1、尿胱蛋白酶抑制剂 C 在糖尿病肾病早期诊断中的价值【关键词】 糖尿病肾病 【Abstract】 AIM: To investigate the levels of urinary Cystatin C, 2microglubin and albumin in different stages of diabetes mellitus and to explore the diagnostic value of urinary Cystatin C in early diabetic nephropathy. METHODS: The urinary albumin and2microglubi
2、n were detected by radioimmunoassay (RIA) and Cystatin C was detected by enzyme immunoassay. RESULTS: With UAER30 mg 24 h urine1, the level of urinary Cystatin C（0.280.09) mg/L was significantly higher than that in the normal group （0.150.08) mg/L (P0.01), and the 2microglubin （0.100.04) mg/L and th
3、e albumin （6.221.41) mg/L were significant higher than those in the normal group （0.040.03) mg/L and (3.542.42) mg/L, (P0.05）. With UAER in 30-300 mg 24 h urine1, the levels of urinary Cystatin C, 2microglubin and albumin increased significantly (P0.01). CONCLUSION: The levels of urinary Cystatin C,
4、 2microglubin and albumin in diabetes mellitus patients are significant higher than those in the normal group, of which the level of Cystatin C increases significantly at early stage, so the Cystatin C is a sensitive index for the early injure of renal in diabetes mellitus. 【Keywords】 diabetic nephr
5、opathy; urine; albumin；2microglubin；cystatin C 【摘要】 目的： 通过检测糖尿病肾病（DN）患者不同临床分期尿中胱蛋白酶抑制剂 C（Cystatin C, Cys C）的含量，与同时期尿中白蛋白（Alb） 、2 微球蛋白（2MG）含量比较，探讨 Cys C在 DN早期诊断中的价值. 方法： 用放射免疫法测定尿 Alb，2MG；酶免疫标记法测定尿 Cys C. 结果： DN患者在 24 h尿白蛋白排泄率（UAER）小于 30 mg时，尿中 Cys C升高至（0.280.09）mg/L，与正常对照组（0.150.08）mg/L 比较差异非常显著（P0.
6、01） ；Alb 升高至（6.221.41）mg/L，与正常对照组（3.542.42）mg/L 比较差异显著(P0.05). 2MG 升高至（0.100.04）mg/L，与正常对照组（0.040.03）mg/L 比较差异显著(P0.05). 24 h尿 Alb排泄率在30300 mg 时，尿 Cys C，Alb 和 2MG 均显著增高(P0.01). 结论：在 DN早期，尿 Cys C，Alb 和 2MG 的排出量均升高，但 Cys C更显著. 尿 Cys C可以作为诊断 DN早期肾损害的灵敏指标. 【关键词】 糖尿病肾病；尿；白蛋白；2 微球蛋白；胱蛋白酶抑制剂 C 0 引言 糖尿病肾病（D
7、N）是糖尿病主要并发症之一，在糖尿病死因中占有较大比例，故早期诊断对其防治和预后具有较大意义. 目前对于 DN的实验室诊断多以尿蛋白、肾功放射免疫检查、血尿素、肌酐等作为主要诊断指标. 孙相国等1及 Poge等2报道胱蛋白酶抑制剂C（Cystatin C，Cys C）是检测肾小球滤过率良好而敏感的指标，检测尿中 Cys C尚未见报道 . 我们拟检测 DN不同临床分期尿中 Cys C，并与同时期尿中微量蛋白如白蛋白（Alb） 、2 微球蛋白（2MG）进行比较，探讨 Cys C是否可以作为早期诊断 DN的灵敏指标. 1 对象和方法 1.1 对象 正常对照组 40（男 23，女 17）例，为健康体检
8、人群，年龄35.665.4（56.410.4）岁，均无心、肝、肾、高血压、糖尿病等. 按 WHO标准诊断即空腹血糖7.0 mmol/L 或餐后 2 h血糖11.1 mmol/L的患者为糖尿病组，共 100（男 53，女 47）例，年龄36.166.6（54.213.5）岁，均无肝脏及泌尿系统其他疾病. 根据 DN尿 Alb排泄率（UAER）又将其分为 3组. 其中，A（无肾病）组 30例，24 h UAER30 mg； B（早期 DN）组 35例，24 h UAER在 30300 mg之间；C（临床 DN）组 35例，24 h UAER300 mg. 1.2 方法 患者晨起排空尿，饮水 500
9、 mL，1 h后收集尿液，-20保存待测. 采用上海德波生物技术有限公司的试剂盒并严格按要求操作. 放射免疫法检测尿 Alb和 2MG；酶免疫标记法检测尿 Cys C. 统计学处理： 实验数据以 xs表示，以单因素方差分析进行数据处理，使用 SPSS 10.0统计软件. 2 结果 2.1 尿中 3种蛋白的检测与正常对照组比较，A，B，C 3组尿中 Cys C，Alb 和 2MG 均呈逐渐增高趋势. A组中 Cys C与正常对照组比较明显升高（P0.01） ；Alb 和 2MG 与正常对照组比较，也有升高(P0.05). B组中尿 Cys C，Alb 和 2MG 较 A组增加更明显，与正常对照组
