1、肛泰种给药途径对大鼠血清盐酸小檗碱浓度的影响作者：姜绍伟,黄敏,刘鉴群,毛卫红【摘要】 目的 观察和比较肛泰主要成分之一盐酸小檗碱经腹部皮肤、直肠和口服给药后在大鼠体内的药动学变化。方法 通过腹部皮肤和直肠单次给予大鼠肛泰,口服给予等量的盐酸小檗碱溶液,采用 HPLC 法测定了这 3 种途径给药后不同时间(030 h)大鼠血清中小檗碱浓度。结果 肛泰贴敷、直肠和口服给药的 Tmax 分别为 1、0.5、0.5 h,Cmax 分别为127.4、269.4、127.9 g/L,AUC030 h 分别为1611.44、1055.61、765.88 g/(Lh)。结论 本实验为肛泰的临床应用提供了动物
2、体内的药动学参考。 【关键词】 肛泰；给药途径；盐酸小檗碱；药代动力学；大鼠Abstract：Objective To observe and compare the pharmacokinetics of hydrochloric berberine in rats administrated Gangtai by 3 routes. Method Rats were taken orally or administrated Gangtai by abdomen skin or rectal, and their serum concentrations of hydrochloric b
3、erberine at different time (030 h) were determined with HPLC method. Results The main pharmacokinetics parameters of hydrochloric berberine by abdomen skin, rectal and oral administration：Cmax was 127.4, 269.4, 127.9 g/L respectively, Tmax was 1, 0.5, 0.5 h respectively, AUC0-30 h was 161 1.44, 105
4、5.61, 765.88 g/(Lh) respectively. Conclusion The pharmacokinetics parameters of Gangtai in rats provided academic evidence for clinical application of Gangtai.Key words：Gangtai；administrated routes；hydrochloric berberine；pharmacokinetics；rat本实验采用高效液相色谱法测定肛泰口服、腹部皮肤和直肠给药后主要成分之一小檗碱在大鼠体内的经时血浓度(030 h),观察
5、 3 种给药途径盐酸小檗碱的药动学变化,为肛泰的临床应用提供动物体内的药动学参考和现代研究的理论依据。1 实验材料1.1 动物清洁级 SD 大鼠,雄性,体重 300 g 左右,购自北京大学医学部动物中心,合格证号：SCXK(京)2002-0001。1.2 药物及试剂肛泰,烟台荣昌制药有限公司生产,批号 030901,规格为 0.5 g/片,每片含有盐酸小檗碱 36 mg；盐酸小檗碱,购自东北制药总厂,含量 99%,临用前用 0.4% CMC-Na 溶液配置成浓度为 18 mg/mL 的混悬液使用；盐酸小檗碱标准品购自中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯,其余化学试剂为市售分析纯。1.3 仪器W
6、aters 公司 2996 型高效液相色谱系统及其 Empower 工作软件；Mettler AX105 十万分之一天平；天津药典标准仪器厂的 ZH-2 自动涡旋混合器；北京医用离心机厂的 LG10-2.4A 高速离心机等。2 实验方法2.1 给药及血样采集将大鼠按体重随机分为 3 组,即腹部皮肤给药组、直肠给药组和口服给药组。腹部皮肤给药组：每只大鼠 24 h 前去毛贴敷 1 片肛泰,共贴敷 30 h；直肠给药组：每只大鼠直肠给予 1 片肛泰；口服给药组：每只大鼠口服等量的盐酸小檗碱溶液。3 个给药组中每组分为 4 个小组进行采血：在用药 5 min 时从眼静脉丛取血 1 mL；在用药 15
7、 min 时从眼静脉丛取血 1 mL；在用药 0.5、2.0、6.0、24、30 h 时从眼静脉丛取血 0.8 mL；在用药 1.0、4.0、8.0、12、24 h 时从眼静脉丛取血 0.8 mL。各血样于 3 000 r/min 离心 5 min,取血清,冷冻储存于-20 冰箱待分析检测用。每个采血点动物数为 68 只,腹部皮肤给药组贴敷肛泰 30 h 者取棉签擦净皮肤表面剩余药物,棉签和肛泰的包装材料一起于 20 mL 甲醇中超声提取 20 min,3 000 r/min 离心 5 min,取上清液于冰箱 4 冷藏保存,供分析检测用。2.2 血清小檗碱浓度的测定2.2.1 色谱条件 Kro
