1、三七总皂苷和奥美拉唑对大鼠酒精性急性胃溃疡的防治作用,指导教师: 杨 晶小组成员: 毕海跃 14010010112 李金泽 14010010113 王奕卓 14010010119,Content,Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipisicing elit.,一、实验回顾,创新点虽然已有报道称三七总皂苷对于慢性胃溃疡模型有治疗效果,但三七总皂苷对于急性胃溃疡模型的治疗研究领域存在空白。本实验旨在通过制备急性大鼠胃溃疡模型探究三七总皂苷对其治疗的效果。并且,通过横向比较,探讨中西医结合治疗的价值。,一、实验回顾,实验目的1.复制酒精性胃溃疡模型
2、,探究中药提取物三七总皂苷对其的疗效及机制。2.利用统计学方法,比较三七总皂苷治疗组、奥美拉唑治疗组、及三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗组的防治效果,一、实验回顾,实验原理酒精可刺激胃酸分泌,对胃黏膜也有直接损伤作用,短期摄入大量酒精可引起胃黏膜的损伤而产生溃疡。奥美拉唑是H+-K+-ATP酶(又称质子泵)抑制药,其药理作用与机制如下:抑制胃酸分泌作用胃黏膜保护作用抗幽门螺杆菌作用三七总皂苷兼具止血作用与抗血栓作用,改善溃疡表面微循环。其代谢产物为原人参二醇,具有抑制幽门螺杆菌生长的药理作用。,一、实验回顾,实验对象:SD大鼠(雄性),实验材料及用品大鼠手术台,哺乳动物手术器械,50ml烧杯,一次
3、性医用注射器,大鼠20号灌胃针,玻璃干燥器,棉花,鼠笼,计数器三七总皂苷,奥美拉唑,生理盐水,无水乙醇,乙醚,SD大鼠禁食24h,自由饮水,将大鼠麻醉后,在其幽门与十二指肠交界处做结扎,缝合,灌胃,结扎贲门,取出胃,沿胃大弯将胃剪开,用自来水冲洗干净内容物后平展于玻璃平皿内,将大鼠随机分为5组,灌胃后2h将大鼠用颈椎脱臼法处死,计算溃疡面积占胃黏膜总面积的百分比,一、实验回顾(实操流程),利用SPSS软件,通过one way ANOVA比较各组溃疡百分比有无统计学差异计算各组溃疡面积百分比均数,进行比较,二、实验结果,假手术组,酒精性急性胃溃疡组,三七总皂苷治疗组,奥美拉唑治疗组,三七总皂苷与
4、奥美拉唑联合治疗组,二、实验结果,三、数据分析,由于各组方差不齐,不能通过one way ANOVA分析数据,故求各组溃疡百分比均值与标准差,绘制直方图,进行比较。酒精性急性胃溃疡组1号大鼠胃溃疡面积百分比严重偏离均值,剔除。,三七总皂苷治疗组,奥美拉唑治疗组,三、数据分析,从上图可以看出三七总皂苷、奥美拉唑及两药联用对大鼠酒精性急性胃溃疡均有防治作用。三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗效果最好,奥美拉唑治疗效果其次,三七总皂苷治疗效果再次。实验结果符合预期结果。,四、思考讨论,各组方差不齐各组样本太少。可以扩大各组样本量。实验员操作不够熟练导致组内变异较大。通过预实验或对实验员进行培训,增加操作熟
5、练度。禁食效果不好延长禁食时间。使用禁食专用笼具,防止禁食大鼠食粪、食垫料。由于手术开始时间不一,各组禁食时间不一,成为实验的干扰因素之一。,四、思考讨论,灌胃操作存在缺陷灌胃时机:应待大鼠较为清醒、吞咽反射明显时进行。灌胃针伸入大鼠食管深度:充分伸入。灌胃速度:适中组织取材操作不够轻柔钳夹鼠胃时不够轻柔,造成充血、淤血,对溃疡出血点的计数造成干扰。取组织时应尽量轻柔。溃疡面积计算用刻度尺粗略测量,误差较大。可采用积分法计算。受实验员主观因素影响。可采用盲法。,实验设计思路延伸,乙醇可以使中性粒细胞浸润于胃黏膜,并释放氧自由基导致黏膜损伤。氧自由基是胃溃疡发病的重要攻击因子,胃肠道中黄嘌呤脱氢
6、酶的含量远高于其他任何组织,很容易通过次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、吞噬细胞“呼吸爆发、醛氧化酶等途径产生氧自由基,故有人将胃肠道喻为产生氧自由基的“定时炸弹”三七总皂苷本身就具有清除氧自由基的能力,但其治疗胃溃疡的机制是否与清除氧自由基有关尚不清楚。,实验设计思路延伸,乙醇可以使中性粒细胞浸润于胃黏膜,并释放氧自由基导致黏膜损伤。氧自由基是胃溃疡发病的重要攻击因子,胃肠道中黄嘌呤脱氢酶的含量远高于其他任何组织,很容易通过次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统、吞噬细胞“呼吸爆发、醛氧化酶等途径产生氧自由基,故有人将胃肠道喻为产生氧自由基的“定时炸弹”三七总皂苷本身就具有清除氧自由基的能力,但其治疗胃溃疡的
