1、肾组织表皮生长因子含量改变在增生性肾炎中的意义作者：张建国 王惠民 李开龙 阎振成 徐有奇 【关键词】 增生性肾小球肾炎, 关键词: 表皮生长因子;增生性肾小球肾炎 摘 要:目的 探讨表皮生长因子（hEGF）在增生性肾小球肾炎（PGN）发病中的作用. 方法 采用放射免疫分析法检测 24 例 PGN、12例非 PGN 患者及 13 例正常人血清、尿液和肾活检组织 hEGF 含量. 结果 PGN 组肾组织、尿 hEGF 含量显著高于非 PGN 组（0.630.18vs0.590.15，27551vs6419，P0.01）和正常对照组（0.630.18vs0.540.14，27551vs5418，P
2、0.01） ，PGN组血清 hEGF 较非 PGN 和正常对照组均无显著差异:肾组织 hEGF 含量愈高，肾小球病理改变程度愈重（r=0.651，P0.01）;尿 hEGF 含量与肾组织 hEGF 含量正相关（r=0.806，P0.001）. 结论 hEGF 可能与 PGN发病机制有关，尿 hEGF 含量测定可反映肾组织局部 hEGF 含量变化. Keywords:epidermal growth factor;proliferative glomem-lonephritis Abstract:AIM To investigate the effect of human epidermal g
3、rowth factor（hEGF ）in the pathogenesis of proliferative glomemlonephritis（PGN）.METHODS Twenty-four pa-tients with PGN and twelve non-PGN were included in this study.Thirteen healthy person were included as normal con-trol.The concentrations of hEGF in serum.urine and renal biopsy tissues was detecte
4、d by using immunofluorescence assay.RESULTS The hEGF concentrations of renal tissues and urine in patients with PGN is much higher than that in patients with non-PGN（0.630.18vs0.590.15，27551vs6419，P0.01）and in normal control（0.630.18vs0.540.14，27551vs5418，P0.01） ，and the concen-trations correlated w
5、ith the extent of glomerular histological changes（r=0.651，P0.01）.There was correlationship be-tween urinary and renal hEGF level（r=0.806，P0.001）.CONCLUSION hEGF may play a role in the pathogenesis of PGN，urinary hEGF concentrations in patients with PGN might be a reflection of the renal hEGF level.
6、0 引言 肾小球内系膜细胞（MC）增殖和细胞外基质（ECM）增加是增殖性肾炎（PGN）最常见、最重要的病理特征.人表皮生长因子（hEGF）是众多细胞因子网络中的重要因子之一，其在 PGN 患者肾局部是否异常升高及其在肾小球免疫损伤中的作用罕有明确报道1 .我们观察了肾组织hEGF 含量改变与 PGN 患者病理改变关系，并评价检测尿 hEGF 的临床意义. 1 材料和方法 1.1 材料 原发性慢性肾小球肾炎患者 36（男 16，女 20）例，平均年龄（29.41.2）岁，平均病程（4.60.3）a.肾穿活检标本均进行光镜和免疫荧光检查，并按 WHO1982 年制订的肾小球疾病分类标准进行病理诊断
7、.其中 PGN24 例（系膜增生性肾炎 17 例，系膜毛细血管性肾小球肾炎 7 例） ，非 PGN12 例（膜性肾小球肾炎 11 例，局灶节段性肾小球病变 1 例）.所有病例均排除了继发性肾脏病.另设 13 例健康成人血、尿及移植供肾组织作对照. 1.2 方法 取晨空腹不抗凝静脉血及一次性随意尿各 3mL，于 4下1000r min-1 离心 10min，分离上清液备检.每例肾活检标本均取 10mg 肾组织置于冷试管中，均存在于-20以下冰箱中.测定时于肾组织管中加入生理盐水 2mL，内切式匀浆机匀浆 5min 后，离心方法同上，取上清液备检.采用放免法测定各样本中 hEGF 含量，按说明书操
