1、生长抑素型受体在胰腺癌旁组织中表达的研究作者：方汝亮 刘志梅 颜廷俊 盖学银 王欣 秦仁义 【关键词】 生长抑素 【摘要】目的了解原发性胰腺癌组织和癌旁组织中生长抑素型受体（SST2R）的表达情况，探索生长抑素及其类似物治疗胰腺肿瘤效果不一致的原因。方法采用免疫组织化学 LSAB 法检测 40 例原发性胰腺癌组织和癌旁 3 cm 组织中 SST2R 的表达，并用 2 检验分析了 SST2R 在原发性胰腺癌组织与癌旁组织中表达的差异性。结果胰腺癌组织和癌旁组织同时表达 SST2R 5 例，表达阳性率为 12.5%（5/40） ；胰腺癌旁组织SST2R 阳性表达率为 85%(34/40)，29 例
2、仅胰腺癌旁组织表达；胰腺癌旁组织 SST2R 阳性表达率明显高于胰腺癌组织（P0.05） 。结论 SST2R在不同的胰腺癌患者和同一胰腺癌患者的癌组织及癌旁组织中的表达有显著性差异，这可能是生长抑素及其类似物治疗胰腺癌效果不一致的重要原因。 【关键词】胰腺癌旁组织；生长抑素型受体；免疫组织化学 【Abstract】ObjectiveThe current study was designed to investigate somatostatin receptor subtype 2 gene expression in tumor tissues and non-carcinoma adja
3、cent tissues of primary pancreatic carcinoma, and explore the cause of the difference in the treatment against pancreatic neoplasms by exogenous somatostatin and its analogues. MethodsThe expression of SST2R in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of primary pancreatic carcinoma in 40 pa
4、tients was examined by LSAB method, and we analysed the difference of the SST2R expression in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma by statistical method-2 test. ResultsAmong these cases, 5 patients had the SST2R expression in both tumor tissues and non-carcinoma a
5、djacent tissues ofpancreatic carcinoma, the positive rate was 12.5%(5/40); 29 cases had the SST2R expression only in non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma, and the positive rate was 85%(34/40) in non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma. The positive rate of SST2R in n
6、on-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma was significantly higher than that in tumor tissues of pancreatic carcinoma (P005). Conclusion The expression of SST2R had the significant difference in tumor tissues and non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma in both diverse and
7、identical patients, it may be the important reason of the variable effect on the treatment against pancreatic carcinoma by exogenous somatostatin and its analogues. 【Key words】non-carcinoma adjacent tissues of pancreatic carcinoma, somatostatin receptor subtype 2, lmmunohitochemistry 近年来的研究表明，生长抑素及其
8、类似物通过肿瘤组织中生长抑素受体的介导，对多种实体肿瘤如大肠癌、肝癌等有明显的生长抑制作用，肿瘤组织中生长抑素受体的表达状况是影响生长抑素及其类似物治疗肿瘤疗效的重要因素1，2 。近年来的临床研究报告表明，生长抑素及其类似物治疗胰腺癌的效果不一致 ，其原因至今仍不清楚。本研究采用免疫组织化学 LSAB 法检测了 40 例原发性胰腺癌组织和癌旁组织中生长抑素型受体（SST2R）的表达，旨在探索生长抑素及其类似物治疗胰腺癌效果不一致的根本原因。 1 资料与方法 1.1 一般资料 40 例原发性胰腺癌标本均取自本院病理科，患者年龄 3371 岁（平均年龄 55.65 岁） ，其中男性 26 例，女性
9、 14 例；病理诊断均为胰腺导管腺癌，其中胰头癌 23 例，胰体、尾癌 17 例。按UICC TNM 临床分期：期 14 例，IV 期 26 例。所有标本的胰腺癌组织和癌旁 3 cm 组织均经 10% 的福尔马林固定、脱水，常规石蜡包埋，制备 4 m 厚连续切片。 1.2 主要试剂 SST2R 羊多克隆抗体购自美国 Santa Cruz 公司；二抗生物素化免抗山羊 IgG(ZB-2050)为美国 ZYMED 公司产品；过氧化酶标记的 Streptavidin 购自丹麦 DAKO 公司。 1.3 免疫组化染色主要步骤切片经常规脱蜡至水，加 0.01 M 枸椽酸盐缓冲液（pH 6.0） ，用微波炉
