1、腰宝袋内装药物对动物镇痛、抗炎效应与急性毒性试验作者：史恒军，徐英槐，侯颖，刘珂欣，王迎进，王冰水 【关键词】 中医中药 【Abstract】 AIM: To observe the analgesia and antiinflammation effects of the herbs in Yaobao bag and to detect their skin irritation allergic reaction and cytotoxicity. METHODS: The effects of the herbs in Yaobao bag on the value of rabbit
2、s pain threshold and the times of body movement were detected by heat board method and body movement method respectively and those on the inflammatory reaction resulting from Dimethylbenzene was detected by rats swelling ears method. The allergic reaction was observed after applying the herbs on the
3、 skin of Guinea pigs and the cytotoxicity was observed in rabbits. RESULTS: Herbs in the Yaobao bag improved the animals pain threshold value and significantly decreased times of their body movement (P0.01), but the overall effects were not as good as those in the group with Analgin administered thr
4、ough intubation feeding (P0.01). Against inflammation resulting from Dimethylbenzene, the herbs in Yaobao bag had better effects than those in the contrast group using dexamethasone (P0.01). No skin irritation, allergy and cytotoxicity were observed. CONCLUSION: Herbs in Yaobao bag have potent analg
5、esic and antiinflammatory effects with no skin irritation, allergy,constitutional and cytotoxicity. 【Keywords】 Chinese traditional medicine; analgesic; antiinflammatory effects; cytotoxicity 【摘要】 目的： 仿皮肤给药途径观察腰宝袋内装药物的镇痛、抗炎作用；检测其皮肤刺激、过敏、急性毒性. 方法： 分别用热板法、扭体法检测腰宝袋内装药物对小鼠的痛阈值和扭体次数的影响；小鼠耳肿胀法检测其对抗二甲苯致小鼠耳的
6、炎症反应；检测药物外用于杂种豚鼠后有无过敏反应；外用于家兔后组织器官有无毒性反应及皮肤刺激. 结果： 腰宝袋内装药物显著提高受试动物的痛阈值（P0.01） ，降低扭体次数（P0.01） ，但不及灌胃给药的安乃近组；能对抗二甲苯致炎反应优于对照的地塞米松组（P0.01）. 局部外用无皮肤刺激、过敏与急性毒性反应. 结论： 腰宝袋内装药物皮肤外用具有较强的镇痛、抗炎作用，无皮肤刺激、过敏和急性毒性反应. 【关键词】 中医中药；镇痛；抗炎；急性毒性 0 引言 腰宝袋又名弥伤蠲浊强腰袋，是以弥伤蠲浊、强腰益肾为主要功效的保健性治疗药袋.该产品于 1992年底通过了陕西省医药管理局组织的专家鉴定，199