10、比较均有更显著差异（P0.01）. C 组中 3种蛋白进一步增高，但以 Alb增高比例最大（Tab 1）.表 1正常对照组与糖尿病肾病组尿中3种蛋白的检测（略） 2.2 尿中 3种蛋白的阳性率取对照组 x2 s作阳性界值，对照组数值均在正常范围. A组中 Cys C, Alb和 2MG 阳性率分别为53%（16/30） ，17%(5/30)和 33%(10/30)；B 组中 CysC，Alb 和 2MG 的阳性率分别为 71%（25/35） ，27%(9/35)和 46%（16/35） ；C 组中三者的阳性率均为 100%. 3 讨论 DN 是糖尿病常见而又难治的微血管并发症3之一，而早期 D
11、N又是一个隐匿的过程4 ，常规测定血中肌酐、尿素氮以及尿中蛋白含量无法早期诊断. ECT检查双侧肾小球滤过率是目前诊断肾功能受损的金指标，可以作为 DN的早期诊断手段. 但由于价格较高，需要有一定的仪器设备，并有一定的放射性，难以作为常规的检测方法. 尿中微量蛋白等敏感指标检测有助于早期 DN的诊断5 ，尿 Alb，2MG 等指标已在临床上广泛应用，但仍有局限性，且受到一些肾性和肾外因素的干扰. 所以，寻找更灵敏、更实用的检测指标，有利于糖尿病患者的一级、二级预防，对于患者的生活质量及生存时间有非常重要的意义. Cys C是 1种低分子量的非糖化碱性蛋白，Mr 13 359，等电点9.3，是直
12、接基因产物，由有核细胞产生，各组织生成率恒定，不受性别、肌肉量、饮食、炎症、胆红素、溶血等因素的影响6,7. Cys C几乎全部由肾小球滤过，不被肾小管重吸收和分泌，在近端肾小管上皮细胞被分解代谢. Mojiminiyi等8报道在 DN早期，Cys C反映肾小球滤过功能较 2MG、肌酐等更敏感. 2MG 也是 1种分子量很低的蛋白质，容易通过肾小球滤过膜，由近曲小管重吸收并在肾小管细胞中降解，但在血循环中的水平不稳定，在感染等病理状态下，其生成速度会增快9. 尿中 Alb也受环境温度、运动、感染等其他因素的影响. 本结果显示，糖尿病患者无肾病组，尿中 Cys C，Alb 及 2MG 与正常对照
13、组相比已明显升高，其中 Cys C升高更明显. 早期 DN组 Cys C，Alb 及 2MG 与正常对照组相比升高更明显，提示 Cys C与Alb，2MG 一样可以反映早期肾功能的损害，但他们反映肾功能的敏感性不同，由高到低依次为 Cys C，2MG 和 Alb. 因为 Cys C，2MG 均由近端肾小管上皮细胞分解代谢，当肾小管功能受损时，其上皮细胞分解代谢能力下降，尿中 Cys C，2MG 含量可明显增加，推测糖尿病患者由于高血糖的毒性作用以及高滤过期肾小管重吸收负担的加重，在糖尿病尚未发生肾小球滤过屏障损害时，肾小管功能已遭到损伤，也就是说，在 DN早期时，肾小管损害要早于肾小球滤过膜的
14、损害. 以往认为尿 Alb是反映肾小球滤过功能的敏感指标. 而我们的研究资料显示,在无 DN组中,只有 17%患者的尿 Alb增高,33%患者 2MG 升高，而 Cys C的阳性率高达 53%. 在早期 DN组尿 Alb升高的比例也低于其他两种，表明 Cys C对 DN的早期诊断要优于 2MG 和 Alb，而 DN早期的血清肌酐、尿素氮仍处于正常范围. 病程发展至临床 DN期，3 种蛋白的阳性率均达 100%，此期出现持续性的非选择性蛋白尿，Alb 的排出比例最高，临床上出现低蛋白血症、浮肿等，此结果与杨清萍10报道一致. 检测尿中 Cys C，Alb 和 2MG 都可以作为早期 DN的诊断指
15、标，但Cys C较 Alb及 2MG 更敏感，同时由于它的代谢特点，表明它是一个可靠指标，且检测方法简便，价格便宜，具有良好的灵敏度，值得临床推广. 【参考文献】 1 孙相国，刘成军. 血清 Cystatin C对早期肾小球滤过功能受损的诊断价值J. 河北医学，2003；25（2）：77-78. Sun XG, Liu CJ. Diagnostic value of serum cystatin C in the early injure of glomerular filtration functionJ. Hebei Med, 2003;25(2):77-78. 2 Poge U, Sto
16、schus B, Stoffelwagner B, et al. Cystatin C as an endogenous marker of glomerular filtration rate in renal transplant patientsJ. Kidney Blood Press Res, 2003;26(1):55-60. 3 陈伟，邓光贵，李天星，等. 糖尿病肾病早期诊断指标的探讨J. 第三军医大学学报，1998；20：277. Chen W, Deng GG, Li TX, et al. To investigate the diagnostic index of the
17、early diabetic nephropathyJ. Acta Acad Med Mil Tert, 1998;20:277. 4 袁园，叶书来，王丹青，等. 尿微量白蛋白在诊断早期糖尿病肾病中的意义J. 安徽医学，2000；21(5)：10-12. Yuan Y, Ye SL, Wang DT, et al. The significance of urinary albumin in diagnosing early diabetic nephropathyJ. Anhui Med, 2000;21(5):10-12. 5 叶任高，沈清瑞. 肾脏病诊断与治疗学M. 北京：人民卫生出版社
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19、for early renal impairmentJ. Am J Kidney Dis，2000；36(1):29-34. 8 Mojiminiyi OA，Abdella N. Evaluation of Cystatin C and beta2 microglobulins as markers of renal function in patients with type 2 diabetes mellitusJ. Diabetes Compl，2003；17（3）：160-168. 9 Grubb A. Diagnostic value of analysis of cystatin C and protein Hc in biological fluidJ. Clin Nephrol, 1992；38(8):20-26. 10 杨清萍. 糖尿病患者微量蛋白的联合测定J. 上海医学检验杂志, 2000；4（15）：212-214.
