1、猪繁殖与呼吸障碍综合症,曾 凯 四川省畜牧科学研究院 养 猪 研 究 所,猪繁殖与呼吸障碍综合症,1987年，美国、加拿大爆发“神秘病”（MSD）1990年，欧洲德国出现1991年，荷兰中央寿衣研究所Wenvvoort首次分离病原，“LV”病毒1992年，美国“首届SIRS/PRRS大会”命名猪繁殖与呼吸障碍综合症（PRSS)，乙类传染病1991年-1993年，北欧5000多猪场发生1996年，中国哈尔滨兽医研究所郭宝清等首次报道,猪繁殖与呼吸障碍综合症,PRRSV分离株分两种基因型 欧洲型（LV度株） 美洲型（VR-2332）欧洲流行欧洲株 美洲、亚太地区美洲型PRRSV分离株两种基因型存在
2、显著抗原多样性，只有很少交叉反应性,PRRS流行病学,宿主： 猪是唯一天然宿主。野猪有自然感染（Oslage等，1994）。各种年龄均可感，妊娠母猪、仔猪更易感（ De Jong等，1991）。,PRRS流行病学,传染源： PRRS感染猪（包括亚临床感染猪） 可通过猪唾液、鼻腔分泌物、精液、粪尿及乳汁等方式排毒 不可能经死尸、猪肉传播,PRRS流行病学,传播途径： 1、接触 特点-感染猪口咽部持续存在病毒、PRRSV高度易感性（最小感染剂量低）、混群易打斗 故密切接触是本病主要传播方式，特别大规模高密度饲养 一般鼻与鼻接触或污染粪尿接触而感染,PRRS流行病学,2、空气 重要传播途径，病毒在低
3、温阴湿易存活，故冬天有利传播 Le Potier等（1995）报道，500米内的猪场45%感染，1-2公里内仅2%感染 3、人工授精 病毒可在精液中存留35天。临床观察精液传播仅短暂时间，不超过1周,感染途径接触(鼻腔分泌物, 粪便), 呼吸道(灰尘), 胎盘和 授精往往由打针，鞋和衣服，以及昆虫叮咬,PRRS流行病学,4、猪只流动 从PRRS阳性场引进断奶猪或后备猪，易感猪接触。胎盘感染在怀孕早期，与被感染的巨噬细胞从胎盘进入胎儿有关 5、鸟类 鸟类粪便可传播PRRSV 6、鼠类 不易感,PRRS流行病学,潜伏期： 成年猪感染后3-5天厌食、嗜睡，未成年猪潜伏期14-28天，接触感染14天。
4、 流行开始至平息月2月 PRRSV可持续感染和亚临床感染，成为极危险传染源（Meredith，1993）,PRRS流行病学,持续感染 持续感染是动脉科病毒一大特征。 感染母猪（99天）、胎儿（21天）可检出。 抗体消失仔猪变易感猪，从而持续存在。 6-9周龄猪是分娩-肥育猪群中的PRRSV主要储存宿主 扁桃体感染后157天仍从口咽中检出病毒,PRRS流行病学,持续感染的原因 1、急性感染阶段非都阳转，阴性猪随时会感染，从而维持病毒在猪群存在 2、新引进易感猪（后备、断奶、生长猪） 3、部分猪持续感染，长期排毒，可3月以上（Zimmerman等，1992） 4、仔猪被动免疫期有限，4-10周龄易
5、感或再次感染（Albina等，1994） 5、主动免疫逐渐消失，感染6月后抗体水平很低（Ohlinger等，1992）,PRRS流行病学,持续感染原因分析： 1、在 PRRS爆发是一些母猪早期不感染，几月之后才感染。它们产下带毒血症仔猪，从而感染其他健康猪，病毒广泛传播。头4月很少繁殖障碍。15%的非感母猪临床症状4月后血清学阳性90%以上，爆发1年后阳性数减少，2年后低于30%。,PRRS流行病学,2、感染PRRSV架子猪是断奶猪的传染源母猪流行下降，架子猪持续性感染，产生抗体。感染2年后猪群怀孕期产仔期无病毒传播（未分离出或阴性），哺乳仔猪传播活跃。6周后抗体和病毒都阳性，6-12周龄可分
