1、慢性 HBV 感染者血清 HBV-DNA 含量与肝组织病理的相关性分析摘 要：目的 探讨慢性 HBV 感染者血清 HBV-DNA 含量与肝组织病理之间的关系。方法 分析比较 259 例慢性 HBV 感染者血清 HBV-DNA 含量与肝组织纤维化及炎症程度。结果 HBeAg 阳性的慢性 HBV 感染者肝脏病变程度与血清 HBV-DNA 定量水平并不相关（p0.05）,但 HBeAg 阴性患者则显著相关（p0.05） 。免疫组织化学染色显示 HBcAg 胞浆阳性者HBV-DNA 含量高。结论 血清 HBV-DNA 含量在一定程度上可反应出肝组织炎症及纤维化的程度，HBV-DNA 含量在 107 拷
2、贝数浆染色阳性率为 98%。这给乙肝患者，尤其是肝功能正常的慢性 HBV 感染者的抗病毒治疗提供了可靠的依据。关键词：HBV-DNA 含量；肝组织病理；慢性 HBV 感染者 乙型肝炎是由乙肝病毒引起的全球性传染病，2002 年全国乙型肝炎血清流行病学调查表明我国一般人群中 HBsAg 流行率为 9.09%，估计约 1.2亿人为慢性 HBV 感染 1。HBV 在肝组织内并不引起明显损害，机体免疫反应，特别是淋巴细胞在清除 HBV-DNA 时损伤肝细胞才出现炎症过程。因此血清中 HBV-DNA 含量与肝组织病变程度存在一定关系。为探讨这一问题，我们将昆明市传染病院 2007 年 1 月至 2010
3、 年 12 月进行肝活检病理检查的慢性 HBV 感染者血清 HBV-DNA 含量进行对比分析，现报告如下。1 对象和方法1.1 病例选择 2007 年 1 月至 2010 年 12 月来昆明市传染病院进行肝组织活检的慢性 HBV 感染者 259 例，其中男性 174 例，女性 85 例，年龄 1452 岁，平均 28 岁。慢性 HBV 感染的诊断标准参照 2005 年中华医学会肝病学分会和感染病学分会制定的慢性乙型肝炎防治指南的诊断标准2。肝组织组织病理根据 2000年西安肝病会议所定的病毒性肝炎防治方案3标准进行分级、分期，将肝炎病变依炎症活动度及纤维化程度分别分为 0-4 级和 0-4 期
4、3。1.2 检测方法 将 B 超引导下肝脏穿刺肝穿组织经 10%的甲醛固定，梯度酒精脱水，常规连续切片，HE 染色、Mosson 染色、网织染色，HBsAg、HBcAg 免疫组织化学染色，Mosson 染液及免疫组化试剂由福建迈新公司提供。切片光学显微镜多视野观察。血清 HBV DNA 含量，采用荧光定量 PCR 法，仪器及试剂均来自深圳中山达安生物工程公司。1.3 统计学分析 血清 HBV-DNA 定量结果（取对数值）与肝脏病变的关系比较采用单因素方差分析进行统计学处理，P0.05 为差异有显著性意义。2 结果2.1 259 例 CHB 肝组织炎症活动度、纤维化程度情况见表 1表 1 259
5、 例 CHB 肝组织炎症活动度、纤维化程度情况（例%）2.2 血清 HBV-DNA 含量与肝组织炎症活动度、纤维化程度的关系 见表 2表 2 HBV-DNA 含量与肝组织炎症活动度、纤维化程度的关系（例%）2.3 HbcAg 阳性/阴性与肝组织炎症活动度、纤维化程度的关系 见表 32.4表 3 HBcAg 阳性/阴性与肝组织炎症活动度、纤维化程度的关系（例%）2.5 血清 HBV-DNA 含量水平与肝组织学病变的关系 见表 42.6 表 4 血清 HBV-DNA 含量水平与肝组织学病变的比较注：HBeAg 阳性组肝脏病变程度与血清 HBV-DNA 水平并无显著性差异（P0.05）,但 HBeA
