1、MDS 病人血清血管内皮生长因子水平检测作者：赵梅青 赵洪国 杜以萍 【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）在骨髓增生异常综合征（MDS）病人血清中的表达，及其对于 MDS发生发展及预后的意义。方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附方法（ELISA）检测 43例 MDS 病人血清VEGF水平，其中 RA组 16例，RAS 组 6例，RAEB 组 14例，RAEBT 组 7例，分析其与 MDS分型及临床因素的关系，以正常人和急性髓细胞白血病（AML）病人为对照组。结果 RA组、RAS 组病人 VEGF水平与正常对照相比无明显差异（P0.05） ，RAEB 组、RAEBT 组 VEGF水平均明显
2、高于RA、RAS 及正常对照组（F=34.33,q=3.3412.01,P0.05） 。血清VEGF水平与病人的外周血常规、骨髓原始细胞比例有关(F=2.46、32.58,q=2.8011.54,P0.05)。结论 VEGF水平与 MDS的发展转归有关。 【关键词】 骨髓增生异常综合征；血管内皮生长因子；血管新生 ABSTRACTObjectiveTo evaluate the serum level of VEGF in myelodysplastic syndrome (MDS) patients, and its clinical significance in the developm
3、ent and prognosis of the disease.MethodsThe serum VEGF in 43 MDS patients was determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), of whom, the cases of type RA, RAS, RAEB and RAEBT were 16, 6, 14 and 7, respectively. Their relationship with the typing, clinical factors and MDS was analyzed. Thi
4、rty healthy volunteers and patients with acute myeloid leukemia served as controls.ResultsThe differences of serumVEGF level between RA, RAS and the controls were not significant (P0.05); it was higher in RAEB and RAEBT than that in RA, RAS and normal controls (P0.05). The serum VEGF level was corre
5、lated with peripheral blood routine test and proportion of blast cells in bone marrow (P0.05).ConclusionVEGF is related to the progression and prognosis of MDS patients. KEY WORDSMyelodysplastic syndrome; Vascular endothelial growth factor; Angiogenesis 近年来研究显示, 血管新生及其调控因子在血液系统恶性肿瘤的发生发展中起重要作用。血管内皮生长
6、因子（VEGF）是目前所知的最重要的血管新生正调控因子。本研究检测了 43例骨髓增生异常综合征（MDS）病人血清 VEGF水平，分析其在不同亚型的差异及其与多种临床因素的关系，探讨其在 MDS发生发展及预后估计中的意义。 1 资料与方法 1.1 研究对象 我院血液内科 2004年 8月2005 年 8月门诊或住院的 MDS病人 43例，男 23 例，女 20 例；年龄 2376 岁，中位年龄 52岁；RA 组 16例，RAS组 6例，RAEB 组 14例，RAEBT 组 7例。病人均符合 FAB分类标准。排除标准：并其他肿瘤性疾病者，肝肾功能不良者及近期感染等应急因素者。急性髓细胞白血病(AM
7、L)组 15例，均为 2004年 8月2005 年 8月我院血液内科收治的病人，男 9例，女 6例；年龄 2479 岁，中位年龄46岁；其中 M2 2例，M3 4例，M4 5例，M5 4例。正常对照组 15例，均为健康体检者，其中男 8例，女 7例；年龄 2172 岁，中位年龄 44岁。 1.2 检测方法 清晨采集病人空腹肘静脉血 4 mL，置于普通玻璃试管中，半小时内以 2 000 r/min离心 10 min分离血清，分装后于-70 保存。人 VEGF ELISA试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司生产。按照试剂盒提供说明书的操作方法进行检测。 2 结 果 正常对照组血清 VEGF水平为（7
