1、滤白红细胞与洗涤红细胞相关指标比较 【关键词】 白细胞 红细胞 输血治疗是临床治疗主要手段之一，有时是不可替代的手段，便输血不良反应影响响应床救治效果的主要因素之一。目前已知非溶血性发热反热(FNHTR)、包括血小板输注无效在内的同种免疫、输血相关急性肺损伤(TA-ALI)、输血相关移植物抗宿主病(TA-GVHD)的发生与输人白细胞的方法有离心法去白膜法、洗涤法和白细胞滤器过滤法等，本文旨在观察滤自细胞红细胞和洗涤红细胞相关指标，为两种血液成分的临床应用提供参考。 材料与方法 1 材料与设备 一次性四联白细胞滤除采血袋为山东威高集团医用高分子制品股分有限公司产品，批号 200607234：一次
2、性五联 MAP 洗涤采血袋为长春泰尔茂医疗器具有限公司产品，批号 20051019z；白细胞过滤温控设备为山东威高集团医用高分子制品股分有限公司产品；GZR-A 型自动高频热合机为苏州市医用仪器厂产品；CP80MX 型大容量低温离心机为日立集团产品；LDZ5-2 型离心机为北京医用离心机厂产品；Thermo 全波长酶标仪为上海热电科技仪器有限公司产品；sysmex 血细胞计数仪为日本东亚公司产品等。 2 试剂 0.2邻甲笨胺试剂为上海新亭化工试剂厂产品，批号20030401；1过气化氢溶液为上海埃彼化学试剂有限公司产品，批号F20050228；2冰乙酸溶液为上海埃彼化学试剂有限公司产品，批号
3、F20060210，血红蛋白标准液厦门市绿浪医疗器械有限公司产品，批号YZB0705-2005。 3 滤白红细胞的制备 a.先将低温操作柜控制在 26，关闭过滤器下端与旁侧的管道夹，将血袋倒挂在白细胞过滤温控设备的挂钩上，打开采血袋下端的折通管和过滤器下端的管道夹，使血液靠自身重力，缓慢通过自细胞过滤器，流入血液转移袋，大约 1020 分钟。b关闭白细胞过滤器下端的管道夹，开启滤器旁侧的管道排气夹，轻轻挤压血液转移袋，将气体排人采血袋，关排气夹，开管道夹，用气体冲净滤器中残留血液。 c.3200 转分离心去除血小板和血浆，向剩余物中加入红细胞添加剂CPDA-1，即为滤白红细胞。抽取制备好的滤白
4、红细胞 60 份，分别留取滤白前后的血液 5ml 左右，用血细胞计数仪对其计数，并把滤白后血液以2000 转分离心 10 分钟，分离上清 1ml30冰冻备用。 4 洗涤红细胞的制备 a.取联袋采集经离心后全血母袋置于分浆夹内，折断母袋上的易折件，将血浆分至空转移袋中，并一同去除白膜(变可分次去除)，分浆毕将空转移袋中洗涤液全部加入母袋中并充分混匀，分别用塑料夹片将袋上导管夹好。b将混匀后的细胞洗涤袋进行离心。c离心毕，取出红细胞母袋及血浆的袋置于分浆夹内，打开袋上夹子，将血浆分至袋(视血浆清亮程度可于本次或后两次中热合去除血浆，操作时只是在袋中转移)中，分毕用夹子夹好，再打开红细胞母袋上夹子，
5、将上清液分至袋中，分毕用夹子夹好，将袋中洗涤液220g230g 加入母袋中并充分混匀，用夹片夹好导管。d将混匀后的红细胞洗涤联袋进行离心。e离心毕，取出红细胞母袋置于分浆夹内，打开红细胞母袋上夹子，将上清液分至袋或袋(预先将袋中洗涤液倒入袋中)中，分毕用夹子夹好，将或袋中洗涤液 220g230g 加入母袋中并充分混匀，用夹片夹好导管。f.重复 d、e。g最后向洗涤三遍红细胞母袋中加入袋中的红细胞保存添加剂 100 克，热合封口装有红细胞的袋中，即为制备的 2 单位 MAP 洗涤红细胞。抽取制备好的 MAP 洗涤红细胞 60 份，分别留取洗涤前后的血液 5ml 左右，用血细胞计数仪对其计数，并把
