1、CPPS 病人血清与前列腺按摩液 CuZnSOD 和 MDA 检测及意义作者：艾晓波 侯四川 刘忠强 王沛涛 于素清 冯元法 仲伟明 【摘要】 目的 通过对慢性骨盆疼痛综合征(CPPS)病人和健康男性的血清和前列腺按摩液(EPS)中铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD) 活力、丙二醛(MDA)含量测定，探讨其在 CPPS 诊断、治疗中的意义。方法 将门诊确诊的 40 例 CPPS 病人分为炎性组和非炎性组，以 20 例健康男性为对照组，采用黄嘌呤氧化酶法测定 CuZnSOD 活力，硫代巴比妥酸(TBA)法测定 MDA 含量。结果 各组血清中 CuZnSOD 活力比较差异无显著性(P0.05)。炎
2、性组及非炎性组血清中 MDA 含量明显高于对照组(F=25.70，q=8.21、9.26，P0.01)，炎性组与非炎性组间比较差异无显著性(P0.05)。炎性组 EPS 中 CuZnSOD 活力明显低于非炎性组及对照组(F=34.78，q=9.30、10.93，P0.01);非炎性组与对照组间比较差异无显著性(P0.05)。炎性组 EPS 中 MDA 含量明显高于非炎性组及对照组(F=441.63，q=35.73、37.03，P0.01);非炎性组与对照组之间比较差异无显著性(P0.05)。结论炎性 CPPS 病人前列腺氧化应激水平高于健康男性，非炎性 CPPS 病人前列腺氧化应激水平与健康男
3、性无明显差别;血清及 EPS 中 CuZnSOD 、MDA 水平可作为 CPPS 诊断和判断疗效的有意义的辅助指标，SOD 制剂在 CPPS 的治疗中可能具有重要作用。 【关键词】 慢性骨盆疼痛综合征;铜锌超氧化物歧化酶;丙二醛 ABSTRACT Objective To determine the levels of CuZnSOD and MDA in serum and EPS in patients with chronic pelvic pain syndrome (CPPS) and explore their significance in the diagnosis and t
4、reatment of this condition. Methods Forty outpatients confirmed as having CPPS were divided into inflammatory group and noninflammatory group and 20 healthy served as the control. Xanthine Oxidase method was applied to determine the content of CuZnSOD and TBA method to determine the level of MDA.Res
5、ults The levels of CuZnSOD in serum among the three groups were not significantly different (P0.05). The serum levels of MDA in CPPS patients were significantly higher than that of the control (F=25.70;q=8.21,9.26;P0.01), but no significant difference was noted between the inflammatory and noninflam
6、matory group (P0.05). The vigour of CuZnSOD in the EPS of the inflammatory group was markedly lower than that in the noninflammatory group and the control (F=34.78;q=9.30,10.93;P0.01), but no significant difference was noted between the noninflammatory group and the control (P0.05). The MDA in EPS o
7、f the inflammatory group was dramatically higher than that in the noninflammatory and the control (F=441.63;q=35.73,37.03;P0.01), but no significant difference between the noninflammatory and the control (P0.05). Conclusion The oxidative stress of EPS patients with inflammatory CPPS is stronger than