6、离出病毒。 血清中同时存在病毒和抗体,PRRS流行病学,3、定期引进阴性易感后备猪，可继续传染下一群后备母猪，或产下子宫内感染的带毒仔猪。 以上三种综合作用致持续性感染。 特别带毒的哺乳、生长肥育猪 易感断奶猪,PRRS流行病学,危险因素：引种购猪毗邻感染猪群检疫不严猪群密度过大 病猪流动和空气流动是最重要传播途径,PRRS流行病学,分子流行病学 欧洲株一个血清型，稳定 美洲株3个血清型，多个变异株 两株来源于同一祖先，后分别进化 ORF编码的病毒核衣壳蛋白是保守性最高的结构蛋白之一，但VR-2332株与LV株ORF7的氨基酸同一性仅58%，ORF4、ORF5、ORF6只有64%、54%、78
7、%。,PRRS流行病学,国内流行状况1996年，郭宝清等报道流行率约50%2003年，姚龙涛等报道猪场阳性率为83.3%,19992004年PRRS抗体检测结果,猪场阳性率 2003年 83.3% 2004年 89.4%,19992004年PRRS抗体检测结果,样品阳性率 2003年 55.8% （阳性场64.8% ）,PRRS临床症状,一般症状：母猪 食欲不振、高热、咳嗽、呼吸急迫；一些猪腹部、耳部和阴唇等出现蓝红色紫绀，“蓝耳”，持续不长；发情延迟，妊娠率下降，屡配不孕，流产（109天）、早产（100-104天）、死产、弱胎、死胎和木乃伊太增加，合计达20%,PRRS临床症状,PRRS临床
8、症状,后期流产、 死胎率高、 弱仔多,PRRS临床症状,PRRS临床症状,PRRS临床症状,3周龄哺乳仔猪呼吸困难,PRRS临床症状,新生仔猪 弱仔，几天后糊状下痢，有的灰色或黑色焦油状稀便，少数带血；病猪神萎，打堆畏冷；咳嗽、喷嚏、腹式呼吸、流泪、结膜炎和结膜水肿；补铁钴出血；白血球减少；到断奶死亡率可达80%以上。,PRRS临床症状,眼睑水肿,结膜炎,PRRS临床症状,架子猪和育肥猪： 呼吸道疾病增加，死亡率增1倍以上。架子猪抵抗力下降，增重缓慢，对疫苗接种反应差，生产性能降低5-20%，零星死亡。育肥猪呈轻微或无症状感染，死亡率2.8-4.3%（Blaha 1992）,眼睑水肿,哺乳仔猪
9、,发烧,保育舍,保育舍,育肥猪,PRRS临床症状,公猪 短暂昏睡、抑郁、厌食、轻度发热、性欲减退（Feitsma 等，1992；Yaeger等，1993）；轻度呼吸症状；精液数量减少，质量下降（有活力精子数量、运动性降低）；死亡率低；少数猪耳部一过性紫绀。,PRRS临床症状,急性型：初期 持续1-3周，厌食、嗜睡、神萎、发热。先发热、厌食，40-41C；母猪60%间歇性厌食，持续1-7天；部分公猪性欲下降。50%的双耳、外阴、尾部、腹部、口部青紫发绀，持续几小时-几天，个别口腔坏死。,PRRS临床症状,初期 呼吸道症状 呼吸困难、急迫，多发于仔猪，大猪少发，为快速的腹式呼吸或深度呼吸。不常流产
