1、激素对菘蓝器官分化及愈伤组织诱导的影响摘 要：通过试验，采用含有不同的植物激素配比的培养基培养菘蓝不同外植体，研究激素对菘蓝器官分化及愈伤组织形成能力的影响。以菘蓝无菌苗的子叶和胚轴为外植体，研究在不同激素配比的条件下诱导形成愈伤组织和分化不定根、不定芽的能力。结果证明：在 NAA 0.1mg/L+6-BA 0.1 mg/L（14d） 、NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0 mg/L（14d） 、NAA 0.5mg/L+6-BA 0.1 mg/L（28d）三个条件下子叶的愈伤组织诱导率可达到 100；NAA（0 mg/L0.1 mg/L）+6-BA1.0 mg/L 的激素组合是诱导菘蓝外植
2、体分化芽的可选浓度组合；一般对菘蓝生根培养不采用此两组激素组合，以 1/2MS 培养基附加 NAA 0.1mg/L 可使不定芽生根率可达 100% 。关键词：激素；菘蓝；器官分化；愈伤组织 利用组织培养对菘蓝进行快速繁殖和高产栽培，对节约耕地，提高产量有重要意义。本试验研究通过采用含有不同的植物激素配比的培养基培养菘蓝不同外植体，研究激素对菘蓝器官分化及愈伤组织形成能力的影响，为菘蓝组培生产提供理论依据。1 材料与方法1.1 材料。挑选生长饱满、无病斑的菘蓝种子，于超净工作台上用75%酒精处理数秒，用无菌水冲洗 2 次，然后用 0.1%HgCl2 消毒 15mim，无菌水冲洗 5 次，接种于预
3、先配制好的不含任何激素的 B5 培养基（含 2%蔗糖和 0.8%琼脂）上，于光照培养箱中培养至 13d 时，取无菌苗的子叶和胚轴作为外植体。1.2 方法。以 B5 培养基为基本培养基，添加 2%蔗糖和 0.8%琼脂及不同浓度的 NAA 和 6-BA，调节 pH5.8。将无菌苗分子叶和胚轴剪下，作为外植体分别转入上述培养基中，每瓶培养基接入 4-6 个外植体，于光照培养箱中（27，昼夜无温差，光照 12h/d）培养，分别于 14d 和 28d 时观察，统计并记录结果。2 结果与分析2.1 不同浓度激素组合对外植体愈伤组织形成的影响在 14d 时，接种于加了 NAA 培养基中的子叶和胚轴相对较接种
4、于不加 NAA 培养基中的子叶和胚轴愈伤组织诱导率高，证明 NAA 有助于愈伤组织的形成。在 NAA0.1mg/L+6-BA0.1mg/L（14d） 、NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L（14d） 、NAA0.5mg/L+6-BA0.1mg/L（28d）三个条件下子叶的愈伤组织诱导率可达到 100，可作为选择诱导愈伤组织形成的条件的参考。此外，同等激素条件下，胚轴的愈伤组织诱导率明显低于子叶的愈伤组织诱导率，说明子叶和胚轴对 NAA 的敏感程度不同，可能与外植体本身内含生长素不同有关。当要进行以获得愈伤组织为目的组织培养时，应选择子叶作为外植体，可获得相对较好的结果。2.2 不同浓度
5、激素组合对外植体不定芽形成的影响整体分析激素对子叶和胚轴的不定芽诱导情况，发现胚轴比子叶分化不定芽要早，且不定芽率相对较高。进一步分析发现当 NAA 浓度一定，随着 6-BA 浓度的提高，不定芽诱导率呈整体升高趋势，但在 6-BA1.0mg/L2.0mg/L 浓度范围内，诱导率升高不显著；而 6-BA 浓度一定，随着 NAA 浓度的提高，不定芽诱导率升高不显著甚至有下降的趋势。在NAA0mg/L0.1mg/L 浓度范围内，诱导率已经十分可观，所以NAA（0mg/L0.1mg/L）+6-BA1.0mg/L 的激素组合是诱导菘蓝外植体分化芽的可选浓度组合。2.3 不同浓度激素组合对外植体不定根形成
6、的影响28d 时子叶和胚轴分化不定根的最低浓度激素组合分别为NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L 和 NAA0.5mg/L+6-BA0.1mg/L。子叶和胚轴都在激素组合 NAA0.5mg/L+6-BA0.1mg/L 时分化不定根较早且不定根诱导率最高，说明该激素浓度组合最适宜外植体不定根的诱导。进一步分析表中数据可以看出，当 NAA/6-BA 比值较低时（NAA0mg/L-0.1mg/L） ，不适宜外植体不定根的生成，随着 NAA/6-BA 比值升高，外植体不定根的诱导率升高。但是本组试验并没有得到较高的不定根诱导率，以胚轴为外植体的培养中，不定根的诱导率均不超过 50，以子叶为外植
7、体的培养中，最高的不定根诱导率也只有 75。一般对菘蓝试管苗的生根培养不采用此两组激素组合，据彭丽萍3等试验得出，以 1/2MS 培养基附加NAA0.1mg/L 可使不定芽生根率可达到 100%。3 结论对于菘蓝不同外植体材料，胚轴的不定芽分化较早，培养 6-7d 即可发生4，所以 14d 时观察胚轴在适宜激素组合的培养基上其愈伤组织诱导率为 0，而不定芽诱导率已达 100%。本试验中菘蓝外植体表现为对 NAA 更加敏感，NAA 有助于愈伤组织的形成（其浓度高低对愈伤组织诱导率的影响不显著5） ；在 NAA0mg/L-0.1mg/L 浓度范围内，菘蓝不定芽诱导率已经十分可观；不过 NAA0mg
8、/L-0.1mg/L 不太适宜外植体不定根的形成。随着 6-BA 浓度的提高，不定芽诱导率呈整体升高趋势，但在 6-BA1.0mg/L-2.0mg/L 浓度范围内，诱导率升高不显著；对不定根诱导率的影响，6-BA2.0mg/L 时与 6-BA0.1mg/L 时相当。参考文献：1国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010 年版二部).北京：中国医药科技出版社，2010 年 1 月第 1 版.2肖培根主编.新编中药志.第三卷.北京：化学工业出版社，2001.123彭丽萍，张远兵，汪露润.菘蓝离体叶片高频再生体系的建立.安徽科技学院学报，2007，21(4)：1417.4彭菲，等.菘蓝子叶和下胚轴组织培养再生植株的研究.湖南农学院学报，1994，20（5）：450456.5陈薇，杜利云，寸守铣，赵丰萍.菘蓝下胚轴组织培养研究.药学实践杂志，2000，18（5）：337339.