7、3 年获得批号：陕西械准字第 36096号，后由我校康复医疗用品厂生产.临床治疗腰痛证疗效满意. 本课题旨在仿腰宝袋给药方法，探索其内装药物的药效学机制，检测其急性毒性. 1 材料和方法 1.1 材料药效试验动物：昆明种小白鼠 108只，由陕西省药品检验所动物室提供；药物由第四军医大学康复医疗用品厂提供，准确称取腰宝袋内装药物粗粉 100 g，加水 1000 mL，煎煮 30 min后制成 100 gL-1的药液待用.毒理试验药物：第四军医大学康复医疗用品厂提供，准确称取腰宝袋内装药物粗粉 100 g，加等量的医用凡士林研磨混合待用. 动物：杂种豚鼠 30只，雌雄各半，体质量（27030） g
8、，由第四军医大学实验动物中心提供；健康家兔 8只，雌雄各半，体质量（2.20.2） g(陕西省药品检验所动物实验室提供）. 1.2 方法 1.2.1 镇痛实验 热板法1昆明种小白鼠 36只，雌性，体质量(202) g. 将小白鼠置于（55.00.5)的玻璃热板上，以小白鼠第一次舔后足为痛反应指标，选用反应潜伏期不超过 30 s的 36只小白鼠，随机分为：腰宝给药组、阴性对照（自来水）组、阳性对照（安乃近）组. 于直径约 18 cm、高度 15 cm的塑料盒中放入 100 gL-1腰宝药液约 200 mL（液面高度约 1 cm） ，将给药组小白鼠浸泡于药液中，2次d-1，每次 30 min，3
9、d . 阴性对照组以同样方法浸泡于自来水中. 阳性对照组于末次浸泡时给予安乃近灌胃 37.5 mgkg-1，末次浸泡完毕后 30 min测定给药后痛反应阈值. 扭体法1昆明种小白鼠 36只，雌雄各半，体质量（202） g. 随机分为腰宝给药组、阴性对照（自来水对照）组、阳性对照（安乃近 37.5 mgkg-1， ig）组，给药方法同热板法，末次浸泡完毕后 30 min，以腹部内凹，躯体与后腿伸张，臀部高起等为指标，各组小鼠分别腹腔注射 6 gL-1 醋酸 1 mL g-1体质量，立即观察 15 min内各组小鼠的扭动次数. 1.2.2 抗炎实验小鼠耳肿胀法1 ，昆明种小白鼠 36只，雌雄各半，
10、体质量（202） g，随机分为给药组、阴性对照（自来水）组、阳性对照（地塞米松 40 mgkg-1， ig）组，给药方法同热板法.末次给药后 30 min将二甲苯 0.05 mL，均匀滴于小白鼠右耳、左耳作对照，于30 min后，将小白鼠颈椎脱臼处死.沿耳基线剪下两耳，用直径 6 mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片称质量，求左、右耳质量差. 1.2.3 毒理实验 皮肤过敏试验杂种豚鼠 30只，雌雄各半，体质量（27030） g，随机分为腰宝给药组，凡士林组及阳性对照组（10 gL-1, 2，4 二硝基氯代苯）. 给药前 24 h，将豚鼠背部两侧毛脱掉，去毛范围 3 cm3 cm.将准
11、备好的药膏涂抹于给药组豚鼠左侧脱毛区 0.2 g/只，凡士林对照组给予凡士林 0.2 g/只，阳性对照组给予 10 gL-1, 2，4 二硝基氯代苯 0.2 mL，保留 6 h，实验 7 d和 14 d，以同样方法重复致敏. 末次给受试物致敏后 14 d，受试药物涂抹于豚鼠右侧脱毛区 0.2 g/只，凡士林对照组给于凡士林 0.2 g，阳性对照组给予 1 gL-1, 2，4 硝基氯代苯 0.2 mL，6 h后以温水洗去受试物，即观察豚鼠脱毛区反应情况，然后于 24, 48和 72 h再次观察. 皮肤急性毒性试验健康家兔 4只，雌雄各半，体质量（2.20.2） kg，于给药前 24 h，将动物背
12、部脊柱两侧毛脱掉，去毛范围每侧约 8 cm9 cm，并在右侧近尾端用注射器针尖划破皮肤约 2 cm，造成皮肤破损区，破损程度以角质层损害而表皮不出血为度.将备好药膏涂抹于家兔右侧脱毛区 3 g，左侧给予等量医用凡士林作为赋形剂对照，用兔固定架固定56 h，1 次d-1， 7 d. 停药后温水洗去残留受试物，再每日观察，连续 7 d. 皮肤刺激试验健康家兔 4只，雌雄各半，体质量（2.20.2） kg，于给药前将动物背部脊柱两侧毛脱掉，去毛范围每侧7 cm7cm，并在右侧近尾端用注射器尖划破皮肤约 2 cm，造成破损皮肤区，破损程度以角质层损害而表皮不出血为度 . 将备好药膏涂于右侧脱毛区 3