8、 that of the healthy adults, while there is no significant difference of the oxidative stress between patients with the noninflammatory CPPS and the health young man. Measurements of the levels of CuZnSOD and MDA, both in serum and EPS, can serve as valuable parameters in the diagnosis and assessmen
9、t of the therapy of CPPS. KEY WORDS Chronic pelvic pain syndrome; CuZnsuper oxide dismutase; Malondialdehyde 慢性前列腺炎是成年男性男科门诊最常见的疾病之一。其诱因众多，病人个体差异性大，症状缺乏特异性，难于正确诊断与及时治疗，故其治疗效果一直不甚满意。慢性细菌性前列腺炎(CBP)的病因比较清楚，主要由细菌感染引起，治疗方案也较为明确。而慢性非细菌性前列腺炎即慢性骨盆疼痛综合征(CPPS)的病因目前研究较多，但尚无定论，治疗方案也不明确。近年来有研究结果表明，氧化应激反应异常是其病因之一
10、13。谢志光等4研究结果显示，CBP 病人前列腺按摩液(EPS)中铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD) 水平与炎症发生发展有关。但对 CPPS 病人血清和 EPS 中的 CuZnSOD 、丙二醛(MDA)水平与炎症关系研究尚未见报道，本研究通过对 CPPS 病人血清和 EPS 中 CuZnSOD 活力、MDA 含量进行测定，探讨其在 CPPS 发展、诊治中的意义。 1 对象与方法 1.1 研究对象 2008 年 811 月，在青岛大学医学院附属医院泌尿外科及男科门诊中选取符合 CPPS 诊断标准男性病人 40 例,年龄 2145 岁,平均年龄 27岁。据 1995 年美国国立卫生院(NIH)分
11、类方法5,6，分为炎性组和非炎性组，每组各 20 例病人。 同期选取 20 例健康男性为对照组,年龄 2545 岁,平均年龄 29 岁。无慢性前列腺炎的临床症状,EPS 镜检白细胞计数10/HP,EPS 细菌培养阴性。 3 组病人均排除泌尿生殖系其他疾病、糖尿病、高脂血症、慢性肝肾衰竭、严重的心脑血管疾病、消化系统疾病、血液系统疾病、传染性疾病、严重的神经精神性疾病或有心理症状者。病人无过敏史,无乙醇、药物滥用史等。2 周内无抗生素等药物治疗，并禁欲 25 d。各组间年龄比较差异无显著意义(P0.05)。 1.2 CPPS 诊断标准 有长期反复骨盆区域疼痛或不适，持续时间超过 3 个月，可伴有
12、不同程度的排尿症状和性功能障碍，严重影响生活质量;MearesStamey 四杯法细菌培养均阴性。 1.3 标本采集及处理 采用按摩法取 EPS,置于 EP 管内于-80 冰箱中保存。同时，取空腹静脉血 4 mL,分离血清后, 置于-80 冰箱中保存。上述标本均于 1 月内检测。检测时取出标本置室温下融解, 3 000 r/min 离心 10 min,后取上清液留待 CuZnSOD 和 MDA 测定。 1.4 CuZnSOD 和 MDA 检测方法 黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定 CuZnSOD 活力，硫代巴比妥酸(TBA)法测定 MDA 含量。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 1.5 统计学
13、分析 所有数据均以s 表示,实验结果采用 PPMS 1.57统计软件进行方差分析及 q 检验。 2 结 果 各组间血清中 CuZnSOD 活力比较差异无显著性(P0.05)。炎性组及非炎性组血清中 MDA 含量明显高于对照组(F=25.70，q=8.21、9.26，P0.01)，炎性组与非炎性组间相比较差异无显著意义(P0.05)。炎性组 EPS 中 CuZnSOD 的活力明显低于非炎性组及对照组(F=34.78，q=9.30、10.93，P0.01);非炎性组与对照组间比较差异无显著性(P0.05)。炎性组 EPS 中 MDA 的含量明显高于非炎性组及对照组(F=441.63，q=35.73