10、（1%-3%），致死率3%，偶有神经症状瘫痪、平衡障碍、躁动、呕吐等,PRRS临床症状,高峰期 母猪群年产量降低5%-20%。早产、死胎、木乃伊胎、弱胎增多，断奶前死亡率增高。持续3周。死产达高峰35%以上，死亡率0-100%，可见大体尺木乃伊，达17%，17cm以上，窝平存活率减少4头以上，所产仔猪非常虚弱，尤其早产猪，因并发呼吸系统疾病死亡大增。,PRRS临床症状,高峰期 继发病原猪副嗜血杆菌 猪链球菌霍乱沙门氏菌 多杀性巴氏杆菌胸膜肺炎放线杆菌 猪流感病毒脑心肌炎病毒 伪狂犬病病毒猪巨细胞病毒 猪呼吸道冠状病毒猪副粘病毒,PRRS临床症状,末期 主要特点：繁殖性能指标恢复，逐渐达到或接近
11、病前水平。在仔猪或生长猪中存在不同程度呼吸症状。 末期是完全康复的前奏，也可能是慢性PRRS的开始。,PRRS临床症状,慢性型： 其繁殖性能可恢复到正常水平，但活产仔数下降，同时产仔率长时间下降（10%-15%）。繁殖失败母猪可产正常仔猪。如引进血清学阴性仔猪可再次流行。配种后不久感染，受孕率和产仔率都降，感染过的母猪不出现此现象。6周后均能恢复感染前水平。,PRRS临床症状,慢性型： 首次繁殖失败后2.5年在保育舍可分离出病毒，爆发后1-2.5年待出栏肥猪有病毒抗体，表面持续存在PRRS病毒。保育至育肥猪主要集中于继发感染，出现鼻炎和肺炎，生长缓慢，报酬增加，断奶后死亡率增加。日增重降15%
12、，断奶死亡15%。通常平均患病率和死亡率月月循环，每月1个高峰。,PRRS临床症状,亚临床型 血清学检测10%出现临床症状，而阳性率达40-50%，显然存在PRRS亚临床感染。有些感染PRRSV猪群不发病，与毒株致病性有关。 毒株差异、猪群健康状况、饲养管理不同、临床症状识别能力不同等都是亚临床感染增多的原因。,PRRS临床症状,繁殖型和呼吸型 前者是急性型，主要影响成年易感猪，后者存在于慢性群，影响敏感的哺乳仔猪。呼吸型断奶2周后症状最明显。 呼吸型毒株的毒力标志是噬斑大小，小噬斑毒株对怀孕母猪的致病力明显低于大噬斑毒株，在NARC 145细胞上增殖也较慢。,PRRS临床症状,非典型PRRS
13、 也叫“严重型PRRS”或“母猪流产-死亡综合症”。母猪流产超15%，死亡超5%，头胎和三胎母猪最重。接种过MLV疫苗的猪群也发生。繁殖障碍爆发持续时间段（2-4周），不影响哺乳、架子、育肥猪。发生率15.6%，调查发现非典型PRRS猪群阳性率和抗体滴度均高于对照组，也未分离出其他病毒。,PRRS临床症状,反复感染 PRRS的新特点是阴性猪间隔不同时间（不是相同）可变成阳性猪，并不断爆发。有些急性爆发于感染过的猪场。 自然状况下，一些可免疫应答产生保护，而一些则由于接触病毒数量不足以使其产生免疫反应，所以PRRS病毒在猪群中循环传播。,PRRS临床症状,影响疾病严重性的因素 病毒株毒力 毒力差
14、异不表现临床差异，同一毒株症状差异大。日龄 无差异,PRRS临床症状,影响疾病严重性的因素合并感染 继发感染猪霍乱沙门氏菌、链球菌、副嗜血杆菌并存时，哺乳猪死亡率比PRRSV单独感染高25%。免疫状况 ADE效应，不仅不能保护，有助于病毒复制,PRRS临床症状,影响疾病严重性的因素品种 汉普夏肺病变严重，梅山猪多表现心肌炎和脑炎，杜洛克对PRRSV反应弱，表明有一定影响。应激霉菌毒素、猪群密度、引进猪只、猪舍条件、卫生状况等,PRRS临床症状,经济损失 年生产力减少5%-20%，每头每年少产1-3.8头，年产量减少8%-20%。 养猪成本大增。繁殖障碍死胎和木乃伊高达70%，断奶前死亡率50-
