1、SPF 级动物屏障系统的运营管理作者：王永金 雷培琪 曾哓岚【摘要】 总结 SPF 级动物屏障系统的运营管理经验，包括屏障系统设施的维护，饲料质量的保证，大小鼠的饲养操作执行情况，实验动物质量的保证等几个方面。 【关键词】 SPF； 屏障系统； 管理作者简介：王永金，男，研究实习员，主要从事医学实验动物工作，Email: 随着医学和生命科学等高新技术的飞跃发展，人类对实验动物的要求也愈来愈高。我所是一个从事中药新药的研究单位，对实验动物的质量有较高的要求。在单位领导的重视和关心下，我所于 2002 年建立了 SPF 级动物屏障系统，在 2005 年取得了SPF 级大鼠和小鼠的生产许可证。三年来
2、，我们严格按照屏障系统设施标准操作规范进行生产管理，以确保动物的质量,现将这三年 SPF 级动物屏障系统的运营管理总结一下,以便广大同行探讨和指正。1 屏障系统设施的运行和维护1.1 空调系统：这是屏障系统的核心，也是保持设施正常运转的重要因素。为保证该系统能正常工作，我们专门设置了一名电工技术人员专职负责此工作，严格按照空调系统控制程序与操作规程进行操作。每天检查整个机组的运行情况并记录，发现问题及时报告，以保证屏障内的温度、湿度及压差的控制平衡。每天保持机房的清洁卫生，以减少新风口空气的尘埃粒子。同时，我们还与厂方的技术人员签定了维护保养协议，由他们定时为我们的主机维护保养，以便发现问题及
3、时解决，避免对主机造成巨大损害，延长主机寿命，保证该系统的正常运行。1.2 净化系统：该系统涉及到屏障内的空气洁净度。按规定每周对初效过滤棉进行清洗，每 3 个月对中效过滤棉进行清洗，高效过滤器按实际使用情况进行更换（一般为一年左右） 。同时，每天清洁空调机房内的卫生，尽量减少灰尘进入新风口。1.3 监控系统：我们有一套比较好的监控系统。我们在屏障系统内的每个房间装有半球型自动调焦摄像头，便于进行全方位观察，并配有对讲机，可以做到适时监控与交流。为便于对实验过程和动物行为进行观察，我们配备了一台硬盘录象存储器，可以连续的，大量储存影象资料。1.4 消毒灭菌：高压灭菌器的工作人员，必须取得压力容
4、器作业人员操作证，做到持证上岗。严格按照高压灭菌器操作规程进行操作，做到消毒灭菌每锅均有记录，严格认真把关，防止因灭菌不够将病原微生物带入屏障内造成污染。2 实验动物的饲料实验动物的生长、发育、繁殖以及体质均依赖于饲料。饲料的原料组成和营养成分应力求稳定。但对于 SPF 级动物来说，饲料必须要灭菌，我们使用的是高压灭菌，这使得其中的营养成分不可避免地受到高温的破坏。为保持高压灭菌后，其营养成分达到标准，我们在饲料中添加了足量的复合维生素 B 和氨基酸，以补充饲料因高压灭菌造成维生素B 族遭到的损失。经送样到有关监测部门进行检测，其营养元素含量均符合标准，三年来，动物生长繁殖良好。3 屏障内大鼠
5、和小鼠的操作执行情况屏障内工作人员严格执行屏障生产设施标准操作规范，如屏障区通过间使用程序、风淋室使用规程、设施内饲养人员卫生管理规程、饲养间操作规程等。动物的饲料为经高压灭菌的无菌饲料，饮用水为经粗滤、活性炭、逆渗透、超滤和紫外线处理、经加酸 pH23 的纯净酸化水，经过这三年来的运行，其使用效果较好。4 实验动物质量保证方面参照国家有关实验动物标准，结合动物设施及生产实际对动物所需的饮水、饲料、垫料、屏障内环境设施建立了检测方法和检测制度，将检测动物质量为主转变为检测动物生存环境为主，以便能及时发现并控制病原微生物对动物的污染。4.1 饲料的检测：对每批高压灭菌饲料均进行无菌检测，分别接种
6、肉汤和硫乙醇酸钠培养基，37 下培养 48 小时。同时，用 121 化学指示剂检测消毒效果，待每批饲料检测合格后，方饲喂动物。4.2 无菌水的检测：动物饮用水经过这三年多的检测观察，我们根据自身条件和情况制定了一套饲养及检测方法。每周一、三、五所有饮水瓶全部倒空、消毒，而后将消毒好的水瓶重新灌装无菌水，同时在每周一将动物饮用水瓶中的余水进行检测，其检测结果表明，动物饮用水在水瓶中放置 3 天后，仍能达到无菌生长，这说明我们每周一、三、五进行水瓶的全部清洗、消毒后，再灌装纯水机制造的新鲜无菌水是可行的。同时，我们每半月对纯水机进行无菌检测，随时监控，以保证屏障内的动物质量。4.3 实验动物的垫料
7、检测：我们外购新鲜木刨花，先经过筛子去除较小的粉末，再将垫料装入已洗净的盒子或装入口袋里进行高压消毒。我们对每批高压垫料进行消毒灭菌检测，在盒中放入高压消毒指示卡（121 、20 分钟） ，观察指示卡颜色变化的程度来确定高压灭菌的效果。对灭菌符合要求者，方可使用。4.4 屏障环境的检测：SPF 饲养室内落下菌和黏附菌按国家标准每季度检测一次。通过这三年饲养大、小鼠的情况，其检测结果分析发现，屏障内在有动物饲养的状态下，其空气落下菌比静态有增加，饲养室的菌落数介于 2040 个/皿,经培养鉴定，菌株多为白葡萄菌、链球菌等，但这些不是 SPF 级动物所要排除的病原菌。由于动物室空气中细菌变动的因素
8、较多，包括温度,湿度,换气次数,动物种类和密度,换笼后的天数等,所以检测时要注意考虑这些因数的影响。4.5 实验动物的质量检测：我们在这三年多的时间里，每年要对屏障系统的大、小鼠进行微生物的抽样检测，包括细菌、病毒和寄生虫，对检测可疑者,立即进行复检。检测的结果均符合屏障系统实验动物的质量要求。4.6 动物尸体及废弃物的处理：动物尸体采取集中处理。平时将动物尸体储藏于冰柜中，定期集中运送到有关机构进行无害化处置。5 管理中关键问题5.1 领导重视：屏障系统设施的正常运转，离不开水、电、空调机组、风机机组、过滤系统、高压消毒锅等设施的合理维护，一旦出现问题，对屏障系统设施都将是毁灭性的打击，但由
9、于这些因素涉及到多部门多专业的领域。因此，领导的理解和支持是设施正常运转的重要保证。5.2 人员管理：人员污染是屏障动物设施失败的重要原因。人与动物直接接触，其防护仅仅是洗澡和穿上灭菌衣，戴手套、口罩，裸露部位很容易对环境造成污染。因此，要严格控制人员的流动，思想要保持无菌概念，要使工作人员严格遵守操作规程才能避免对动物的污染。5.3 制定科学、切实、可行的规章制度：为保证 SPF 动物的质量，必须制定一套科学的规章制度，结合本单位的实际情况，我们制定了屏障生产设施标准操作规范，从动物的引种程序、动物的供应程序、通过间的使用程序等，要求每一位工作人员必须严格遵守执行。工作人员的每一步操作，都必须要按照操作规程中的规定，规范化、程序化、标准化地进行。【参考文献】1 山内忠平.实验动物的环境与管理M. 上海：上海科学普及出版社，1989，109-114.