14、、37.03，P0.01);非炎性组与对照组之间比较差异无显著性(P0.05)。见表 1。 表 1 各组间血清及 EPS 中 CuZnSOD 、MDA 水平比较 3 讨 论 慢性前列腺炎是青年男性的多发病和常见病,而其中型前列腺炎约占慢性前列腺炎的 90%以上8。目前其发病机制尚未完全明了，诊治标准不一，治疗效果难以保证。近年来，病因研究中氧化应激学说成为一大热点。氧气对需氧细胞的生存是必需的,但它的代谢产物氧自由基(ROS)在清除体内致病异物的同时也对组织本身造成损伤。正常情况下机体内 ROS的产生、利用和清除处于动态平衡。前列腺炎病人体内可产生过多的ROS，损害细胞的功能，破坏细胞的内环境
15、，攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化反应,并因此形成脂质过氧化物,如 MDA 等毒性产物。局部 MDA 的含量在一定程度上与局部 ROS 的量呈正相关,因此 MDA 水平可间接反映组织受自由基损伤程度9。CuZnSOD 是人体内一种重要的抗氧化酶,它能清除体内过多的 ROS，从而保护机体免受 ROS 的损害。因此，测定 CuZnSOD 的活力即可间接了解 ROS 的相对含量。 在健康状况下人体中有一系列的机制确保只产生少量的自由基，所以只需要较少的 CuZnSOD 即可达到保护细胞和组织的目的。因此健康状态下，体液中 CuZnSOD 的含量并不高，本文结果也证实了这一点。 本文结果显
16、示，炎性组 EPS 中 CuZnSOD 的活力明显低于对照组(P0.01)，而炎性组 EPS 中 MDA 的含量明显高于对照组(P0.01)。提示炎性 CPPS 病人的前列腺组织中 CuZnSOD 过度消耗或合成障碍, 使抗 ROS 损伤的能力减弱，ROS 含量显著增高, 导致前列腺组织细胞膜及具有膜结构的内质网、 肌浆网及溶酶体等亚细胞结构的损伤。本文结果亦显示，炎性组血清中虽然 MDA 的含量明显高于对照组，但 CuZnSOD 的活力与对照组比较差异无显著性(P0.05)。说明在炎性 CPPS 发生发展的过程中, 氧化应激反应主要发生于前列腺组织中,血清中改变不明显。本文检测结果显示，炎性
17、组血清中 CuZnSOD 与 MDA 的水平与非炎性组比较差异无显著意义(P0.05)，炎性组 EPS 中 MDA 含量明显高于非炎性组(P0.01)，CuZnSOD 活力明显低于非炎性组(P0.01)。说明在炎症性 CPPS 发生发展过程中, 前列腺组织氧化应激反应强度要明显高于非炎症性 CPPS。所以,我们认为 EPS 中 CuZnSOD 、MDA 水平对区分炎症性和非炎症性 CPPS 具有参考价值。 本文的检测结果显示，非炎性组血清和 EPS 中 CuZnSOD 活力与对照组比较差异无显著性(P0.05)，均处于正常范围内;EPS 中 MDA 含量与对照组比较差异亦无显著性(P0.05)
18、，处于正常范围内。说明非炎性 CPPS 病人前列腺组织氧化应激反应水平与健康男性之间差别不大。 本文检测结果同时显示，虽然非炎性组血清中 CuZnSOD 的活力与对照组比较差异无显著性(P0.05)，但 MDA 的含量明显高于对照组(P0.01)，提示非炎性 CPPS 病人体内可能有不同程度的氧化应激反应存在。考虑到病人的临床症状，我们可以推测非炎性 CPPS 病人的症状可能源于前列腺邻近器官的疾病，应做一步检查。 因此，我们推测，在炎性 CPPS 的发生发展中, 由于前列腺组织细胞中 ROS 产生增多，过氧化作用增强，导致 CuZnSOD 消耗增加，MDA 等毒性产物也随之增多，从而造成了前
19、列腺组织的损伤，这可能是 SOD 病因学中重要的原因之一。本文结果中炎性组 EPS 中 MDA 增高及 SOD 减少, 均为此观点提供了实验佐证。而非炎性 CPPS 的发生发展则不能用前列腺组织细胞的氧化应激反应进行解释。炎性 CPPS 病人 EPS 中CuZnSOD 、MDA 水平的变化与炎症的发生发展密切相关,结合 EPS 常规检查或培养结果可确诊。目前许多文献已证实，SOD 制剂在治疗慢性前列腺炎中取得了明显疗效10,11。我们认为，CPPS 病人血清及 EPS 中的CuZnSOD 、MDA 水平，可作为诊断及判断疗效的有意义的辅助指标。应用 SOD 制剂治疗炎性 CPPS,可望得到理想
20、的疗效。 【参考文献】 1SHAHED A R, SHOSKES D A. Oxidative stress in prostatic flhid of patients with chronic pelvic pain syndrome:correlation with gram positive bacterial growth and treatment responseJ. J Androl, 2000,21(5):669675. 2PASQUALOTTO F F, SHARMA R K, POTTS J M, et al. Seminal oxidative stress in pa
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