1、脾虚证大鼠胃、肠电机械活动异常与CCK，SS 含量变化的关系作者：刘芳 任平 李月彩 黄熙 【关键词】 脾虚 关键词: 脾虚;胃肠活动 ;缩胆囊素;生长抑素 中图号:R223.1 文献标识码:A 摘 要:目的 探讨脾虚证时胃肠激素改变与胃肠运动异常之间的关系. 方法 采用放射免疫分析法测定实验性脾虚证大鼠不同造模时间（7d，14d） ，胃窦、十二指肠、空肠、下丘脑及血浆中生长抑素（SS） 、缩胆囊素（CCK）含量并与正常对照组和四君子汤预防组比较.通过体内埋藏电极和传感器记录胃、肠电机械活动进行造模前后自身比较. 结果 脾虚早期（7d） ，SS 在下丘脑、血浆中含量升高，外周组织中含量下降（P
2、0.01）.CCK 在组织和血浆中含量均升高（P0.01）.胃电机械活动节律、振幅均下降（P0.01）.肠机械活动节律、振幅均升高（P0.01） ，电慢波节律下降，振幅升高（P0.01）.脾虚晚期（14d） ，SS 在下丘脑、血浆中含量下降，外周组织中含量升高（P0.01）.CCK 在下丘脑及胃窦组织中含量升高（P0.01） ，在血浆和肠道组织中含量下降（P0.01）.胃机械活动节律下降（P0.01） ，振幅改变不明显.电慢波节律、振幅均下降（P0.01）.肠电机械活动节律、振幅均下降（P0.01）.经四君子汤预防性治疗的动物体内激素含量及胃、肠电机械活动变化均无显著性意义. 结论 脾虚证时胃
3、肠激素改变与胃肠运动异常之间存在内在联系，且随病程发展呈动态变化.四君子汤对此有纠正作用. Keywords:spleen deficiency;gastrointestinal motility;chole-cystokinin;somatostatin Abstract:AIM To explore the relationship between the variation of gastrointestinal hormones and the disorder of gastrointestinal motility in pixu.METHODS Pixu rat mod-els（
4、n=60）were treated by reserpine for seven days and fourteen days respectively.The somatostatin（SS）and chole-cystokinin（CCK）levels in tissues and plasma of the rat mod-els was measured by RIA.The normal group and the group prevented and treated by Sijunzi decoction（SIJD）were cho-sen for contrast.Gastr
5、ointestinal electrical-automatic motili-ty were marked by chronically implanted electrodes and sens-ing element and compared between and after the treatment.RESULTS In the rat models of seven days，as compared with controls，the plasma and hypothalamus levels of SS in-creased and periphery organizatio
6、n levels of SS reduced（P0.01）;both tissues and plasma had higher levels of CCK than those of controls（P0.01）;as compared with before the treatment，the rhythm and amplitude of stomach electri-cal-automatic motility decreased（P0.01 ）;the rhythm of small bowl electrical slow wave decreased while the am
