1、LDLC 自动分析测定法与间接计算结果的比较作者：周铁成 于文彬 程晓东 秦庆 肖鹏涛 【关键词】 低密度脂蛋白胆固醇 关键词: 低密度脂蛋白胆固醇;冠心病;Friedewald 公式 中图号:R446.112 文献标识码:B 0 引言 流行病学研究已确定了与冠心病（CHD）有关的几个脂蛋白危险因素，血清总胆固醇（TC）升高伴随有低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，显著增加 CHD 的危险性.LDL-C 浓度降低，CHD 症状改善，能引起损伤的好转1 .目前临床上 LDL-C 测定多采用聚乙烯硫酸沉淀法2 ，Friedewald 公式间接计算法3 .前者麻烦，费时，后者受许多因素的影响.我们
2、采用均相分析的 LDL-C 试剂盒，无需沉淀分离，自动分析测定 LDL-C，方法先进、简便、快速、准确、适宜自动化分析. 1 反应原理 试剂 1 中的活性剂 1 能特异性水解高密度脂蛋白（HDL） ，极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微（CM） ，被包裹在上述脂质中的胆固醇即被释放并立即与酶试剂反应转变成一种无色产物.此时加入试剂 2，低密度脂蛋白（LDL）即被活性剂 2 水解，并在偶联剂作用下产生一种有色化合物.该化合物在 546/660 波长下有特异性吸光系数. 2 材料和方法 2.1 仪器 日立 7170 型自动生化分析仪. 2.2 LDL-C 测定试剂盒 日本第一化学药品株式会社生产.标
3、准品:LDL-C 校正物，含胆固醇 3.7mmolL-1 ，冻干品加 1mL 蒸馏水溶解后即可使用.甘油三酯（TG）和总胆固醇测定，用上海长征公司生产的试剂盒.HDL-C 用自动分析测定法，日本第一化学药品株式会社生产的试剂盒. 2.3 方法 2.3.1 LDL-C 自动分析测定法参数 两点终点法，温度 37，主波长546nm，副波长 660nm，样品用量 2.4L，R1 试剂 240L，反应 5min，加 R2 试剂 80L，反应 5min，监测 1634 点吸光度. 2.3.2 对照法 用 Friedewald 公式 LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2，间接计算 LDL-C.其中
4、TG 和 TC 测定用酶法，LDL-C 用自动分析测定法. 3 结果 3.1 精密度 批内 CV:取低、中、高浓度 LDL-C 样品各一份，LDL-C浓度分别为 1.45，2.86 和 3.94mmolL-1 .用本法同时测定 10次 CV 分别 1.32%，0.72%和 0.48%.批间 CV:取低、中、高浓度 LDL-C 混合血清各一份，LDL-C 浓度分别为 1.41，2.98 和 3.89mmolL-1 ，置 4冰箱保存，每天测定一次，连续 10d，批间 CV 分别 3.61%，2.45%和 3.41%. 3.2 回收率 取一 LDL-C 浓度为 3.82mmolL-1 的血清样本，加
5、入校正物 1.85mmolL-1 ，作回收实验，共测 3 次，回收率在99.2%103.2%之间. 3.3 线性关系 用一混合血清溶解 LDL-C 校正物，经反复测定 4 次浓度为 6.70mmolL-1 .将此血清用生理盐水作梯度稀释，使含血清 1/5，2/5，3/5，4/5 及原血清，用自动分析法测定，结果显示在6.70mmolL-1 范围内线性关系良好，回归方程（X 为浓度，Y 为吸光度）为 Y=0.0013+0.0934X（r=0.9997，P0.01）. 3.4 与 Friedewald 计算结果的偏离 随机取临床送检样本 150 份，用自动分析法测 LDL-C（D） ，同时测定 T
6、G，TC 和 HDL-C，用 F 公式计算LDL-C（F） ，按 TG 高低分组进行统计分析（Tab1）. 表 1 LDL-C 自动分析法测定与间接计算的比较 （略） 4 讨论 一般认为当 TG4.52mmolL-1 ，及排除高脂血症的条件，上述计算公式是可行的.我们的研究结果也表明当TG4.52mmolL-1 时，LDL-C 计算结果与自动分析测定结果相比无显著性差别，且高度相关（r0.95） ，计算偏差5%.但TG4.52mmolL-1 时，LDL-C 计算结果与自动分析测定结果相比有显著性差别（P0.05，r0.80） ，计算偏差15%.可见 LDL-C 自动分析测定法在高 TG 浓度条
7、件下有一定的临床应用价值，与文献报道一致4 .但在型脂蛋白血症，乳糜微粒血清等条件下的应用价值有待进一步探讨. 参考文献: 1Rifai N，Warnick P.Mcnamara JR et al.Measurement of low-density-lipoprotein cholesterol in serum:A status report J.Clin Chem，1992;38（2）:150-152. 2中华人民共和国卫生部医行政司编.全国临床检验操作规程M.第 2 版.南京:东南大学出版社，1997:281-282. 3Fridedewald WT，Levy RI，Fredricks
8、on DS.Estimation of con-centration of low-density-lipoprotein cholesterol in plasma，without use of the precipitative ultracentrifuge J.Clin Chem，1972;18（5）:499-501. 4Harris N，Neufeld EJ，Newburger JW et al.Analytical perfor-mance and clinical utility of a direct LDL-cholesterol assay in a hyperlipidemin pediatric population J.Clin Chem，1996;42（10）:1182-1183.