8、7.1121.37）ng/L，AML 组为（377.49146.31） ng/L。RA 组为（75.6220.53）ng/L，RAS 组为（75.7819.73）ng/L，与正常对照组相比无明显差异（P0.05） 。RAEB组为(269.62118.71)ng/L，RAEBT 组为(9345.59101.98）ng/L，均明显高于正常对照、RA 组和 RAS组（F=34.33,q=3.3412.01,P0.05） 。RA 与 RAS、RAEB 与 RAEBT组间无显著性差异（P0.05） ，RAEBT 组与 AML组差别无显著性意义（P0.05） 。 外周血 1系受累的病人血清 VEGF水平为
9、（68.3115.97）ng/L，2系受累者为（171.78137.29）ng/L，3 系受累者为(211.34141.82)ng/L。3 系受累的病人血清 VEGF水平明显高于 1系受累者(F=2.46,q=2.80,P0.01)，2 系和 3系受累的病人 VEGF水平无明显差别（P0.05） ，2 系及 1系受累者之间无明显差别（P0.05） 。 骨髓原始细胞比例5组的血清 VEGF水平为(75.6619.84)ng/L，5%10%组为(311.64144.36)ng/L，11%20%组为(227.6074.66)ng/L，21%30%组为(345.59101.98)ng/L。5组的 VE
10、GF水平明显低于其他各组（F=32.58,q=2.9111.54,P0.05） ，5的各组之间没有明显差别（P0.05） 。 3 讨论 血管新生是指在原有血管的基础上形成新的血管的过程，这一过程受正、负调控因子的严密调节。VEGF 是高度特异性作用于血管内皮细胞的强有力的丝裂原，是最重要的血管新生正调控因子，也是目前研究最多的因子，在肿瘤组织的血管形成过程中起重要作用，可以作为血管新生的标志物，反映血管新生的程度。 众多研究表明，VEGF 与多种实体瘤，如肺癌、胃癌、宫颈癌、子宫内膜癌及视网膜母细胞瘤等的发生发展有关15。近年来的研究表明，血液系统的恶性肿瘤也与 VEGF的异常表达有关6。MD
11、S 是一组异质性造血干细胞恶性克隆性疾病，以骨髓无效造血、外周血细胞减少及病态造血为特征。其发病机制非常复杂，包括干细胞损伤、增殖分化异常、过度凋亡、造血微环境改变及免疫缺陷等。MDS 病人 VEGF的表达是否异于正常已经引起了国外学者的注意，报道结果并不一致7,8。本研究显示，RA和 RAS病人血清 VEGF与正常对照比较无明显差别，RAEB、RAEBT 病人的血清 VEGF水平均明显高于正常对照、RA 和 RAS病人，RAEBT 病人血清VEGF水平与 AML病人无明显差异，这与 PRUNERI等9的研究结果相符。表明随着病情的发展，VEGF 的分泌逐渐增多，骨髓微血管密度逐渐增高，符合
12、MDS的演变过程，提示 VEGF引起的血管新生可能在 MDS的发展转化过程中起重要作用。MDS 的预后因素包括外周血常规、骨髓原始细胞比例及染色体分型等。本研究显示，MDS 病人血清 VEGF水平与外周血常规、骨髓原始细胞比例有关，外周血 23 系受累者明显高于 1系受累者，骨髓原始细胞比例5的各组明显高于5组，因此血清 VEGF水平对于MDS的预后判断可能也有一定的意义。 研究显示，VEGF、血管生成和肿瘤细胞的相互关系是建立在骨髓基质细胞与造血细胞之间的自分泌和旁分泌作用的基础上。VEGF 既能和肿瘤细胞（内皮细胞）自身表面的受体结合形成自分泌作用，也能和内皮细胞（肿瘤细胞）表面的受体结合
13、，产生旁分泌作用，刺激内皮细胞分泌其他生长因子，诱导肿瘤细胞和内皮细胞的增殖。BELLAMY 等10应用免疫组织化学法检测 MDS病人骨髓切片细胞膜的 VEGF受体，显示多数 MDS表达 1型 VEGF受体，少数表达 2型 VEGF受体，少数两种受体同时表达。骨髓内异常分布的未成熟前体细胞同时表达 VEGF及 VEGFR，提示 MDS可能也存在 VEGF的病理性自分泌。MDS 病人血清 VEGF升高的原因尚不十分清楚。各种肿瘤细胞及正常细胞，如血细胞、内皮细胞及间质浸润细胞等均可表达 VEGF，因此 MDS病人的 VEGF可能由恶性细胞和正常细胞共同分泌。本研究显示，MDS 病人血清 VEGF
14、浓度与骨髓原始细胞比例有关，原始细胞比例高的病人其血清 VEGF水平较高，提示 VEGF升高可能与肿瘤细胞的关系更为密切。 目前，针对 VEGF的抗血管新生治疗方法大部分尚不成熟，处于试验阶段。沙利度胺是目前为止发现的最重要的抗血管新生的药物，最近的研究发现其对 MDS也有一定的治疗作用5,11。BERTOLINI 等12还报道，治疗有效者血清 VEGF水平明显下降。因此，研究 MDS病人 VEGF的表达对于指导临床治疗，寻求新的治疗方法具有重要的意义。 【参考文献】 1朱卫群,崔言刚,王英年,等. 肺癌病人血管内皮生长因子表达与临床预后的关系J. 青岛大学医学院学报, 2001,37(2):
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