13、g/只，左侧给予等量医用凡士林作为赋形剂对照，用兔固定架固定 56 h，1 次d-1，7 d . 停药后温水洗去残留受试物，于 1, 24, 48和 72 h观察涂抹部位. 统计学处理：检测所得数据用 xs表示，采用 SPLM软件中的非参数秩和检验. 2 结果 2.1 镇痛作用实验组腰宝给药后痛阈值明显增加，与阴性对照组比较，有显著性差异（P0.01） ，但不及灌胃给药的安乃近组；腰宝给药组动物扭动次数比阴性对照组明显减少（P0.01） ，但不及安乃近组（Tab 1）.反映腰宝袋皮肤外用对机体有较强的镇痛作用. 表 1腰宝对小白鼠痛阈值和扭体的影响（略） Tab 1Effects of ana
14、lgesis and twist body by the drugs in rats（略） 2.2 影响小白鼠耳二甲苯致炎腰宝袋皮肤外用有较好的抗炎作用. 腰宝组肿胀度（3.81.8)分别低于阴性对照组， （8.32.4, P0.01)和地塞米松组（4.61.9, P0.05）. 2.3 急性毒性试验 皮肤过敏试验腰宝给药组与凡士林对照组均未出现红斑及水肿，唯阳性对照组 10只豚鼠出现轻度红斑和结痂，致敏反应积分及致敏率均为零. 皮肤急性毒性试验家兔体质量、皮肤、毛发正常，眼睛和粘膜未见变化，呼吸、循环、中枢神经系统、四肢活动等未见异常，皮肤破损区未发生红肿、溃烂等. 皮肤刺激试验 4只家兔给
15、药及对照区均未见充血、水肿、红斑等，皮肤破损区未发生红肿溃烂等，刺激反应和刺激强度积分均为零. 3 讨论 考圣济总录腰痛门中有治腰痛专方的经验，如：人参汤方治五种腰痛；寄生汤方治腰痛；泽泻汤方治腰痛；桂心丸方治腰痛；杜仲酒方治多年腰痛；干漆散方治腰痛2等 . 这为我们跳出辨证论治巢穴，研制治腰痛专方，提供了理性依据 . 现代也有不少中药外用治疗腰痛的报道 . 如：艾箱熏疗法治腰痛3 ，脉冲调节器与中药液结合制成的产品治腰痛4 ，中药膏外敷治疗骨质增生腰痛5 ，金腰带治疗腰痛6 等 . 这为我们研制腰宝袋的用药形式提供了借鉴 . 腰宝袋内装药物，由玉竹、三七、艾叶、延胡索、石菖蒲、伸筋草、木瓜、
16、独活、原蚕砂、松香、自然酮、制马钱子、樟脑和冰片等 14味药按一定比例组成. 主药玉竹性平量大，体现了弥伤蠲浊、强腰益肾治则. 我们根据陈氏方法1 ，参照文献4设计了镇痛、抗炎试验，参照腰宝袋的用药途径设计了皮肤刺激、皮肤过敏和皮肤急性毒性试验. 结果表明，腰宝内装药物外用可提高受试动物痛阈值，降低扭体次数，反应本药有较强的镇痛、抗炎作用，皮肤外用无刺激、过敏和毒性反应. 证明腰宝袋是一种安全、有效的腰痛外用药袋，为临床应用提供了一定的实验依据.尽管设计实验方法时，做到了尽量接近腰宝袋的用药方式，由于无标准对照品，阳性对照的安乃近和地塞米松采用了灌胃给药，有待今后进一步改进，再者腰宝袋终究属于
17、对症的保健性治疗品，临床应用应以对因治疗为原则. 【参考文献】 1 Chen Q. Zhongyao Yaoli Shinyan Fangfa M. Beijing: Renmin Weisheng Chubanshe (Peoples Medical Publishing House),1994;70:107-108. 2Song Zhao J. Shengji Zonglu M. 2nd ed. Beijing: Renmin Weisheng Chubanshe (Peoples Medical Publishing House), 1982:1481-1484. 3 Song NC.Treatment of 120 cases of Lumbago by STYJ model healthy and therapeutic instrument at home J. Modern Diag Treat, 2001;12(1):3. 4 Bian CF, Zhang DH, Wang JH. Chinese medicines used in anesthesiaJ. Zhonghua Yixue Wenzhai (Abst Chin Med), 1998;2(1):88-104.