7、plitude increased;both rhythm and amplitude of small bowl automat-ic motility increased（P0.01）.In the rat models of four-teen days，the variation of SS in tissue and plasma was count-ed to the seven days;as compared with controls CCK levels were higher in stomach and hypothalamus（P0.01）and lower in p
8、lasma and gut than those of the controls（P0.01）;as compared with before the treatment，except the am-plitude of stomach automatic motility，gastrointestinal motili-ty decreased（P0.01）.There had no significant disorder of SS，CCK and gastrointestinal motility in the group prevented and treated with SIJD
9、.CONCLUSION There is relationship between the variation of gastrointestinal hormones and the disorder of gastrointestinal motility.They both vary with the development of pixu and could be modulated by SIJD. 0 引言 胃肠激素改变与胃肠运动异常是脾虚证两个主要的病理变化，而无论在生理或病理情况下，胃肠激素均为调节胃肠运动的重要因素.为探讨脾虚证时两者间的关系，我们在测定脾虚证大鼠血浆、组织中
10、缩胆囊素cholecystokinin（CCK） ，生长抑素 somato-statin（SS）含量变化的同时记录了胃、肠电机械活动，为探讨脾虚证的发病机理提供理论依据. 1 材料和方法 1.1 材料 雄性 SD 大鼠 60 只，体质量（22020）g， （121.5）wk 龄，本校实验动物中心提供.半导体应变片，双极银丝电极，直流电桥测量电路由中国医学科学院基础医学研究所生理研究室周吕教授提供.XWTD464 台式自动平衡记录仪购自上海自动化仪表公司大华仪表厂.四导生理记录仪购自成都仪器厂.四君子汤按白参:炒白术:茯苓:炙甘草=2 2 2 1 质量比例配制成水煎剂（含生药 3kg L-1 ）
11、 ，本院中药房提供.利血平由上海医科大学红旗制药厂提供.试剂 125 I-生长抑素放免分析试剂盒由天津千叶生物技术公司提供. 125 I-缩胆囊素为瑞典 EURO-DIA GNOSTICA AB 公司产品. 1.2 方法 大鼠手术埋置电极和应变片后 48h 记录 1d.再随机等分为 4 组:正常对照组 15 只，每只生理盐水 0.2mL d-1 股四头肌注射，同时灌服蒸馏水 0.2mL d-1 ;脾虚模型组 15 只，每只利血平 0.3mg kg-1 d-1 股四头肌注射，并灌服蒸馏水 2mL d-1 ，持续 7d;脾虚模型组处理方法相同，持续 14d;四君子汤治疗组 15 只，利血平用法用量
12、同上，同时灌服四君子汤 2mL d-1 ，共 14d.在体胃肠电波及运动波的记录，按参考文献1方法同步记录胃、肠电机械活动，并进行造模前后大鼠自身对照.每只动物均取餐后 4h 的 3 个时间段进行，每实验时程 2h.大鼠在造模前戊巴比妥钠麻醉，自剑突下作正中切口，取出胃和十二指肠，沿环行肌方向分别将传感器和双极电极埋植于胃窦部前表面胃大弯侧及幽门下 3mm 的十二指肠浆膜下，电极做 3 点固定.关闭腹腔，传感器和电极导线经皮下行至颈部穿出，传感器导线连接电桥和记录仪，记录胃和十二指肠运动 波，以每 3min 为 1 个计算单位计算胃和十二指肠运动波的振幅指数和运动节律.电极导线和四导生理记录仪
13、连接记录 34 个 IMC 周期.所有信号输入微机经程序处理.血浆、组织中 SS，CCK 含量测定均采用竟争性放射免疫非平衡法，于 15d（其中脾虚组为 8d） ，在禁食不禁水一夜后取血 2mL，同时取胃窦、十二指肠、空肠、下丘脑组织.血浆、组织样品（各取质量约 20g）预处理及测量方法按 RIA 试剂盒说明进行. 2 结果 本实验室 1990 年开始用利血平制作脾虚证大鼠模型，进行有关脾虚证与胃肠激素-胃肠运动关系的研究，实验条件掌握比较成熟，重复性好 2-5 .模型动物造模 4d 开始出现类似人脾虚证症状:纳差、倦卧、腹泻、体温下降等，7d 时症状最重.10d 后出现脱肛，腹泻停止，大便粘