6、g 阴性组肝脏病变程度与血清 HBV-DNA 水平有显著性差异（P0.05） 讨论我国属于感染高流行区，由于大多数感染者往往无任何临床症状，定期检查肝功能也正常，以往认为这些肝功能始终正常的慢性感染者一般不需要接受抗病毒治疗，只是给予一般的保肝治疗和门诊随访。随着医学知识的不断更新，目前认为对于正常的慢性感染者，如果肝组织学炎症分级，也因考虑抗病毒治疗。揭示了肝组织病理检查的重要地位。肝穿刺活检病理检查是判断患者肝脏损害的金标准4，这也是国内外学者们公认的准则，但肝穿刺活检为有创性操作，患者不宜接受，因而临床实践中并不是普遍开展。故近年来国内外学者们都在力求寻找肝损害的无创性评估指标。过去认为
7、 HBeAg 阳性、HBV-DNA 是 HBV 复制的标志5,近年来研究表明，HBeAg 阳性与阴性 CHB 患者在机体免疫、HBV 致病力、肝脏损害等方面存在较大差异，认为血清 HBV-DNA 定量水平与肝脏损害有关6-7。本研究结果显示，血清 HBeAg 阳性的慢性 HBV 感染者肝脏病变程度与血清 HBV-DNA 定量水平不相关（P0.05）,但 HBeAg 阴性患者则显著相关，血清HBV-DNA 定量水平越高，肝脏病理损害越重（P0.05） 。提示血清HBV-DNA 定量水平可作为 HBeAg 阴性慢性 HBV 感染者肝损害的预测指标。HBV 进入肝细胞内后，机体免疫功能在清除 HBV
8、 的过程中损伤肝细胞，导致肝细胞病变而引起一系列的临床症状。机体免疫功能正常时，对进入肝细胞的 HBV 作出反应，并将其清除，但肝细胞受损害。HBV DNA 含量越高，肝细胞损害则越重，受损肝细胞的修复反应及细胞外基质的过度沉积就出现了纤维化。本文中 259 例结果中显示，HBV DNA 含量与肝组织的炎症程度呈显著正相关，与纤维化程度 S1 与 S2 之间无显著差异，与 S3 至 S4 之间有显著差异。HBcAg（核心抗原） ，由于循环内 HBcAg 外面包裹有 HBsAg，以及少量游离的 HBcAg 可转化为 HBeAg 或被抗 HBc 结合形成免疫复合物，因此血清中一般测不出 HBcAg
9、，只能肝细胞核和 Dane颗粒中才能提取才能测出。HBcAg 阳性，提示有传染性【8】 。对于 HBcAg的临床研究目前还不多，本文较为浅显的探讨 HBcAg 与肝组织炎症、纤维化程度的关系。发现 HBcAg 染色阳性的肝细胞核多少与 HBV DNA 含量无明显相关性。肝穿刺活检病理检查能提供肝细胞炎症活动度、纤维化程度最直观的形态学资料，根据肝脏病理损伤程度选择合理的抗病毒治疗方案，可使更多的患者受益，如无禁忌症应尽量开展。参考文献1 庄辉.我国乙型肝炎病毒感染与挑战J.中华传染病杂志，2005,23 sup:2-b.2 中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南J.传染病信息，2005， （增刊）：1-12.3 中华医学会传染病与寄生虫病学分会，中华医学会肝病学分会.病毒性肝炎防治方案J.中华肝脏病杂志，2000,8（6）：324-329.4 骆抗先。乙型肝炎临床与活体组织病理M.北京：科学出版社，2001:3.5 彭文伟，李兰娟，乔光彦.传染病学M.北京：人民卫生出版社，2004:6,41.6 何德华等 肝胆病理学M.第 1 版.北京：第二军医大学出版社，1997 年 12 月:181