10、煮 10 min，加一抗，4过夜；加 1300 倍稀释的生物素标记的免抗山羊 IgG，37 1h。加 1400 倍稀释过氧化酶标记的 Streptavidin，37 30min ; DAB 显色，显微镜下控制染色终点，苏木素复染，透明，封片。以 1010 的目镜测微尺于 40 HP 物镜下观察计数。以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。 1.4 结果判断细胞膜/浆中出现棕黄色染色为阳性判断标准。4010 视野下用 1010 的目镜测微尺计数 1 000 个细胞，阳性细胞数比例10%计“” ，1020%计“” ，2050%计“” ，75%计“” 。 1.5 统计学处理计数资料采用配对四格
11、表资料 2 检验。 2 结果 40 例原发性胰腺癌组织中，胰腺癌组织和癌旁 3 cm 组织同时表达 SST2R 5 例，阳性率为 12.5%（5/40） ；胰腺癌旁 3 cm 组织 SST2R 阳性率为 85%(34/40)，29 例仅胰腺癌旁组织表达 SST2R。胰腺癌旁组织SST2R 阳性率明显高于胰腺癌组织（P0.05，表 1） 。 表 1SST2R 在人胰腺癌组织和癌旁 3cm 组织中的表达癌旁组织 SST2R癌组织 SST2R+-+529-0 6 注：校正 2=27. 03，P0. 01。 3 讨论 生长抑素及其类似物对良恶性肿瘤的抑制作用已为大家所公认，其抑制作用与肿瘤组织是否表达
12、 SST2R 直接相关2 ，作用机制主要是通过与肿瘤组织中 SST2R 结合，直接抑制肿瘤细胞的分裂增殖或通过抑制体内各种生长因子如血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子等而抑制肿瘤的生长 。可通过直接和间接的通路抗组织增生和抗肿瘤的发生3 ；并可通过上调 P27 致胰腺癌细胞周期停止于 G0S1 期而诱导其凋亡 。已有研究表明，原发性胰腺癌组织中 SST2R 表达较少或缺失6 ，但关于癌旁组织中 SST2R 的表达状况未见报道。本研究结果显示，在 40 例原发性胰腺癌组织中仅 5 例 SST2R 表达为阳性，阳性率为 12.5%，说明大多数胰腺癌组织中缺乏 SST2R 亚型的表达，这可能是大
13、多数胰腺癌对生长抑素及其类似物治疗效果不明显的主要原因。有趣的是大多数胰腺癌旁组织中 SST2R 表达较高，其机制和作用有待进一步探讨。本研究结果提示，若胰腺肿瘤组织和肿瘤旁组织 SST2R 均减少，生长抑素及其类似物对胰腺肿瘤的治疗效果可能无效，但当胰腺肿瘤组织或和肿瘤旁组织 SST2R 明显表达时，生长抑素及其类似物对胰腺肿瘤可能有一定的治疗作用。因此，胰腺肿瘤组织或和肿瘤旁组织 SST2R 的表达不同，必然导致不同的治疗效果，这可能是生长抑素及其类似物治疗胰腺肿瘤效果报告不一致的主要原因7 。我们认为，生长抑素及其类似物用于胰腺肿瘤的治疗前，明确 SST2R 在胰腺肿瘤组织和肿瘤旁组织中
14、的表达情况极为重要，这也有助于最终明确生长抑素及其类似物治疗胰腺肿瘤的确切效果。 参考文献 1. Kouroumalis E, Skordilis P, Thermos K, et al. Treatment of hepatocellular carcinoma with octreotide: a randomized controlled study J. Gut, 1998,42 (3): 442 2. Delesque N, Buscail L, Esteve JP,et al. SST2R somatostatin receptor expression reverses the
15、tumorigenicity of human pancreatic cancer cells. Cancer Res, 1997, 57: 956 3. Buscail L, Esteve JP. Inhibition of cell proliferation by the somatostatin analogue RC-160 is mediated by somatostatin receptor subtypes SST2R and SST5R through different mechanisms. Proc Natl Sci USA, 1995, 92: 1580 4. Kn
16、uhtsen S, Esteve JP, Bernadet B, et al. Molecular characterization of the solubilized receptor of somatostatin from rat pancreatic acinar membranes. Biochem J, 1988, 254: 641 5. Qin Renyi. The effect of somatostatin on SST2R mRNA expression in rat with pancreatic cancer. 2001 国际暨第二届全国胰腺癌诊治论文专集，2001：
17、31 6. Buscail L, Saint-Laurent N. Loss of SST2R somatostatin receptor gene expression in human pancreatic and colorectal cancer. Cancer Res, 1996, 56: 1823 7. William EF, Peter M, Thomas MO, et al . Expression of the somatostatin receptor subtype-2 gene predicts response of human pancreatic cancer to octreotide J. Surgery, 1996, 120: 234