8、作.所有肾活检标本肾小球至少 10 个.在光镜下，将肾小球病理改变依据病变程度分为轻、中、重度2 .计数 3 个以上正切肾小球细胞数，取其均值作为单个肾小球细胞数，反映 MC 的增生程度.同时观察系膜区有无免疫球蛋白沉积.另以常规方法对肾病理切片进行 PASM 染色，参照姜傥等3 的方法测定肾间质容量以定量反映 ECM 病变程度.间质面积（I）=总皮质面积（C）-（小球总面积+血管总面积+小管总面积）;间质容量（Vi）=I/Cl00%.用四层 PAP 法分别检测肾间质 CD4+ 和 CD8+ 淋巴细胞，用测微器计数每 mm2 肾皮质、髓质区的 CD4+ 和 CD8+ 细胞数，以两部位CD4+
9、，CD8+ 细胞数之和的均值表示间质淋巴细胞数4 . 统计学处理:数据用 x s 表示，采用 t 检验、相关分析及 Sperman等级相关分析. 2 结果 PGN 组尿和肾组织 hEGF 含量均显著高于非 PGN 和正常对照组（P0.01） ，血清 hEGF 较非 PGN 和正常对照组无显著差异（P0.05）;PGN 组肾小球细胞数、Vi，CD4+ 及 CD8+ 亦显著高于非PGN 和正常对照组（P0.01）;肾小球细胞数、及尿 hEGF 与肾组织hEGF 正相关（r=0.738，P0.001;r=0.689，P0.01;r=0.806，P0.001） ，肾组织 hEGF 分别与 CD4+ 及
10、 CD8+ 呈正相关（r=0.551，P0.01;r=0.472，P0.05，Tab1）. 表 1 慢性肾炎患者各检测指标变化 略 PGN 患者不同程度肾小球病变 hEGF 含量比较:PGN 伴中度肾小球病变患者肾组织及尿 hEGF 含量均显著高于 PGN 伴轻度肾小球病变组肾组织:（3328571）g L-1 vs（2476950）g L-1 ，P0.01;尿:（29655）g L-1 vs（21148）g L-1 ;PGN 肾小球病变程度分别与肾组织、尿 hEGF 含量正相关（r=0.651，P0.01;r=0.551，P0.05）.PGN 患者肾小球系膜免疫球蛋白沉积组与无沉积组肾组织
11、hEGF 含量比较，PGN 肾小球系膜免疫球蛋白沉积组肾组织 hEGF 含量显著高于无沉积组（28951）g L-1 vs（25148）g L-1 ，P0.05. 3 讨论 hEGF 作为一种具有很强致细胞分裂活动的因子，可能控制肾小球 MC的生长，并影响肾小球 ECM 的形成5 .近期研究发现，hEGF 在肾小球肾炎发病中影响着肾小球的滤过率以及炎性细胞的浸润6，7 .我们通过对 PGN 患者肾组织 hEGF 含量的测定，提示 hEGF 可能在 PGN 发病中起一定作用.PGN 患者肾局部存在 hEGF 含量的异常增加，其可能通过促进MC 的增殖和 ECM 的增多与积聚参与了 PGN 的发病
12、，并与肾小球病理改变程度密切相关.体外实验证实 hEGF 可由上皮细胞、内皮细胞、T 淋巴细胞、MC 和成纤维细胞等合成和分泌 hEGF，而这些细胞正是肾脏固有细胞和PGN 主要浸润细胞.PGN 时由于各种致病因素和本研究所观测提示的免疫球蛋白沉积和淋巴细胞浸润等的作用，引起细胞因子网络失调，肾脏固有细胞和浸润细胞合成和分泌 hEGF 异常，并在肾局部形成高浓度hEGF，hEGF 又促进 MC 增殖，二者互为因果，形成恶性循环.其结果可导致肾小球持续过度的免疫损伤，并促进 MC 不断增殖和 ECM 积聚，最终导致肾小球纤维化和硬化8 .因此深入探讨 hEGF 的致病作用机制和调整肾局部 hEG
13、F 分泌异常状态，将有助于对 PGN 免疫发病机制的认识和寻找新的有效治疗方案. 我们还发现，PGN 组尿 hEGF 含量亦显著高于非 PGN 和正常对照组，并与肾组织 hEGF 含量正相关;尿 hEGF 含量愈高，肾小球病理改变程度愈重.上述结果表明，检测尿 hEGF 含量可间接反映肾局部 hEGF 含量的变化，可作为判断肾脏病变轻重、疗效及预后一个重要指标. 参考文献: 1Paizis K，Kirkland G，Khong T，Katerelos M，Fraser S，Kanel-lis J，Power DA.Heparin-binding epidermal growth factor-
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