1、药理教研室,中药药理(实践)教学讲义,一、实验须知 二、炮制对延胡索镇痛作用的影响(热板法) 三、附子炮制前后对小鼠中毒情况的影响 四、天麻对小鼠睡眠的影响 五、天南星抗小鼠惊厥作用 六、茵陈蒿汤对家兔的利胆作用(插管法) 七、麻黄对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响(着色法) 八、人参对小鼠抗疲劳作用的观察,目录,实验前应掌握受试药物的现代中药药理学研究内容;结合中医药理论分析实验结果,评价其对中医药理论的论证和阐明作用;思考中药药理实验设计的一般思路。,实验须知,一、炮制对延胡索镇痛作用的影响(热板法),实 验 原 理 与 目 的,可溶性生物碱,水煎醇沉液(4g原药材/ml),水煎醇沉液(4g原
2、药材/ml),醋制延胡索,生延胡索,ip,ip,雌性,药品、动物与给药方法,550.5C,15 20C,5-30秒,给药后15分钟测定,给药后45分钟测定,给药后60分钟测定,痛阈值,操作流程,各时间点组间检验,生理盐水组,延胡索组,醋制延胡索组,药物有无作用,作用有无强弱差异,观察指标与统计方法,给药后若放入烧杯内小鼠60秒仍无反应,应将小鼠取出,痛阈值以60秒计。 正常小鼠放入热板后易出现不安、举前肢、舔前足、踢后肢等现象,这些动作不能作为疼痛指标,只有舔后足才作为疼痛指标。,注意事项,思考题,二、附子炮制前后致小鼠中毒表现的影响,实 验 原 理 与 目 的,有毒生物碱,炮制,水煎液(1g
3、原药材/ml),水煎液(1g原药材/ml),生附子,制附子,ig,ig,药品、动物与给药方法,给药后30分钟内,一般状态,活动能力,死亡只数,操作流程,组间检验,生附子组,制附子组,毒性表现是什么,毒性大小有无差异,直观观察,观察指标与统计方法,生附子和制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。,注意事项,思考题,三、天麻对小鼠睡眠的影响,实 验 原 理 与 目 的,天麻素,天麻苷元,天麻多糖,天麻水提液,天麻水提醇沉液,想睡了!,戊巴比妥钠阈下剂量,ip,ip,对侧腹腔ip,以翻正反射消失为指标记,水煎液(1g原药材/ml),天麻,生理盐水,ip,ip,药品、动物与给药方法,给药后30分钟ip
4、4mg/ml戊巴比妥钠32mg/kg,一般状态,活动能力,入睡只数,Ip0.1ml/10g,操作流程,组间检验,天麻组,生理盐水组,活动能力有无差异,有无镇静作用,直观观察,观察指标与统计方法,戊巴比妥钠溶液新鲜配制;戊巴比妥的阈下剂量每次实验前需预试找出;天麻饮片要预先蒸软或浸泡使成分煎出完全,注意事项,思考题,四、天南星抗小鼠惊厥作用,实 验 原 理 与 目 的,水煎液(0.5g原药材/ml),天南星,生理盐水,ip,ip,药品、动物与给药方法,给药后30分钟sc0.06%硝酸士的宁0.2ml,一般状态,惊厥潜伏期,惊厥只数,Ip0.1ml/10g,操作流程,组间检验,天南星组,生理盐水组
5、,潜伏期有无差异,发生只数的差异,药物作用?,观察指标与统计方法,士的宁的的惊厥剂量每次实验前需预试找出,注意事项,思考题,五、茵陈蒿汤对家兔的利胆作用,实 验 原 理 与 目 的,水煎醇沉液(g原药材/ml),菌陈蒿汤,十二指肠给药,药品、动物与给药方法,操作流程,扎线,牵引扎线,导管,胆管十二指肠端,胆汁,示意图,前后对照,总流量有无差异,药物作用?,观察指标与统计方法,胆总管引流胆汁的塑料导管可用头皮针上的半透明塑料管制成。管的尖端剪成斜口,离管口23mm处加热拉成稍细的颈部,以便结扎胆总管而固定之。开腹手术中通有出血点,用丝线结扎止血。胆总管比较细,切勿用力拉牵引线而拉断,故操作必须细
6、心轻巧。胆总管切口应一次成功,正好剪断胆总管的1/3-1/2。注意一定要剪断内膜,使胆汁引流导管插在内膜下,见有胆汁流出便易插入导管。,注意事项,思考题,六、麻黄对正常大鼠足跖部汗液分泌的影响,实 验 原 理 与 目 的,发汗解表,麻黄发汗以麻黄汤作用最强,水煎液(.5g原药材/ml),麻黄汤,生理盐水,ig,ig,麻黄汤(去麻黄桂枝组),ig,药品、动物与给药方法,和田-高垣氏试剂,A液:取碘2g溶于100ml无水乙醇即成;,B液:取可溶性淀粉50g、蓖麻油100ml,两者均匀混合即成,试剂,给药后30分钟,固定,足跖部A液 液,h内放大镜观察,汗液出现时间,汗滴数量,汗液颜色,ig1ml/
7、100g,25-27C,操作流程,组间检验,麻黄汤(去麻黄桂枝组),生理盐水组,汗滴数量的差异,药物作用?,组间检验,生理盐水组,汗液出现时间有无差异,麻黄汤组,观察指标与统计方法,本实验宜在恒温、恒湿条件下进行,室温控制在26+1。实验前最好将大鼠进行固定器训练,固定大鼠时,操作应轻柔,尽量避免挣扎出汗。在一次实验中,观察汗点出现时间应一致。大鼠足跖部汗腺主要分布在足跖肉垫上,足跖关节也有分布,足掌心则无。本实验也可以用小鼠。,注意事项,思考题,七、人参对小鼠抗疲劳作用的观察,实 验 原 理 与 目 的,水煎液(5g原药材/ml),人参,生理盐水,ig,ig,雄性,药品、动物与给药方法,给药
8、后45分钟,5 %体重负荷,置水中,活动能力,溺毙时间,Ig0.2ml/10g,200.5C,20cm,鼻孔浸入水面下15s以上,操作流程I,组间检验,人参组,生理盐水组,溺毙时间,组间检验,生理盐水组,药物作用?,观察指标与统计方法I,要严格控制水温,水温差异太大会影响实验结果。动物单个游泳,集体游泳会影响实验结果。,注意事项I,给药后45分钟,置入含钠石灰的密闭广口瓶中,死亡时间,Ig0.2ml/10g,操作流程II,组间检验,人参组,生理盐水组,死亡时间,组间检验,生理盐水组,药物作用?,观察指标与统计方法II,玻璃瓶口必须严密封闭,玻璃瓶大小应先经校准,求其一致。钠石灰应新鲜。,注意事项II,思考题,