1、热盐水致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜超微结构的变化作者：张沥，王春梅，陶梅，张玲霞，江梅，曹广周 【关键词】 萎缩性胃炎 【Abstract】 AIM: To observe the ultrastructure diversification of gastric mucosa in atrophic gastritis rat model caused by highsalthot water and to study the pathogenesis of atrophic gastritis caused by highsalthot diet. METHODS： The atrophic g
2、astritis rat model was made by highsalthot water（55，150 g/mL, 2.5 mL/d, for 32 weeks）perfusion and the ultrastructure of gastric mucosa was observed by transmission electromicroscope. RESULTS： In the early stage of highsalthot water perfusion, the swell of mitochondrion, dilation of rough endoplasmi
3、c reticulum and short or lost of microvillus were observed in gastric mucosa. With the passage of time, the structure of mitochondrion became blurring, the endoplasmic reticulum dilated notably and microvillus lost significantly. CONCLUSION： Highsalthot water perfusion may cause ultrastructural dama
4、ge in gastric mucosa. 【Keywords】 highsalthot water；atrophic gastritis；ultrastructure 【摘要】 目的：研究热盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎（CAG）胃黏膜组织细胞超微结构的改变. 方法：用热盐水灌胃（55，150 g/L, 2.5 mL/d32 wk）建立大鼠萎缩性胃炎动物模型，选取大鼠腺胃胃窦组织行透射电镜标本制备并对组织细胞超微结构的变化进行动态观察. 结果：电镜观察到热盐水灌胃较早就出现了线粒体肿胀，粗面内质网扩张，微绒毛变短或丢失，随灌胃时间的延长，线粒体肿胀明显，局部空泡化，部分线粒体溶解坏死. 内质网
5、扩张明显，部分脱颗粒，微绒毛大量丢失. 结论：热盐水灌胃可引起胃黏膜组织细胞超微结构的损害. 【关键词】 热盐水；萎缩性胃炎；超微结构 0 引言 慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis）癌变率约28. 长期高盐饮食可导致慢性萎缩性胃炎，甚至诱发癌变1. 动物实验也已证实过热过咸的饮食可造成萎缩性胃炎2,3. 为探讨食物的热度和咸度对胃黏膜的影响，我们采用热盐水灌胃构建大鼠萎缩性胃炎动物模型，从组织细胞超微结构的角度研究热咸饮食与萎缩性胃炎形成的关系. 1 材料和方法 1.1 材料 健康 7 wk龄性成熟雄性 SD大鼠 56只,由第四军医大学实验动物中心提供，体质量
6、 170220 g，按随机化原则分为 2组，正常对照组 24只，热盐水组 32只，采用架式笼养，恒温（241），湿度 50%60%. 正常对照组，25蒸馏水 2.5 mL灌胃，每日 1次；热盐水组，55,150 g/L盐水 2.5 mL灌胃，每日 1次2. 具体造模方法见参考文献4. 1.2 方法 于 0，8，12 及 32 wk处死正常对照组和热盐水组大鼠各 4只，按体质量与给药容积比值为 5 g/L戊巴比妥 ip麻醉动物，取出鼠胃，沿大弯侧剪开胃腔，生理盐水冲洗干净，沿胃小弯条状取材，包括胃窦及部分胃体黏膜组织，30 g/L 戊二醛固定，缓冲液洗涤后再经 10 g/L四氧化锇4后固定 1
