ CD28+Tregs CD8+ CD28-Treg 分为 3 型： 型细胞通过与 DC 直接接触，改变 DC 共刺激分子的表达并发挥其抑制作用； 型细胞则通过细胞因子 IFN-r、 IL-6 等发挥其抑制作用，不需要与 APC 直接接触； 型细胞主要通过分泌 IL-10 发挥其抑制作用。 NKT：分泌 IL-4,IL-10 等 Th2 型细胞因子，分泌 IL-13 调节 CD+8T 细胞功能，分泌 IFN-r，TNF 等 Th1 型细胞因子 5. Th
16、 细胞根据产生细胞因子 Th1： IL-2， IFN-r Th2： IL-4, IL-10 Th17： IL-17 Th9： IL-9 Th22： IL-22， TNF-a Tfh: IL-21, IL-6 Tfh 细胞： 滤泡辅助性 T 细胞（ T follicular helper）通过 IL-6 和 IL-21 来调节 B 细胞的功能。在 Tfh发挥调节功能的过程中， Bcl6 转录因子发挥了重要的作用。 Bcl6 转录因子的表达受 IL-6 和 IL-21 的调控， Bcl6 过度表达可诱导 Tfh 相关的基因表达并抑制其他类型的辅助性 T 细胞的分化。 感染疾病的体液免疫中起决定性调
17、节作用，同时在自身免疫和肿瘤疾病也有重要功能。 Blimp-1 在 T 细胞发育中起诱导分化作用 （二） 简述未成熟 DC 与成熟 DC 的表型和功能异同，如何根据研究或应用目的 进行选择？ 未成熟 DC 与成熟 DC 的区别： 摄取抗原的能力降低。 抗原加工、递呈功能增强。 MHC、协同刺激分子（ CD80、 CD86）、黏附分子（ LFA-1、 ICAM-1）表达上调。 刺激 T 细胞增殖的能力增强。 未成熟 DC(Immature DC) 皮肤、胃肠道、呼吸道等上皮内及实质器官间质内 摄取抗原并迁移至引流淋巴器官 胞饮（吞饮） 受体介导内吞 吞噬弱 表达低水平的 MHC 分子、协同刺激分
18、子和粘附分子 成熟过程中的重要变化 : 表达趋化因子受体，获得向引流淋巴结迁移的能力 加工提呈抗原，表达大量肽 -MHC 复合物 协同刺激分子和粘附分子表达上调 成熟 DC(Mature DC) 淋巴结，脾及派氏集合淋巴管 高表达 MHC 分子、协同刺激分子及粘附分子 很强的抗原提呈能力 四 固有免疫（高成江）： （一）简述固有免疫组成 固有免疫是机体在种系发育和进化过程中形成的天然免疫防御功能，既出生后就已具备的非特异性防御功能。 固有免疫包括组织屏障系统，固有免疫细胞和固有免疫分子。 屏障结构包括 ：物理屏障，解剖学屏障和生物屏障。屏障结构的作用是 防止微生物侵入体内和从血液进入重要器官，
19、屏障结构由皮肤，粘膜及其附属结构组成。 物理屏障：人体与外界环境接触的表面，覆盖着一层完整的皮肤和粘膜。 解剖学屏障 :由血脑屏障，血胎屏障，血胸腺屏障组成。 生物屏障：主要指皮肤和粘膜能分泌多种杀菌灭毒物质。 固有免疫细胞 ：主要执行固有免疫功能的细胞包括 NK 细胞，树突细胞，单核巨噬细胞和中性粒细胞等。 NK 细胞 ：具有抗感染和抗肿瘤作用以及免疫调节作用。 单核巨噬细胞 ：包括血循环中的单核细胞和组织中的巨噬细胞。作用：吞噬和杀伤病原微生物以及自身衰老，凋亡细胞。抗原 提呈，诱导炎症反应。表面标志是 CD14。 中性粒细胞 :多核白细胞，可以介导最早期的炎症反应，可在感染后的几小时內迁
20、移到感染部位 .是专职的吞噬细胞，可被 G-CSF 诱导生成。在血液中只能存活 6 小时左右，没有感染将凋亡。无抗原递呈作用主要对抗胞外寄生菌的感染。 树突状细胞（ DC 细胞）： 抗原递呈，参与 T 细胞的分化发育，参与免疫调节，参与 B 细胞发育、分化和激活。 免疫分子： 固有免疫中，产生细胞因子的细胞主要包括巨噬细胞，中性粒细胞， NK 细胞和一些上皮细胞和内皮细胞。功能 :控制病毒感染的 I 类干扰素，介导炎症反应的 TNF-， IL-1和一些趋化因子，促进 NK 细胞增殖和活化的 IL-15 和 IL-12，激活巨噬细胞的 IFN- 和抑制巨噬细胞的 IL-10，刺激中性粒细胞产生的
21、 IL-6 等。 （二） 比较固有免疫和适应性免疫，并简述固有免疫对适应性免疫的作用。 固有免疫 是物种在长期种系进化过程中形成的天然免疫功能。其特点是：先天具备，即机体出生时已具备；无特异性，作用广泛；初次与抗原接触即能发挥效应，无记忆性；可稳定遗传；同一物种的正常个体间差异不大。与之相关的免疫细胞是 NK 细胞，单核巨噬细胞，中性粒细胞，树突状细胞（ DC 细 胞）：体液中的组成成分：补体，溶菌酶和细胞因子 CKs。 适应性免疫 是指机体与抗原接触后获得的，具有针对性的免疫，主要由 T,B 淋巴细胞完成。其特点是：特异性，即 T,B 淋巴细胞仅针对相应抗原表位发生特异性应答；获得性，是指个
