1、中药龙葵的有效化学成分的色谱分析摘 要：本文具体探讨了药龙葵的有效化学成分的提取与色谱分析。关键词：中药龙葵；茄胺；超声波；色谱；职称论文1 材料与方法1.1 实验仪器与材料PHS-3C 精密 pH 计(北京精密仪器有限公司)；DZF-6050 型真空干燥箱(北京三博科技有限公司)；SENCO R 型旋转蒸发器(北京生物创新技术有限公司)；AY120 电子天平(日本岛津有限公司)；高效液相色谱仪(日本岛津有限公司)；甲醇、乙醇、氯仿均为分析纯。1.2 超声波辅助提取称取龙葵样品，用 vHcl：v(乙醇)1：4 溶液润湿 24h 后，龙葵与乙醇按 1g：lOmL 加入乙醇，在常温下采用超声波提取
2、两次。过滤后合并滤液。滤液经减压蒸馏后得到黄绿色固体。用 0.5mol/L 的 HCl 溶解甾体类生物碱粗提物后，用氯仿萃取三次，去氯仿层，水相用 NaOH 溶液调节至 pH为 1O.5，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干后用甲醇溶解并定容至 50mL，得到龙葵生物总碱的甲醇溶液。1.3 茄胺的制备将含生物总碱的甲醇溶液定量取出并减压蒸干后，残留物用 40mLvHcl：v(乙醇)1：1 溶解，在 100 度下水解，水解后将溶液中乙醇蒸馏去除，余液用氯仿萃取三次，取酸水层。经 NaOH 溶液调节至 pH 为 1O.5 后，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干并用甲醇溶解，定容至 50mL，得到
3、茄胺的甲醇溶液。1.4 色谱分析经在紫外区全波段扫描确认标样茄胺在 210hm 处有最大吸收峰，因此，选定 210hm 作为茄胺的检测波长。色谱条件乙腈：水为 55：45(水相 pH用磷酸调节至 2.7)，流速为 1.2mL/min。茄胺进样量 20ug/mL-200 ug /mL 时。进样量 2(ug/mL)与峰面积之间呈良好的线性关系。2 结果2.1 提取效果超声波辅助提取中草药有效成份具有快速、简易、提取效率高的特点。依据这个原则，本文选择实验条件温度为：25 度，乙醇浓度为 95%。在最佳的实验条件下，茎叶内的茄胺的平均得率为 0.42%，果实内的茄胺平均得率 3.22%。称取 3 份
4、龙葵果实样品，进行平行提取实验，计算茄胺产物的质量百分数以及同批样品的 RSD 值，结果表明，3 个龙葵样品提出的茄胺平均质量分数为：2.53%，RSD 值为：4.18%，证实提取工艺稳定、可靠。2.2 色谱效果本文选择水解 1h 的甾体类生物碱样品作为考查对象，在未添加磷酸的条件下，色谱峰峰形严重拖尾，随着酸度的加强，峰形开始锐化，至 pH2.7时，甾体类生物碱和茄胺已完全离子化峰形尖锐，两类色谱峰分离度高。3 讨论结合现代医学的观点和手段，在中草药资源宝库中、特别是从确有疗效的中草药中，寻找和开始具有我国自主知识产权的抗癌新药不仅对促进人类的健康，而且对推进我国民族医药工业的发展和中药现代
5、化具有十分重要的意义。龙葵是一年生草本，全草含澳洲茄碱、澳洲茄明碱、澳洲茄边碱等多种甾体类生物碱，它们的苷元主要为茄胺，生物碱含量以果实为最多，在未成熟的果实中含量最高，果实成熟后则消失。龙葵含有丰富的药用和保健价值成分，具有消炎、抗菌、降压、抗癌等多种药用功能，但到目前为止，龙葵的资源利用率仍然比较低，有关其活性成分研究的报导更是一片空白。上个世纪，有人采用国外提取茄属植物的工艺，用薄层扫描色谱法测定了龙葵中茄碱的甙元茄胺的含量，发现龙葵果实中茄胺含量明显高于全草含量，并在未成熟的青果实中发现茄胺含量甚至高达 4.2%，但有关龙葵中总生物碱提取工艺及总含量的快速测定方法尚未见报道。在本文结果
6、显示中，超声波辅助醇提法提取龙葵甾体类生物碱具有操作简单、提取时间短的优点。同时其重复性好、稳定性与回收率高。高效液相色谱近年来以其绝对优势广泛用于生物碱的分离和鉴定，尤其是由非极性固定想和极性流动相组成的反液相色谱系统(RP-HPLc)的应用约占 90%，非极性固定相主要是以硅胶为基质的硅烷化反相键和相。本文研究并确定了高效液相色谱测定甾体类生物碱及其苷元茄胺的分析条件：紫外检测波长 210hm。流动相选择乙腈：水为 55：45(水相 pH 用磷酸调节至 2.7)，进行紫外、红外、质谱分析，证实其为龙葵甾体类生物碱的苷元茄胺。参考文献：1 季宇彬，王宏亮，高世勇龙葵碱对肿瘤细胞膜 ATP 酶活性的影响J哈尔滨商业大学学报2009，21(2)：127-1292 赖亚辉龙葵果的急性毒性和遗传毒性试验J癌变，畸变，突变2010，17(I)：53-563 赵晓琴，曾祥法龙葵片对原发性肝癌治疗作用的临床研究J辽宁中医杂志，2011，29(II)：671-672
