1、乙型肝炎病毒前 S2 抗原、核心抗体 IgM 与其五项指标联合检测的意义【摘要】 目的 探讨乙肝病毒前 S2抗原（PreS2Ag ） 、乙肝病毒核心抗体 IgM（HBcAbIgM ）与乙肝五项指标联合检测的临床意义。方法 采用 ELISA法对 618例标本进行乙肝五项指标和 PreS2Ag 及HBcAbIgM 检测。结果 乙肝五项指标中 HBeAg阳性率最低（3.56） ，HBsAg阳性率较高（8.25） ，HBcAb 阳性率最高（43.37） 。PreS2Ag的阳性率（6.63）高于 HBeAg而低于 HBsAg。在 HBsAg阳性组中，PreS2Ag 阳性率为 80.39，HBsAg 阴性
2、组中无 1例 PreS2Ag 阳性。PreS2Ag 在“大三阳”组中阳性率为 90.91%（10/11） ，在“小三阳”组中阳性率为 95.23%（20/21） ，在“双阳”组（HBsAg、HBcAb 阳性）中阳性率为 58.33%（7/12） 。HBcAbIgM 的阳性率较低（0.49） 。结论 PreS2Ag 比 HBeAg更敏感地反映了病毒的复制情况，PreS2Ag 、HBcAbIgM 与乙肝五项指标联合检测并利用 s/co值能更好地对 HBV感染者进行临床分析。 【关键词】 肝炎病毒,乙型;前 S2抗原;病毒核心蛋白质类;实验室技术和方法 ABSTRACTObjectiveTo eva
3、luate the clinical significance of combined detection of PreS2Ag, HBcAbIgM and “hepatitis B virus five markings” (HBVFMs).MethodsHBVFMs, PreS2Ag and HBcAbIgM were detected in 618 samples by ELISA.ResultsIn HBVFMs, the positive rate of HBeAg was the lowest (3.56%), HBsAg was higher (8.25%), and the h
4、ighest was HBcAb (43.37%). The positive PreS2Ag (6.63%) was higher than HBeAg (3.56%), but lower than HBsAg (8.25%). In HBsAgpositive group, the positive PreS2Ag was 80.39%, but, no PreS2Agpositive case was found in HBsAgnegative group. The positive PreS2Ag was 90.91% (10/11) in “big threepositive”
5、group, and 95.23% (20/21) in “small threepositive” group, and 58.33% (7/12) in HBsAg and HBcAb positive group. The positive HBcAbIgM was the lowest (0.49%).ConclusionPreS2Ag is more sensitive than HBeAg in reflecting the replication of viruses. Combined detection of PreS2Ag, HBcAbIgM with HBVFMs and
6、 applying the parameters of s/co can, clinically, better analyze HBV infection. KEY WORDSHepatitis B virus; PreS2Ag; Viral core proteins; Laboratory techniques and procedures 文献报道，乙型肝炎（乙肝）病毒前 S2抗原（PreS2Ag ）与乙肝DNA有很好的相关性，可以作为判断乙肝病毒复制的良好指标，乙肝病毒核心抗体 IgM（HBcAbIgM ）是已被公认的乙肝病毒新近感染或复制活动的金指标13。因此，若将 PreS2Ag
7、 、HBcAbIgM 与乙肝五项指标组成“乙肝七项指标”进行联合检测，可更好地了解乙肝病人免疫状态和病毒复制的活跃程度，特别对传统的乙肝五项“小三阳”模式、少见模式以及其他仅凭乙肝五项指标难以解释和判断的情况，都可以结合PreS2Ag 、HBcAbIgM 进行更为全面的解释。现报告如下。 1 资料与方法 1.1 标本来源 我院门诊体检者和就诊病人 618例，男 328例，女 290例，年龄1865 岁。 1.2 试剂和仪器 乙肝病毒血清学指标 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、 HBcAbIgM 的 ELISA试剂由上海荣盛科技有限公司提供；PreS2Ag 的ELIS
8、A试剂由北京大学人民医院肝病研究所提供。采用美国雷杜 RT 2100C酶标仪及 RT 2600C洗板机。 1.3 检测方法 仪器经过校正，整个过程严格进行室内质量控制。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、 HBcAbIgM 、PreS2Ag 测定根据试剂盒说明书进行，采用洗板机洗板、酶标仪比色。 2 结果 乙肝五项指标中 HBeAg阳性率最低（3.56） ，HBsAg 阳性率较高（8.25） ，HBcAb 阳性率最高（43.37） 。PreS2Ag 的阳性率（6.63）高于 HBeAg而低于 HBsAg。在 HBsAg阳性组中，PreS2Ag 阳性率为 80.39，在