6、洗涤后的血液以 2000 转分离心 10 分钟，分离上清1ml30冰冻备用。 5 游离血红蛋白的测定 取冰冻备用的滤白红细胞和洗涤红细胞上清在 37水浴箱融化，吸取 20l。于上述务管中加入 1.0m10.2邻甲笨胺溶液，再加入1.0ml1过氧化氢溶液，混匀放置 10 分钟，各管加入 10ml2冰乙酸溶液，于酶标仪设定波长为 430mm，进行比色并计算其浓度。 甲习笨胺法测定原理：血红蛋白具有过氧化酶作用，使过氧化氢分解产生新生态氧，氧化习笨胺为蓝色或绿色衍生物，根据颜色的深浅与已知浓度的血红蛋白进行比较，求得其含量。 6 统计学方法 白细胞清除率以百分比表示，计算公式白细胞清除率=1-(制备
7、后血液制品中的白细胞浓度制备前血液制品中的白细胞浓度)100，游离血红蛋白以均数标准差表示。两组间的白细胞清除率和红细胞回收率的比较采用 x2 检验，两组间的游离血红蛋白比较采用组间 t 检验。所有检验使用 JMTJFX简明统计分析 1031软件处理。 7 结果 7.1 滤白红细胞的白细胞清除率()和红细胞回收率()分别为99.992.7 和 92.653.2，洗涤红细胞的白细胞清除率()和红细胞回收率()分别为 87.365.12 和 84.544.29，两组间差别有显著意义(P0.01)。 7.2 滤白红细胞的洗涤红细胞游离血红蛋白的含量(mgL)为45.234.16 和 68.135.2
8、8，两组间差别有显著意义(P0.01)。 8 讨论 输血不良反应中最常见的是发热反应，在使用一次性采血袋前血液污染和外源性热原可能是其主要原因。而在现代临床输血中发现。有一种发热反应，不是由于血液污染或热原存在，也不是由于血型不合或患者对献血浆过敏等原因引起，而是与受血者反复输血或妊娠致使体内产生白细胞凝集素有关，这种凝信大多数献血者的自细胞。一旦产生了这种凝集素，再次输血时，就会出现发热反应，其程度与输入的白细胞数的受血者体内凝集素的效价有关。 要解决这一问题，最理想的办法是选择与朦胧客观存在血者白细胞配合的献血者，但由于大多数有白细胞凝素的患者其血清对大部分献血者的白细胞均有凝集现象，加之
9、白细胞的配型也较复杂，因此将全血中的白细胞大部分除去后再佃给患者，则是一种简单易行的方法。 目前，少白细胞的红细胞制品的在临床上的应用已引起重视，在国内外临床应用量逐年增加。洗涤红细胞是将浓缩红细胞用洗液洗涤三次或三次以上的红细胞制品。洗涤后的红细胞，自细胞去除率可达90左右，同时可除去血细胞代谢产物，血小板或白细胞形成都市的微聚物、红细胞表面的抗原等，从而避免因这些物质输人体内所引起的输血反应。 但我们在日常工作中观察到自从全面供应滤白红细胞成分血后，洗涤红细胞的使用量有明显下降趋势，滤白红细胞制品适应症大致与洗涤红细胞相同，但滤白红细胞操作简单易行，不需要复杂设备且保存期长于洗涤红细胞，有
10、文献报道，洗涤红细胞制品最长可以保存 20 天左右，而滤自红细胞制品则可以保存更长时间，且后工分离制备洗涤红细胞时，很多因素可以影响产品的质量，主要有以下三种，即：离心条件、操作技术、分离袋特殊构造，这些全都为洗涤红细胞的制备带来不便。另外，滤白红细胞的红细胞回收率和白细胞清除率均高于洗涤红细胞，游离血红蛋白含量较低，且同样可以达到降低由白细胞抗体引起的非溶血性发热性输血反应的目的，甚至效果更好。 也有资料显示，洗涤红细胞制品更适用于以下情况的输血：(1)自身免疫性溶血性疾病，如阵发性睡眠性血红蛋白尿患者，自身免疫性溶血性贫血患者。(2)免疫缺陷病人的输血。如 IgA 缺乏病人或已产生了IgA 抗体的病人，输注经过洗涤的红细胞，可以避免休克性输血反应的发生。(3)对新生儿溶血症的换血和输血，可以避免休克性输血反应的发生溶血，加重病情。(4)严重输血反应，用其它措施不能克服的病人，应输注洗涤红细胞。可见，在这些方面洗涤红细胞起着不可替代的作用。因此，只能说在一定临床范围内滤白红细胞要优于洗涤红细胞。 参 考 文 献 1徐开云.白细胞滤器A.王陪华，主编.输血技术学M.北京：人民卫生出版社，1998.