22、体出生后受抗原刺激而获得；记忆性，即再次遇到相同抗体刺激时，出现迅速而增强的应答；可传递性，特异性免疫应答的产物可直接输注给受者，使其获得相应的特异性免疫力；：自限性，通过免疫调节使免疫应答控制在适当水平或自限终止。 与之相关的免疫细胞是 APC， T 细胞， B 细胞组成成分：抗体和 CKs 等。 固有免疫参与并调控适应性免疫应答的启动，固有免疫中产生的第二信号不仅增强了随后发生的获得性免疫，而且还影响获得性免疫的性质。 启动：递呈抗原表达 B7 和调节 immune molecules involved 五 消化道免疫（马春红）： （一） MALT 的组成和特点是？ 黏膜相关淋巴组织 (m
23、ucosal-associated lymphoid tissue,MALT)： 是无被膜的淋巴组织，主要指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的无被膜淋巴组织，以及某些带有生发中心的器官化的淋巴组织，如扁桃体、小肠的派氏集合淋巴结（ Peyer s patches， PP）及阑尾等。 1 MALT 的组成： MALT 主要包括肠相关淋巴组织、鼻相关淋巴组织和支气管相关淋巴组织等。 （ 1） 肠相关淋巴组织（ gut-associated lymphoid tissue， GALT），主要包括派氏集合淋巴结、肠系膜淋巴结等淋巴组织和散于粘膜固有层和上皮细胞层内的淋巴细胞。 GA
24、LT 的主要作用是抵御侵 入肠道的病原微 生物 感染，其中存在一种特化的抗原转运细胞 M 细胞， M 细胞通过胞饮或内吞摄入抗原，然后转运并提呈给 APC 细胞， APC 细胞再将抗原提呈给淋巴细胞； GALT 还存在着独特的淋巴细胞群 固有层内淋巴细胞、上皮内淋巴细胞和先天性淋巴细胞；最终通过免疫分子（ IgA、细胞因子），免疫细胞以及共生菌保护粘膜组织，维持肠道内环境稳定。 （ 2）鼻 相关淋巴组织（ nasal-associated lymphoid tissue， NALT），包括咽扁桃体、腭扁桃体、舌扁桃体及鼻后部其他淋巴组织，它们共同组成韦氏环（ Waldeyer s ring）。
25、 （ 3）支气管相关淋巴组织（ bronchial-associated tissue， BALT），主要分布于各肺叶的支气管上皮下。 2 MALT 的功能及其特点 （ 1）构成机体防御外来抗原的第一道防线，由于其面积之大，淋巴细胞在其内存在数量之多，远大于淋巴结及脾，因此，有十分重要的免疫防御作用。 （ 2） 是免疫应答发生的重 要部位，其内的免疫细胞无论在激发全身性免疫应答，还是在承担黏膜局部免疫应答中均发挥重要作用。 （ 3）产生分泌型 IgA，参与免疫应答的效应阶段。 （二）简述巨噬细胞的分群及各亚群的特点、功能。 1.巨噬细胞的分群： 巨噬细胞按照其表型和分泌的细胞因子主要分为两种极
26、化类型，即经典活化的 M1 型巨噬细胞和选择性活化的 M2 型巨噬细胞。其中 M2s 又分为 M2a、 M2b 和 M2c三个亚群。 2.巨噬细胞各亚群特点： 1） M1 型巨噬细胞： M1由 LPS和 IFN-双信号诱导产生。它的表性特征为高表达 IL-12和 IL-23，低 表达 IL-10。这类巨噬细胞能高水平地表达杀伤分子 ROI、 RNI，分泌多种炎性细胞因子 TNF、 IL-1、 IL-6。 2） M2 型巨噬细胞： M2a 是由 IL-4或 IL-13 诱导产生的， M2b 是由免疫复合物结合 TLR 诱导产生的 M2c 是由IL-10 诱导产生的。它的表性特征为低表达 IL-1
27、2，高表达 IL-10 等高表达甘露糖受体和清道夫受体。抗原提呈能力差。 3.巨噬细胞各亚群的功能： 1） M1 型巨噬细胞参与促炎反应，且在宿主防御细菌和病毒感染中发挥核心作用。 分泌促炎因子，促进炎症反应 M1 主要参与和促进炎症反应 ，即细胞因子受体可与感染部位产生的细胞因子结合、趋化、活化作用。 发挥宿主防御功能 在 IFN-、 LPS 和 TNF-等因子的作用下，表面调理 /非调理受体表达增加，溶酶体数目，水解酶浓度提高，释放细胞毒性物质，分泌 TNF-，产生 ADCC 效应，从而对肿瘤和病毒感染细胞杀伤，但也会导致机体正常组织的炎性损伤。 促进 Th1 型免疫应答。 2） M2 巨噬细胞与抗炎反应、组织重构、纤维化、寄生虫感染、以及肿瘤疾病发展相关。 抗炎反应、组织重构、纤维化 三种 M2 均可促进纤维蛋白原形成、加快血管发生，在炎症反应中发挥损伤修复作用。在炎症反应后期发挥抗炎作用，促进创伤修复和纤维变性。 寄生虫感染 M2a 和 M2b 可促进 Th2 型免疫反应，具有包裹、杀伤寄生虫的功能，有时也可加重变态反应等 Th2 型病理损害。 M2c 可分泌大量抗炎细胞因子 IL-10、 TGF-，下调 M1 启动的免疫应答。 此外， M2 型巨噬细胞还与肿瘤疾病发展相关。
