1、1葡萄酒中苯甲酸和山梨酸含量测定方法的研究摘要：在本文中，建立了高效液相色谱法对葡萄酒中苯甲酸和山梨酸含量进行测定，并以实例检测表明，用此方式对葡萄酒检验能够有着分离速度快、重现性强、分析结果准确的特点。 关键词：葡萄酒 苯甲酸和山梨酸 测定方法 1 概述 葡萄酒是一种以葡萄为基本原材料，并经过一系列的发酵或者部分发酵而酿成的酒，是属于发酵酒中的一种，由于其口味鲜美、味道纯正而受到人们的广泛欢迎。在我国的食品卫生标准中，对酒类的配制过程测定的方法进行了一系列的规定，按照规定中指定的方法对葡萄酒进行测定，其中的蛋白质与天然色素等体积较大的分子颗粒非常容易出现对色谱柱进行堵塞，从而使柱压增大，进而
2、使得相应葡萄酒会由于时间变化大而出现柱效下降的问题，这也会对色谱柱造成非常大的损伤，不仅使其难以修复，还会使其使用的寿命造成非常大的缩短。为此，我们可以通过在实际测定之前对其测试样品先进行一系列的前处理，从而对这种现象进行适当的解决。 2 测试仪器与方法 2.1 测试仪器 对于测试的仪器部分，我们选择了 LC-10A 液相色谱仪；0.45m 微孔滤膜；纯化水机；超声波清洗器等等。 对于甲醇我们选择的是光谱纯类甲醇，去离子水则保证其标准为218.23M/cm。而对于亚铁氰化钾的制作，我们先选取 102.0g 亚铁氰化钾，并将其放入水中进行溶解，一直稀释到 1000mL 为止。乙酸锌溶液则先称量
3、217.0g 乙酸锌，并加入 31mL 乙酸融入到水中，同样稀释到1000mL 为止。对于氨水则使用一比一的比例进行选取。碳酸氢钠溶液制作则将 2g 的 NaHCO3 溶解到 100mL 水中；苯甲酸标准溶液我们将 0.1g 的苯甲酸中放入 5mL 的碳酸氢钠溶液中进行溶解，并将其用纯净水进行稀释至 100mL；对于山梨酸溶液的配置则参考苯甲酸溶液；另外对于山梨酸与苯甲酸则由我国的生物食品的制定检定所中进行购买，作为测试主体的葡萄酒则在当地超市中购买即可。 2.2 色谱条件 色谱柱：对于色谱柱我们选取了规格为 6*150mm 的shim.packCLC 一 ODS，而对于预柱则选取了 shjm
4、-PackG 一 ODS。 流动相：使用的甲醇为 0.02mmol/L，而其乙酸铵的配比则选取为100。 流速方面则保证其每分钟的流速为 1mL，同时柱温度应当保持在 25摄氏度。检测的波长则以 220nm 为宜。 2.3 样品预处理 首先，应当称量 10g 的样品放置到容量为 100mL 的试验烧杯中，并将其进行加热直至其体积为原来总体积的三分之二为止，再将其转移到容量为 50mL 的比色管中，并向其中加入 20mL 的水将其稀释。之后，再使用氨水对其 pH 值进行调节，当调节基本为 7 之后，再向其中加入亚铁氰化钾溶液与乙酸锌溶液各 5mL，然后再向其中加水到相应刻度为止，并对其进行后续的
5、摇匀、静置步骤。最后再去清液经过滤膜过滤之后，就可以安置在一旁等待测量。 32.4 制作标准曲线 在此环节中，我们分别配置一系列浓度不同且从低到高顺序的溶液来进行相色谱仪测试工作，并按照其峰面积与质量的浓度不同制作成相应的工作曲线。其现行范围由下表所示： 表 1 山梨酸与苯甲酸标准曲线的线性范围 2.5 对样品进行测量 通过我们从市面中选取的三种不同品牌的葡萄酒，并对其进行逐个的测定，得到了下面的实验结果。从实验结果中我们可以看出，这几种不同品牌的葡萄酒其山梨酸与苯甲酸的含量都符合标准，处于正常水平，可以放心的进行饮用。 表 2 三品牌葡萄酒测试结果 3 结果讨论 3.1 流动相组分比列选择
6、对样品溶液、山梨酸钾溶液使用入不同流动相比列进行测试，并对各组别的保留时间以及分离效果进行细致的观察，在不同比例的比列（60：40；70：30，80：20；）测试中，我们发现当乙酸铵同甲醇的比为 70：30 时，其工作流动线的基线分离情况比较合适，同时其出峰的时间也令人满意。 3.2 样品处理 3.2.1 去除乙醇 在葡萄酒中，乙醇是必定占有一定比例的。而从以往经验来说，乙醇会在色谱测试中出现较大的宽风，从而会对所测定样品的峰形产生影响。所以，在我们对不同葡萄酒进行取样之后，就应当以水浴的方式对其进行加热，从而将乙醇去除。 3.2.2 调节 PH 值 在葡萄酒中，有机酸的种类有很多，这种情况的
7、存在也会使得酒中含有一定的酸度。为了使我们测试样品物质的测试标4准与测试时间相一致，在实际的实验过程中就应当适当的使用氨水对其进行调节，而当对 pH 值进行调节之后，保留时间存在的偏差就可以忽略不计了。 3.2.3 大分子物质的沉淀 大分子物质使我们在测试过程中不能忽略的一部分，而亚铁氰化钾则是一种对大分子物质以及蛋白质进行沉淀的物质，在我们目前的食品含量测试工作中经常会被用到，同时其使用方式也非常方便。在实验中，我们以 20%的加入量对其进行了使用，而结果表明，沉淀效果满足要求。 4 结束语 在本文中，我们以高效液相色谱技术对葡萄酒中的山梨酸以及苯甲酸的含量进行了测定，而且得到了较好的效果。在实际测试过程中，则应当把握每一个细节，从而得到更为准确的测试结果。 参考文献： 1黄慧芬，辜华胜，彭方.高效液相色谱法测定肉制品中苯甲酸和山梨酸J.中国卫生检验杂志.2010（07）：1686-1687. 2白静.高效液相色谱法测定食品中的安赛蜜J.食品科学.2011（16）：245-248. 3王新运，万新军，吴凤义.高效液相色谱法快速测定饮料中苯甲酸的方法研究J.巢湖学院学报.2009（06）：76-78.