15、70%；呼吸障碍可致断奶后增加饲料报酬、推迟上市时间14-30天，出口限制。,病理发生与变化,妊娠母猪 食欲丧失、嗜睡、一过性发热（39-40C）耳为半透明红兰色，早产（107-112天）或完产（117天），1/3-1/2胎儿死亡。存活猪瘦弱、发育不良、后肢外张。胸腔、腹腔草黄色积液。肿大的死胎。木乃伊胎棕色、褐色或黑色，水肿、自溶，血色积液。死胎-延迟分娩；胎盘炎-流产。,病理发生与变化,公猪 暂时性嗜睡、沉郁、食欲不振、低烧（39-40C），性欲丧失。临症后4周精液量下降，7周后恢复。临症后2周，活力降低，畸形精子增加，2%增至12%，13周恢复正常。精液需求量增，返情率高。精液可传播病毒
16、，是精液被血中病毒污染，或病毒在生殖道繁殖所致，无定论,病理发生与变化,架子猪 厌食、抑郁、嗜睡，41C，持续1-3天，眼睑水肿、结膜炎、打喷嚏，呼吸症状轻。多灶性或局灶性间质性肺炎。,PRRS临床症状,病理发生与变化,胎儿 所有毒株都可引起病毒血症和胎盘感染，使胎儿死亡。最独特的并有诊断意义的是脐带病变。流产 和死胎猪脐带出现水肿性或出血性肿大，同时猪群有典型PRRS病史，可确诊。肺泡内出现坏死性巨噬细胞聚集并伴有淋巴组织细胞性间质性肺炎是PRRS特有病变。,病理发生与变化,眼观变化 不明显，肺前叶部分硬化，伴淋巴结轻度、中度水肿。如继发链球菌、副嗜血杆菌出现化脓性结膜炎、心包炎、胸膜炎、腹
17、膜炎等。感染鼠伤寒沙门氏菌则肺前叶和中叶紫红色硬块。产弱仔喉腔有清亮液体，偶见肺实变。仔猪和肥育猪眼睑水肿、皮下水肿、淋巴结肿大、心包积液、水肿。间质性、卡他性肺炎，鼻炎,PRRS的免疫,自然感染后免疫保护率最强。 PRRS产生的免疫反应可引起病理过程，激发继发感染，又可诱发免疫力，保护肌体免受再次感染，因此有人称为“双刃剑”（Molitor等，1997）,PRRS的免疫,抗体依赖性增强作用（ADE) 在体内，病毒中加入PRRS抗体，使病毒在妊娠中期胎儿体内的复制比单独注射病毒显著增强。临床上可见接种疫苗会加重PRRS的症状。疫苗病毒诱导的抗体能增强野毒株在猪体内的复制，而疫苗病毒的复制也能被
18、野毒株产生的母源抗体所增强,PRRS的免疫,抗体依赖性增强作用（ADE) 通过母源抗体获得被动免疫的仔猪，一旦抗体水平下降至保护性水平以下（亚中和水平），PRRS病毒就会表现ADE活性，从而增加动物感染和发病的危险性。,PRRS的免疫,免疫抑制 PRRSV 对猪巨噬细胞、单核细胞和小胶质细胞的某些亚群等有严格的限制性嗜性，这些细胞的分化和活化状态显著影响其易感性。病毒在其中的复制可导致免疫抑制，造成多系统多器官疾病，如病毒血症、间质性肺炎、血管炎、淋巴结病、心肌炎和脑炎等，并造成严重继发感染，如链球菌（Ss), App, Ca ,Hps, SIV, Mhp等。,PRRS的免疫,体液免疫 同源保
