1、生化反应与血清学实验,医学微生物学实验七,一、生化反应,掌握细菌生化反应的原理和临床意义。熟悉鉴别细菌常用的生化试验原理、方法和结果判断。,实验目的,不同的细菌 含有不同的分解代谢的酶 具有不同的分解代谢途径 对同一营养物质的分解代谢及其产物有所不同,利用生化方法检测代谢产物以判断细菌的分解代谢特征，从而达到鉴定细菌的目的。称：细菌的生化反应检测法,知识点,常见的生化反应,实验材料,1.菌种 大肠埃希菌、沙门氏菌2.微量生化反应管 葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、蛋白胨水（靛基质）、硫化氢。3.试剂 吲哚试剂,葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖,大肠埃希菌：分解乳糖产酸产气致病性肠道细菌：
2、大多数不分解乳糖,1.糖发酵试验,1.糖发酵试验,（1）原理,1.糖发酵试验,（2）方法,中性或碱性 紫色 酸性 黄色,1.糖发酵试验,（3）结果判断,溴甲酚紫,有细菌生长培养基呈混浊，可能出现3种结果。,（3）结果判断,2.靛基质（吲哚）试验,（1）原理,（2）结果判断,阳性,2.靛基质（吲哚）试验,3.硫化氢试验,（1）原理,（2）结果判断,3.硫化氢试验,生化反应材料分配,二、血清学鉴定,掌握细菌的血清学鉴定法 。,实验目的,实验原理,根据抗原抗体反应具有高度特异性的特点，用已知抗体来检测未知抗原（细菌）。,二、血清学鉴定,实验材料,1.菌种 待检细菌2.试剂 多价沙门菌O(A-F)诊断
3、血清3.其他 载玻片,沙门氏菌的主要抗原组成,O抗原：至少58种, 含相同抗原组分归为一组，引起人类疾病的沙门菌大多数在AF组。H抗原：分为、相，相以a、b、c等表示，相以1、2、3等表示。Vi抗原：抗原性弱，不稳定，可阻止O抗原与其相应抗体的凝集反应。,沙门氏菌诊断血清（11种）,先用AF和 Vi血清检测，根据结果再进行其他鉴定。,注意：,实验方法,结果判断,沙门氏菌属国内常见菌型诊断抗原表,注意事项,1.生理盐水端应不出现凝集颗粒。2.沙门菌Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体发生凝集，故在做玻片凝集时应加注意，需事先加热破坏Vi抗原，O抗原才得以与相应的O诊断血清发生凝集。,血清学实验进程,先鉴定AF和Vi，根据结果再进行其他鉴定。,血清学实验材料分配,沙门氏菌属常见菌型诊断抗原表,