8、masil-C18 柱(4.6 mm150 mm,5 m),北京润博公司产品；检测器为 Waters 2996 PDA；泵为 Waters 1525；流动相为乙腈-0.04 mol/L 磷酸二氢钠溶液(用磷酸调 pH 至 3)3070,流速 1.0 mL/min；检测波长 270 nm；柱温为室温。在该色谱条件下盐酸小檗碱的保留时间约为 8 min。2.2.2 血清样品的制备 准确吸取大鼠血清 150 L,加入 150 L 的甲醇,于旋涡混合器上涡旋 30 s 后,8 000 r/min 离心 20 min,上清液作为进样液,进样体积为20 L。2.2.3 血清标准曲线 在大鼠空白血清 150
9、 L 中加入不同量的盐酸小檗碱甲醇标准液,配成 0、12.5、25、50、100、200、500 g/L 的标准血样,按照样品制备方法进行样品制备,测得样品峰面积。以血药浓度(C)对样品峰面积(Y)作线形回归,得标准曲线方程：Y72.113C1096.5,R20.999 9。本结果表明,盐酸小檗碱浓度在 12.5500 g/L 之间与峰面积呈良好的线性关系。2.3 统计学方法计算各给药途径各时间点血清盐酸小檗碱浓度的均值和标准差,再根据各时间点的动物数计算标准误；血清盐酸小檗碱浓度以 xs 表示,2组的平均血药浓度-时间数据利用DAS 实用药代动力学程序(1.0 版)处理,计算其主要药代动力学
10、参数。3 结果(见表 1、图 1)表 1 3 种给药途径小鼠血清盐酸小檗碱浓度、药代动力学比较（略）大鼠腹部皮肤给予肛泰 1 片,在 1 h 即达到最大血药浓度,而后随着给药时间的延长,血药浓度逐渐下降,给药 8 h 内,血药浓度维持在 100 g/L 以上,至 30 h 仍能检测到大鼠血清盐酸小檗碱浓度。大鼠腹部皮肤持续贴敷 30 h 给予 36 mg 盐酸小檗碱,还剩余 18%的小檗碱未透过皮肤。大鼠直肠给予肛泰 1 片,达峰浓度时间为 0.5 h,最大血药浓度比腹部皮肤高1 倍,给药 4 h 内,血药浓度维持在 100 g/L 以上,而后血药浓度迅速下降,至给药 30 h 时大鼠血清盐酸
11、小檗碱浓度低于最低检测限。大鼠口服给予盐酸小檗碱 36 mg,达峰时间为 0.5 h,比腹部皮肤给药达峰时间快,在给药 6 h 后血药浓度迅速下降,至给药 30 h 时大鼠血清盐酸小檗碱浓度低于最低检测限。4 讨论根据文献1报道,盐酸小檗碱的药代动力学特征为：家兔通过耳静脉注射或家兔前腿肌肉注射给予 2 mg/kg 盐酸小檗碱,盐酸小檗碱的药代动力学特征符合二室模型,其分布特征是属于全身分布。静脉给药末端消除半衰期为 5.28 h；静脉给药 48 h 后盐酸小檗碱在尿中累积排泄量为4.93%,药后 5.5 h 在胆汁中的累积排泄量为 0.5%。同等剂量的硫酸小檗碱给家兔肌肉注射,其绝对生物利用
12、度为 99.77%。Beagle 犬静脉给药 100 mg 盐酸小檗碱的药-时曲线符合二室模型2。本实验结果可见,3 种给药途径盐酸小檗碱达峰浓度的排列顺序为直肠口服腹部皮肤,盐酸小檗碱达峰时间的排列顺序为口服直肠腹部皮肤,盐酸小檗碱生物利用度的排列顺序为腹部皮肤直肠口服,维持稳定的血药浓度最长的是腹部皮肤。本实验 3 种给药途径中,生物利用度口服最低。而直肠给药,虽然能迅速达到较高的血药浓度,但排便可使血药浓度迅速下降,因而也影响了盐酸小檗碱的吸收。透皮给药克服了口服给药的首过效应及直肠给药因排便影响药物的吸收,达到吸收药物较迅速(1 h 达峰)、维持稳定的血药浓度时间长(12 h),从而获
13、得较高的生物利用度。肛泰产品腹部皮肤和直肠这两种途径给药后盐酸小檗碱的药-时曲线经拟和后符合一室模型,而盐酸小檗碱口服给药符合二室模型,与文献报道的盐酸小檗碱在家兔和 Beagle 犬体内的药代动力学特征相似2；从 AUC 可见,肛泰产品通过直肠或腹部给药,均能达到有效的治疗效果。【参考文献】1 Chen CM,Chang HC.Determination of berberine in plasma, urine and bile by high performance liquid chromatographyJ.Chromatogr B,1995,665：117123.2 盛美萍,孙 淇,王 宏.盐酸小檗碱在 Beagle 狗静脉注射和口服药动学研究J.中国药理学通报,1993,9(1)：6467.