7、机制是否与清除氧自由基有关尚不清楚。,感想与收获,科研思路与方法文献检索技巧实验操作技巧数据的处理及统计软件的使用团队协作能力感谢老师全程耐心指导与协助!,参考文献,1. 钱忠义,申丽娟,王芳,阮永华.三七总皂苷预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用J世界华人消化杂志,2012,20(14):1178-11832. 王晓瑜,苏振政,张国华.三七、白芨、血竭治疗十二指肠球部溃疡出血的临床疗效观察J黑龙江中医药,2014,5:26-273. 韩宇,李鲜.中医药治疗胃溃疡的研究进展J中国中医药现代远程教育,2016,14(6):150-1524. 朱会超,国晶晶,任煜.三七总皂苷药理研究进展J河南
8、中医,2014,34(3):537-541,5. He, C., et al., Pharmacokinetics, bioavailability, and metabolism of Notoginsenoside Fc in rats by liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2015. 109: p. 150-157.6. 毛晶晶等, 20(S)-原人参二醇的药理作用研究进展.
9、中国实验方剂学杂志, 2011(24): 第274-277页. 7. 人参_西洋参和三七化学成分的研究_张崇喜. 8. 杨健. 维胃方对实验性胃溃疡大鼠氧自由基代谢影响的研究D. 广州, 南方医科大学:2012.,参考文献,1. 钱忠义,申丽娟,王芳,阮永华.三七总皂苷预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用J世界华人消化杂志,2012,20(14):1178-11832. 王晓瑜,苏振政,张国华.三七、白芨、血竭治疗十二指肠球部溃疡出血的临床疗效观察J黑龙江中医药,2014,5:26-273. 韩宇,李鲜.中医药治疗胃溃疡的研究进展J中国中医药现代远程教育,2016,14(6):150-15
10、24. 朱会超,国晶晶,任煜.三七总皂苷药理研究进展J河南中医,2014,34(3):537-541,5. He, C., et al., Pharmacokinetics, bioavailability, and metabolism of Notoginsenoside Fc in rats by liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2015. 109: p. 150-157.6.
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12、中国中医药现代远程教育,2016,14(6):150-1524. 朱会超,国晶晶,任煜.三七总皂苷药理研究进展J河南中医,2014,34(3):537-541,5. He, C., et al., Pharmacokinetics, bioavailability, and metabolism of Notoginsenoside Fc in rats by liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analy
13、sis, 2015. 109: p. 150-157.6. 毛晶晶等, 20(S)-原人参二醇的药理作用研究进展. 中国实验方剂学杂志, 2011(24): 第274-277页. 7. 人参_西洋参和三七化学成分的研究_张崇喜. 8. 杨健. 维胃方对实验性胃溃疡大鼠氧自由基代谢影响的研究D. 广州, 南方医科大学:2012.,THANK YOU,假手术组,酒精性急性胃溃疡组,三七总皂苷治疗组,奥美拉唑治疗组,三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗组,随机数表法分组,甲:假手术组乙:酒精性急性胃溃疡组丙:三七总皂苷治疗组丁:奥美拉唑治疗组戊:三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗组,将大鼠称重,按体重从小到大编为
14、1-15号,实际分组情况,实际分组情况(编号)假手术组:4、5、14酒精性急性胃溃疡组:1、7、10三七总皂苷治疗组:9、13、15奥美拉唑治疗组:3、11、12三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗组:2、6、8,假手术组:0.5ml生理盐水+1ml生理盐水酒精性急性胃溃疡组:0.5ml生理盐水+1ml无水乙醇三七总皂苷治疗组:350mg/kg三七总皂苷溶于0.5ml生理盐水 +1ml无水乙醇奥美拉唑治疗组:2mg/kg奥美拉唑溶于0.5ml生理盐水+1ml无水 乙醇三七总皂苷与奥美拉唑联合治疗组:350mg/kg三七总皂苷与2mg/kg奥美拉唑溶于0.5ml生理盐水+1ml无水乙醇,三七总皂苷浓度:700mg/ml 奥美拉唑浓度:5mg/ml,