14、稠或成型软便，机体极度衰竭.我们发现脾虚早期（7d）SS 在下丘脑、血浆中含量升高，外周组织中含量下降，脾虚晚期变化则相反（P0.01，Tab1）.CCK 脾虚早期（7d）在组织和血浆中含量均升高，脾虚晚期（14d）在下丘脑及胃窦组织中含量升高，在血浆和肠道组织中含量下降（P0.01，Tab2）.而经四君子汤预防性治疗的动物体内激素含量变化均无显著性意义，反证了脾虚证动物模型制作成功.胃、肠电机械活动记录表明，脾虚模型组胃窦机械活动和胃电慢波节律、振幅均下降（P0.01，Tab3）.十二指肠机械活动节律、振幅均升高，电慢波节律下降，振幅升高（P0.01，Tab4）.脾虚模型组胃窦机械活动节律下
15、降，振幅无改变，胃电慢波节律、振幅下降（P0.01，Tab3）.十二指肠电机械活动节律、振幅均下降（P0.01，Tab4）.四君子汤组各组数据变化无显著性差异.表 1 脾虚大鼠血浆和组织中 SS 含量的变化（略） 表 2 脾虚大鼠血浆和组织中CCK 含量的变化（略）表 3 在 3min 内各组胃窦机械运动及胃电慢波的变化（略）表 4 3min 内各组十二指肠机械运动及十二指肠电慢波的变化（略） 3 讨论 胃肠慢波电位为消化道平滑肌节律性地自发性去极化产生，被认为是平滑肌的起步电位，是平滑肌收缩频率的控制波，决定蠕动的方向、节律和速度.胃肠蠕动是受胃肠平滑肌基本电节律控制的，胃肌的收缩通常出现在
16、基本电节律波后 69s.胃电活动与胃动力密切相关，郭耸峰等6 研究表明，胃动力障碍患者均表现胃电活动异常.曲瑞瑶7 报道实验性脾虚证大鼠胃电快、慢波振幅均减少，胃运动减弱.神经体液因素可通过影响基本电节律调节胃肠活动.胃肠激素对胃肠运动的调控作用主要通过两个途径:通过血循环以内分泌形式作用于胃肠平滑肌细胞相应的受体;经胃肠肽能神经释放递质对胃肠运动起调控作用8 .而作为脑肠肽的胃肠激素还可在中枢发挥作用.因此本研究中同时测定了血浆、下丘脑和胃肠组织中的激素浓度.SS，CCK 广泛分布于中枢和胃肠组织.SS 主要生理作用是抑制胃肠运动9 及各种胃肠激素的释放10 .SS 对胃肠运动的抑制除直接作
17、用外，还可以抑制胃泌素引起的平滑肌细胞收缩活动11 .SS 在中枢含量变化与胃肠组织中恰好相反.胃肠组织中 SS 含量越高，中枢下丘脑含量越低，其对胃肠运动抑制程度越高;相反胃肠组织中 SS 含量越低下丘脑含量越高，则胃肠受抑程度就越低12 .本实验结果所示，SS 在中枢和胃肠组织中的含量相应变化与上述观点吻合.CCK 对胃平滑肌的生理作用为通过结合特异性受体而发挥对胃窦、幽门平滑肌细胞的收缩作用和对胃体平滑肌的舒张作用13 ，从而使胃松弛，排空延缓14，15 ，CCK 在肠道运动中主要是促进远端十二指肠和空肠蠕动16 .杨云生等17 报道肠易激综合证患者血浆中 CCK 浓度升高，可能会使肠道
18、运动增强，引起腹痛、腹泻等症状. 本研究中脾虚早期 CCK 在组织和血浆中含量均升高，抑制胃运动和促进肠蠕动作用加强，胃电慢波和胃活动节律、振幅均明显下降.与脾虚纳差、腹胀症状符合.十二指肠电慢波节律下降，振幅升高，肠机械活动显示节律、振幅均增加，肠电机械活动节律变化不同向可能系脾虚证时电机械偶联紊乱，或为实验误差，而振幅增加与脾虚泻泄症状吻合.SS 在下丘脑、血浆中含量升高，外周组织中含量下降，对胃肠运动和胃肠激素释放的抑制减弱，这与 CCK 含量增高，肠运动增强相符.胃运动方面，本研究显示 CCK 作用大于 SS，也可能还有其他神经体液因素参与调节而表现出综合效应.脾虚晚期，SS 在下丘脑
19、、血浆中含量下降，外周组织中含量升高，对胃肠运动和胃肠激素释放的抑制加强.CCK 在肠道组织中浓度下降，促进肠蠕动作用下降，在胃窦组织中浓度升高，抑制胃运动作用加强.胃肠电慢波和机械运动节律、振幅均明显下降与脾虚后期腹泻停止，大便粘滞症状相符.四君子汤治疗组激素变化及胃肠电机械活动的改变与对照组相比无显著性差异，说明四君子汤可通过调正胃肠激素、胃肠运动而发挥健脾作用. 本研究表明脾虚证时胃肠激素改变与胃肠运动异常之间存在一定联系，并随脾虚证病程发展呈动态变化.而四君子汤组激素浓度及胃肠电机械活动的变化与对照组相比均无显著性差异，说明四君子汤对两者均有调正作用. 参考文献: 1Zhou L.We
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