7、h，双蒸水漂洗，逐级丙酮脱水，环氧丙烷置换，Epon12 包埋. 聚合过程：37 12 h 45 24 h60 24 h. 聚合后做超薄切片，甲苯胺蓝染色，JEM2000EX（日本电子光学公司）透射电镜下观察. 2 结果 正常对照组胃黏膜，壁细胞胞质内有丰富的线粒体，胞内小管清晰可见，微绒毛较多较长，主细胞远端有板层状排列的粗面内质网，大量的酶原颗粒位于细胞近端的胞质内. 各周正常组大鼠超微结构基本相同（Fig 1A,B）. 热盐水组 8 wk，壁细胞线粒体轻度肿胀，主细胞内粗面内质网轻度扩张. 黏膜下层可见淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等炎细胞浸润（Fig 1C）. 热盐水组 12 wk，壁细胞微绒
8、毛变短或丢失，线粒体肿胀明显. 主细胞粗面内质网明显扩张. 可见少量细胞的胞核常染色质减少，异染色质增多，靠近核模，出现早期凋亡现象（Fig 1D）. 热盐水组 32 wk，壁细胞微绒毛大量丢失，线粒体肿胀，局部空泡化，线粒体颗粒明显，部分线粒体溶解坏死. 主细胞粗面内质网扩张明显，部分脱颗粒，胞质内酶原颗粒减少，可见脂滴形成. 早期凋亡现象更加普遍（Fig 1E,F）. 3 讨论 热烫和高盐饮食是不可忽视的两大胃黏膜损害因子. 高盐可刺激胃黏膜，导致壁细胞的脱落，从而破坏胃黏膜屏障，引起胃炎的发生，使DNA的合成和细胞增殖增加，最终导致胃癌的发生. 我国最新的一项调查显示，热烫饮食和高盐饮食
9、是上海市居民胃癌的 2个重要危险因子4,高盐饮食也是福建长乐市胃癌高发的危险因素之一5. 动物实验证实了热咸饮食可造成萎缩性胃炎2,3. 慢性萎缩性胃炎是癌前状态. 因此，研究热咸饮食与萎缩性胃炎的关系对胃癌的预防有重要意义. 我们发现，在热盐水灌胃致大鼠萎缩性胃炎形成的过程中，壁细胞的损害发生较早，主要表现为线粒体和微绒毛的变化. 在早期（8 wk）线粒体即开始肿大，随时间的延长，线粒体肿大越明显，局部空泡变，线粒体颗粒明显，部分线粒体溶解坏死，由于结构损伤，ATP 的产生锐减，壁细胞能量供应匮乏，泌酸过程减少甚至停止. 微绒毛的减少出现在 12 wk，至 32 wk微绒毛大量丢失. 由于
10、ATP产生的锐减、微绒毛的大量丢失，使壁细胞不仅从能量供应上，而且从结构上遭受到不可逆转的损害，因此胃酸分泌减少，这不仅严重影响大鼠的消化功能,而且将可能导致胃内细菌的过度生长，有利于内源性致癌物的形成. 我们还发现热盐水对主细胞的损害与壁细胞损害相平行. 随着热盐水刺激时间的延长，早期凋亡现象逐渐增多，说明热盐水灌胃可导致细胞凋亡的增加，这可能会刺激增殖的某些基因，使细胞增殖加剧，最终可能导致细胞增殖和凋亡的紊乱，在各种致癌因子作用下发生癌变. 【参考文献】 1 Palli. Episemiology of gastric cancer：An evaluation of available
11、evidenceJ. J Gastroenterol，2000；12（35 Suppl）：84-89. 2 张沥，张玲霞，徐俊荣，等. 热盐水致大鼠萎缩性胃炎动物模型的建立J. 世界华人消化杂志，2002；10(5)：571-574. Zhang L，Zhang LX，Xu JR，et al. Rat model of atrophic gastritis induced by highsalt hot waterJ. World Chin J Digestol，2002；10(5)：571-574. 3 张沥，张玲霞，徐俊荣，等. 热水致萎缩性胃炎形成的实验J. 第四军医大学学报, 2003
12、；24（15）：1355. Zhang L，Zhang LX，Xu JR，et al. Experimental study of hot water on development of atrophic gastritisJ. J Fourth Mil Med Univ，2003；24（15）：1355. 4 鲍萍萍，高立峰，刘大可，等. 上海市居民饮食与胃癌关系的病例对照研究J. 中国肿瘤，2003；12(2)：66-70. Bao PP，Gao LF，Liu DK，et al. A casecontrol study of the relationship between diet and stomach cancer in Shanghai residentJ. Bull Chin Cancer，2003；12(2)：66-70. 5 陈建顺，陈增春，吴品萍，等. 长乐市胃癌危险因素病例对照研究J. 中华预防医学杂志，1999；33（增刊）：29-31.
