1、血清肿瘤坏死因子 和表皮生长因子与肺癌的关系【摘要】 目的 探讨血清肿瘤坏死因子 （TNF ）和表皮生长因子（EGF）与肺癌关系，为肺癌诊断、病情判断提供实验依据。方法 采用放射免疫法检测 46 例肺癌、35 例肺良性疾病和 32 例健康体检者血清 TNF 和 EGF 水平。结果 肺癌病人血清 TNF 和 EGF 水平显著高于肺良性疾病组和健康对照组（F=175.41、106.05，q=16.1423.34，P0.01)，而肺良性疾病组与健康对照组差异无显著性 (q=2.53、2.52，P0.05)。肺癌转移者比未转移者血清 TNF 和 EGF 水平更高(t=6.43、9.70,P0.01),
2、肺癌化疗后血清 TNF 和 EGF 水平明显下降(t=5.39、3.02,P0.05)。结论 血清 TNF 和 EGF 水平可作为肺癌诊断、病情估计、疗效判断的指标之一。 【关键词】 肺肿瘤 肿瘤坏死因子 表皮生长因子 血清 放射免疫测定 ABSTRACTObjectiveTo observe the serum tumor necrosis factor (TNF) and epidermal growth factor (EGF) in patients with lung cancer, to provide a supplementary diagnostic tool for the
3、 disease.MethodsRadioimmunoassay was used to examine the serum TNF and EGF in patients with lung cancer (n=46), benign lung disease (n=35) and healthy adults (n=32).ResultsThe average levels of TNF and EGF in patients with lung cancer were significantly higher than those with benign lung disease and
4、 healthy adults (F=175.41，106.05;q=16.14-23.34;P0.01), furthermore, the average levels of TNF and EGF of cancer patients with metastasis were significantly higher than that without metastasis (t=6.43,9.70;P0.01). Serum TNF and EGF in the cancer patients were decreased significantly after chemotherap
5、y (t=5.39,3.02;P0.05).ConclusionSerum TNF and EGF can be regarded as an indicator for the diagnosis, estimation of lung cancer, and judgment of its prognosis. KEY WORDSlung neoplasms; tumor necrosis factoralpha; epidermal growth factor; serum; radioimmunoassay 近年来研究发现，肿瘤坏死因子 （TNF ）和表皮生长因子(EGF) 在肿瘤的发
6、生发展中均起着重要的作用。为了进一步探讨TNF 和 EGF 与肺癌的关系,本研究采用放射免疫法检测了 46 例肺癌、35 例肺良性疾病病人和 32 例正常健康体检者血清 TNF 和 EGF 水平。 1 对象与方法 1.1 对象及分组 肺癌病人组（C 组）46 例,男 30 例,女 16 例,年龄 3778 岁,平均54 岁,系我院住院病人，均经细胞学或组织学明确诊断。其中非小细胞肺癌 27 例, 小细胞肺癌 19 例。按 TNM 分期 : T13N0M0 18 例,T13N1M0 9 例, T23N2M0 10 例,T34N2M1 9 例。肺良性疾病病人组（B 组）35 例，男 23 例,女
7、12 例，平均年龄 51 岁。对照组（A 组）健康体检者 32 例，男 19 例,女 13 例,平均年龄 46 岁。3 组年龄、性别差异无显著性。 1.2 检测方法 采集清晨空腹静脉血 3 mL，分离血清，然后置于-20 冰箱中待测。血清 TNF 和 EGF 测定采用放射免疫法。试剂盒由北京北方生物技术研究所提供,操作按说明书进行。TNF 或 EGF 测定程序：配制TNF 或 EGF 标准液及 125ITNF 或 125IEGF 液，各管加 100 mL 抗 TNF 或 EGF 血清，样品管加血清 100 L，标准管加 100 L TNF 或 EGF 标准液，最后用磷酸盐缓冲液使总反应体积补足
8、到 400 mL，混匀，4 条件下放置 10 min，离心（3 500 r/min,10 ）10 min，弃上清液，测定沉淀物的每分钟计数次数，根据同批测定管的TNF 或 EGF 竞争抑制曲线，求得每升血清中 TNF 或 EGF 的含量（g） 。 1.3 统计学分析 测定结果以s 表示，各组间 TNF 和 EGF 比较采用 F 检验，化疗前后 TNF 或 EGF 测定结果比较采用配对 t 检验。 2 结 果 2.1 各组病人血清 TNF 和 EGF 水平比较 肺癌病人血清 TNF 和 EGF 水平显著高于肺良性疾病组和健康对照组（F=175.41、106.05，q=16.14 23.34，P0
9、.01)，而肺良性疾病组与健康对照组比较，差异无显著意义(q=2.53、2.52，P0.05)。见表 1。 表 1 各组病人血清 TNF 和 EGF 水平比较 2.2 不同 TNM 分期肺癌病人血清 TNF 和 EGF 比较 本文 46 例肺癌病人中,未发生转移者 18 例,发生转移(局部淋巴结或远处转移)者 28 例。未发生转移者和发生转移者血清 TNF 和 EGF 水平分别为（1.680.35） 、 （2.580.51） g/L 和（1.800.32） 、（2.550.47）g/L，肺癌转移者均显著高于未转移者(t=6.43、9.70,P0.01)。 2.3 化疗前后肺癌病人血清 TNF