9、HBsAg阴性组中无 1例 PreS2Ag 阳性者。PreS2Ag 在“大三阳”组中阳性率为 90.91%（10/11） ，在“小三阳”组中阳性率为 95.23%（20/21） ，在“双阳”组（HBsAg、HBcAb 阳性）中阳性率为 58.33%（7/12） 。HBcAbIgM 的阳性率较低（0.49） 。618 例被检测者有 269例为全阴性，349 例为 HBV阳性模式,HBcAbIgM 、PreS2Ag 在乙肝五项阳性模式中的分布情况见表 1。表 1 HBcAbIgM 、PreS2Ag 在乙肝五项阳性模式中的分布(略) 3 讨论 本文结果显示，传统的“五项指标”中 HBeAg阳性率最低
10、，HBsAg 阳性率较高，而 HBcAb的阳性率最高；PreS2Ag 的阳性率高于 HBeAg而低于 HBsAg。在 HBsAg阳性组中，PreS2Ag 的阳性率为 80.39，说明PreS2Ag 与 HBsAg有伴随关系，检测 PreS2Ag 同样有助于 HBV感染的诊断。而在 HBsAg阴性组中无 1例 PreS2Ag 阳性，可能扩大检测对象会有所发现。北京大学人民医院肝病研究所的研究认为，HBsAg 与PreS1Ag 都存在基因突变而导致 HBsAg与 PreS1Ag 检测的漏检，而PreS2Ag 则可作为 HBV感染的指标弥补 HBsAg与 PreS1Ag 检测的漏检造成的缺陷。本实验
11、中 HBeAg与 PreS2Ag 存在个别的交叉阴阳性反应，HBeAg阳性者有 1例 PreS2Ag 阴性，而 HBeAg弱阳性者 PreS2Ag 全部阴性，但总体看 PreS2Ag 检出率明显高于 HBeAg的检出率，所以二者不能互相代替。这可能是由于乙肝病毒前 C区 G1896A突变会产生 1个终止密码，从而阻止 HBeAg合成，因而在血清中检测不到，表现为 HBeAg阴性乙肝4,5。因此，提示以 HBeAg转阴作为疾病好转的指标有时并不准确，PreS2Ag 检测可以弥补 HBeAg/Ab 系统缺失造成的漏检6。作为病毒复制标志，PreS2Ag 优于 HBeAg，这与许多文献报道一致13。
12、本实验结果中 HBcAbIgM 的阳性率较低（0.49） ，可能的原因有：在该人群中新近感染率较低，HBsAg 阳性率为 8.25，有 35.4%的人产生了保护性抗体 HBsAb；许多 HBV新近感染者无自觉症状或症状不明显，忽视了及时就诊检测而不能早期发现；与 IgM类球蛋白在血清中存留周期较短有关。 乙肝五项结合 s/co值、PreS2Ag 、HBcAbIgM 进行临床分析具有重要价值。由于对一些少见（罕见）模式的解释一般持谨慎态度，许多人认为少见模式的出现，应从仪器、试剂、操作、标本采集等诸多方面查找原因。ELISA 方法学的灵敏度为 1 g/L，市场可供试剂多为一步法试剂，因此 ELI
13、SA的灵敏度和试剂的缺陷可能是少见模式出现的一个重要原因。PreS2Ag 、HBcAbIgM 试剂为 ELISA二步法，因此其结果即使出现弱阳性，也有较大的参考价值7,8。作者认为，将PreS2Ag 、HBcAbIgM 与乙肝五项指标进行联合检测，不仅可排除某些不合理的甚至错误的少见模式结果，而且也证明了某些少见模式的客观存在，并为其合理解释提供了有力佐证。本研究共出现 14例少见模式，约占 2.3%（14/618） ，对少见模式采用同一种试剂由一步法改为二步法重复试验，最后有 9例为少见模式，约占 1.5%（9/618） 。4 例 HBeAg单项阳性者（s/co 值分别为 1.071、2.0
14、27、2.681、7.328)，s/co 值较低，二步法重复试验仅 1例为阳性（s/co 值 7.328） ，其 HBcAbIgM 也为阳性（s/co 值 1.849） ，进一步表明有近期感染的迹象。 在乙肝五项的几种少见模式一般弱阳性多见，有的产生了保护性抗体，但一般是低水平的。许多虽然表现为阴性，但根据抗原抗体的 s/co值也可看出有低滴度抗原抗体产生的迹象。所以作者认为，采用 ELISA法对乙肝五项进行检验所出具的报告，不但要报告阴阳性结果，也应该同时报告抗原抗体的 s/co值，使有限的检验资源能够最大限度地转化为临床有价值的诊疗参考信息。需要强调的是，对于少见模式的检测结果，一定要进行
15、复检，最好重新采血后进行复检核对，可以结合 HBV DNA、肝功能及临床症状进行全面的动态分析；另一方面，由于 ELISA实验条件控制不佳引起本底值偏高时，不适合 s/co 值的临床分析。 从方法学角度看，采用 PCR技术检测 HBV DNA是理论上乙肝检测的“金标准” ，但其对实验要求如实验室布局、人员技术要求较高，临床应用并不理想。2000 年全国 HBV DNA PCR室间质评结果显示，在所有 91家实验室中，仅有 28家(30.8)测定结果全部正确9。2005 年山东省临床检验中心公布的全省 PCR室间质评的 45个实验室，24 个实验室PT80，不合格者高达 53.2（24/45）
16、。因而，把 HBV DNA作为常规检验项目还有很长的路要走。另一方面，ELISA 法被公认为诊断乙肝的准确特异的方法之一虽然有其缺点，但的确也偶有报道乙肝五项“大三阳”而 DNA阴性者，说明乙肝病毒感染相关指标都有各自的意义，并不能相互替代。PreS2Ag 、HBcAbIgM 与乙肝五项指标联合组成的“乙肝七项指标” ，采用技术上已经非常成熟的 ELISA法检测，成本低廉，并可以借助 s/co值对抗原抗体滴度进行综合分析，能够被广大的临床实验室和病人接受，应该能有更好的发展前景。但各实验室应搞好室内质控和室间质评，试剂厂商要不断提高试剂质量以满足临床需要9，10。 【参考文献】 1乐爱平,万腊
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