19、护性免疫力至少持续604天，异源保护时间有限。Mengeling等（1998）证实妊娠母猪接种弱毒苗后引起先天性感染，感染胎儿出生后可传染非感染同窝仔猪，表明妊娠期间使用疫苗有问题。,PRRS的免疫,细胞免疫 产生以病毒CD4+T细胞增殖和DTH为特征的细胞免疫。接种疫苗后对以淋巴细胞增生为特征的细胞免疫检测结果表明，免疫后第7天即产生免疫应答，第21-28天，与血清中和试验相关的致敏淋巴细胞迅速增多，高水平致敏淋巴细胞可持续80-90天，然后下降,PRRS的免疫,被动免疫 出生后4天可检出抗体，3周时消失。仔猪被动给予抗体对强毒不能保护，并且PRRSV感染和复制反而得到增强，但免疫母猪的仔猪
20、则可保护。,PRRS的免疫,主动免疫 接种疫苗对繁殖障碍是有效的，不过减毒疫苗（MLV疫苗）可通过公猪精液排毒，并可传播给同群的易感猪和其它猪群。对控制呼吸道疾病有较多问题，美国普遍限制使用疫苗控制临床爆发和引进猪接种。,PRRS的诊断,组织病理学 间质性肺炎：肺泡壁增厚，单核细胞浸润（主要是巨噬细胞），肺泡间隙含有蛋白碎片及变性细胞。可见于所以肺叶。继发感染致化脓性支气管炎。其它相关病变：鼻炎，非化脓性脑炎,PRRS的诊断,临床症状 在14天期间内出现以下情况： -死产率20%以上 -流产或早产率8%以上 -出生后1周死亡率25%以上 以上两项成立则可初步诊断。,PRRS的诊断,抗原检测1、
21、病原分离 首选材料是肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清，死产和流产胎儿的肺、脾、血清和胸水是适宜的检验材料，弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪检出率最高。,PRRS的诊断,2、荧光抗体技术和免疫酶技术 可直接用于检测组织中的PRRS抗原。能快速检测出组织样品中的病毒抗原，有一定应用前景。,PRRS的诊断,抗体检测 1、免疫过氧化物酶细胞单层试验（IPMA) 试验结果的判读主要靠主观判断，不能自动显示，不适于大规模检测。是欧洲最常用的检测方法。,PRRS的诊断,2、间接荧光抗体试验（IFA） 感染后2-3周可检出抗体。欧美各国官方认可的权威检测方法。检测间隔3-4周的双份血清（死胎或弱胎的血清或胎液），
22、若抗体升高4倍以上，可能感染；若20%以上阳性，即判定已感染。育肥猪血清阳转率高，需10-12头，母猪样品数30头。急性爆发，非都血清阳转，早期表现病毒血症而血清学阴性常见。,PRRS的诊断,3、 酶联免疫吸附试验（ELISA） 间接- ELISA：爆发早期检测母源抗体，美洲型敏感性高于欧洲型最常用 阻断- ELISA 重组抗原-间接- ELISA：敏感性100%，特异性95.8%，可克服散毒问题等,PRRS的诊断,4、血清中和试验（SVN） 中和抗体不一定有保护作用，体内体外低水平（不高于1：4）中和抗体的ADE 现象说明中和抗体不是减轻而是加剧疾病。 问题（1）抗体不能说明，需检感染初期和康复期血清 （2）试验用毒株 （3）要考虑母源抗体因素,PRRS的诊断,免疫组织化学电镜免疫胶体金标记技术分子诊断RT-PCRRT-nPCRRT-PCR-RFLP单抗原位杂交（ISH）,