10、和 EGF 变化 本文 46 例肺癌病人中,有 34 例进行了化疗。主要化疗药物有环磷酰胺、表阿霉素、卡铂、足叶乙甙等。分别于化疗前 3 d 和化疗后 3 d 天采集静脉血 1 mL 送检。化疗前后肺癌病人血清 TNF 和 EGF 水平分别为（2.330.41） 、 （1.110.12）g/L 和（1.980.39)、(1.030.95）g/L，化疗后血清 TNF 和 EGF 含量显著低于化疗前(t=5.39、3.02,P0.05)。 3 讨 论 TNF 是一种多肽激素,它是由巨噬细胞和单核细胞分泌的一种重要细胞因子,是参与多种生理和免疫过程的重要递质，是迄今发现抗肿瘤作用最强的细胞因子,体内
11、和体外实验均发现有明显的抗肿瘤作用1,2。本研究显示，肺癌病人血清 TNF 水平显著高于肺良性疾病病人和正常人,提示 TNF 与肺癌发生密切相关。肺癌伴远处转移者血清 TNF 也显著升高, 提示 EGF 可能与肺癌转移有关。有文献报道, TNF 具有双重的生物学作用3。一方面是机体重要的免疫防护递质,另一方面可参与机体的免疫病理损伤,在一些免疫性疾病和肿瘤的发生发展中起重要作用。在正常情况下, TNF 具有抗感染、抗肿瘤等重要作用,对机体有利,但如果持续释放或释放过多或与其他细胞因子关系失调,又会引起机体的一系列病理生理变化,并参与一些疾病的发病机制。本研究显示，肺癌转移病人，病灶转移愈远，T
12、NF 表达愈高,肺癌病情愈重,预后较差，提示TNF 在肿瘤转移中起到一定作用。 EGF 是由 53 个氨基酸组成的单键多肽,与其相应受体 EGF 受体（EGFR ）结合对各种组织来源的上皮细胞有强烈的促进增殖和分化作用,是一种促细胞分裂剂,它可刺激上皮细胞生长与分裂，并影响各种组织和角质细胞以及成纤维细胞的生长和分化4,5。近年来发现,EGF 与癌的关系十分密切。体外细胞培养结果表明，EGF 能诱导细胞转化,克服接触抑制,具有肿瘤激活性6。癌细胞内还存在生长因子的自分泌系统,即癌细胞本身能够产生生长因子刺激自身的生长。有人证实了肺癌、喉癌、直肠癌癌细胞中存在 EGF 的自分泌机制79。很多癌基
13、因产物是 EGF或其受体的类似物。业已证明，人类多种肿瘤组织存在 EGF、EGFR 的过度表达现象10,11；EGFR 主要在肺癌及癌旁组织表达, EGF 可与之结合,形成自 旁分泌增殖环,促进肿瘤生长12。本研究结果显示,与TNF 结果相同，肺癌病人血清 EGF 水平显著高于肺良性疾病组和正常人；且肺癌伴远处转移者 EGF 升高明显；化疗后肺癌病人血清 EGF 水平较化疗前明显下降。推测化疗过程中抗癌药物杀死破坏了肿瘤细胞,阻断了癌细胞 EGF 自分泌机制。说明检测血清 EGF 对判断肺癌化疗效果有一定指导意义。 综上所述,血清 TNF 和 EGF 水平检测可以作为肺癌诊断、估计病情、判断化
14、疗效果的一种生物学指标。 【参考文献】 1BERTANI T, ABBATE M A, ZOJAC X, et al. Tumor necrosis factor induces glomerular damage in the rabbitJ. Am Pathol, 1989,134(2):419430. 2董国荣,王曾礼. 肿瘤坏死因子与临床J. 国外医学：内科学分册, 1991,18(4):146148. 3何龙,曹雪涛. 细胞因子自分泌及其生理和病理意义J. 上海免疫学杂志, 1994,14(3):18411845. 4NICHOLSON R I, GEE J M, HARPER M
15、E, et al. EGFR and cancer prognosisJ. Eur J of Cancer, 2001,37:915. 5HUANG S M, LI J, ARMSTRONG E A, et al. Modulation of radiation response and tumor induced angiogenesis following EGFR inhibition by ZD1839 (Iressa)J. Cancer Res, 2002,62:43004306. 6LARS D. Expression of the epidermal growth factor
16、receptor in human small cell lung cancer cell linesJ. Cancer Res, 1992,52:3089. 7刘杜姣,李焕章,王毓敏,等. 肺癌病人 EGF 自分泌机制的临床意义J. 中国肿瘤临床与康复, 1997,4(3):89. 8刘光明,姜若兰. 结直肠癌病人手术前后血、尿和唾液中表皮生长因子的含量的变化J. 中华实验外科杂志, 1996,13(1):2324. 9CHRISTENSEN M E, THERKILDSEN M H, POULSEN S S, et al. Transforming growth factor alpha
17、and epidermal growth factor in laryngeal carcinomas demonstrated by immunohistochemistryJ. Acta Otolaryn Gol (Stockh), 1993,113(4):563567. 10LEMOINE N R, HUGHES C M, GULLICK W J, et al. Abnormalities of the EGF receptor system in human thyroid neoplasiaJ. Int J Cancer, 1991,49(4):558561. 11孙迪文，项锋钢，梁超群. 肺癌 VEGF 和 MMP2 的表达与临床病理特征的关系J. 青岛大学医学院学报， 2004,40(1):4446. 12FRANKLIN W A, VEVE R, HIRSCH F R, et al. Epidermal growth factor receptor family in lung cancer and premalignancyJ. Semin Oncol, 2002,29:314.
