1、安心颗粒防治家兔动脉粥样硬化的病理形态学观察作者：方显明，吴韫宏，彭忠异 【关键词】 动脉粥样硬化 【Abstract】 AIM: To observe the influence of atherosclerotic pathological changes in atherosclerotic rabbits with Anxing Granule. METHODS: Thirtytwo male rabbits were randomly divided into 4 groups (n=8): Control group (A), Model group (B), Zibituo ta
2、blet group (C) and Anxing granule group (D) and fed respectively with common feed, high fat diet, high fat diet with Zibituo tablet and high fat diet with Anxing granule for 10 weeks. All the rabbits were then killed and their aortas were observed by naked eyes and light microscope. RESULTS: By nake
3、d eyes, the pathological changes of D group were less serious than those of B group and C group. By light microscope, the pathological changes of B group were the most serious in the 4 groups. The pathological changes of D group were the lightest in the 4 groups and 1/4 animals of D group had no any
4、 pathological changes. CONCLUSION: Anxing Granule has some therapeutic and preventive effects on atherogenesis in rabbits with hyperlipoidemia. 【Keywords】 Anxin granule; atherosclerosis; animal model; pathologic morphology 【摘要】 目的：观察安心颗粒对家兔实验性动脉粥样硬化(AS)形成的影响. 方法：将 32只健康雄性新西兰白兔随机分为 4组：正常对照组（A） 、模型组（B
5、） 、脂必妥片组（C）和安心颗粒组（D）,分别给予普通饲料、高脂饲料、高脂饲料加脂必妥片、高脂饲料加安心颗粒喂饲. 10 wk后处死所有动物，在肉眼及光学显微镜下观察其主动脉斑块病变程度、主动脉壁粥样硬化的病理形态学改变. 结果：C，D 组实验动物的主 AS病变程度和主动脉壁各层结构的粥样硬化病变均轻于 B组，其中 D组病变程度最轻，约有 1/4动物主动脉无病变. 结论：安心颗粒有防治高脂饲料所致 AS形成的作用. 【关键词】 安心颗粒；动脉粥样硬化；动物模型；病理形态学 0 引言 动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS） ，是目前危害人类健康最严重的疾病之一. AS的形成涉及许
6、多病理过程，包括脂质代谢障碍、血管内皮细胞损伤、单核细胞的迁移分化、平滑肌细胞的增殖等1. 近年来，我们在冠心病的防治中，应用安心口服液治疗冠心病心绞痛取得了显著的效果2. 为进一步探讨该药是否有阻止 AS形成的作用，我们拟通过喂饲高脂饲料建立家兔 AS模型，观察安心颗粒（即安心口服液改剂而成）干预对家兔实验性 AS形成的影响. 1 材料和方法 1.1 材料 健康雄性新西兰白兔 32只，体质量(2.00.1) kg，45 mo龄，广西中医学院动物中心提供许可证字号：030016. 安心颗粒，为人参、桂枝、瓜蒌皮、茯苓、水蛭等中药组成，由广西中医学院附属瑞康医院制成颗粒剂，每克约含生药 4.5
7、g，批号：030317. 脂必妥片，成都地奥九泓制药厂生产，批号：0211123. 1.2 方法 1.2.1 模型制作新西兰白兔造模前以基础饲料适应性喂养 1 wk，在稳定其血脂水平和代谢状况后，随机分为正常对照组（A 组） 、模型组（B 组） 、脂必妥对照组（C 组）和安心颗粒治疗组（D 组）4 组，每组 8只，分笼喂养. A组给予基础饲料喂饲；B，C，D 予以高脂饲料喂饲；而C组和 D组则在喂饲高脂饲料的基础上分别加用脂必妥和安心颗粒，每日给药 1次（其中脂必妥片用量为 0.156 g/kg，安心颗粒用量为 0.231 g/kg, ig） ，其用量参照文献3计算. 各组动物每日限食 100
8、120 g，自由饮水. 以上各组造模时间均为 10 wk. 高脂饲料配方(质量分数)：1胆固醇15鲜蛋黄5猪油基础饲料. 猪油加热熔化，将胆固醇溶于猪油内，另将鲜蛋黄蒸煮后直接加入饲料中，搅拌均匀. 实验 5 wk后，不再加胆固醇，只加喂含蛋黄和猪油的饲料，继续喂 5 wk，造模完毕. 1.2.2 实验步骤每 2 wk测量体质量 1次，于第 10周造模结束后，自耳缘静脉注射空气 20 mL，气栓处死. 将家兔主动脉从主动脉根部至髂总动脉分叉处取出，剥离外膜结缔组织，从腹侧面纵行剖开，9 g/L生理盐水冲洗干净，先直接作病理肉眼大体观察，根据内膜粥样斑块病变程度分级标准，评价粥样化损伤的程度.
9、再以 40 g/L甲醛固定，常规制作光镜标本，观察各组动物主 AS病变具体情况. 2 结果 2.1 肉眼观察主动脉斑块分级参照文献3方法，各组兔主动脉斑块肉眼观察病变程度分级：A 组：0 级 8只；B 组：3 级 6只，4 级 2只；C组：0.5 级 2只，1 级 5只，2 级 1只；D 组：0 级 2只，0.5 级 5只，1 级 1只. 经 Ridit分析，D 组病变程度分级均低于 B组（P0.01）和C组（P0.05）. 2.2 兔主动脉病理形态学观察 2.2.1 正常对照组（A 组）兔主动脉内膜光滑无粥样病损，肉眼无脂质斑块形成；光镜下组织学切片示正常主动脉壁、内膜、中膜、外膜均清晰可见
10、，各层结构正常. 内膜无脂质沉积改变，含少量胶原纤维和平滑肌纤维，弹力纤维分布均匀，未见异常改变（Fig 1A）. 2.2.2 模型组（B 组）兔主动脉内膜粗糙不平，肉眼可见有大量灰黄色条纹状脂纹，向内膜表面显著隆起，广泛存在于颈总动脉开口处及胸、腹主动脉内膜处. 其中 1例主动脉（升、降段）内膜全为粥样病灶，几乎占满整段动脉内膜，其他例略为轻些. 光镜下，内膜显著增厚、水肿，病灶表面由纤维细胞、胶原纤维构成薄的纤维帽，其下方有大量泡沫细胞、脂质、少许炎细胞，粥瘤处动脉中膜平滑肌萎缩、变薄，外膜可见毛细血管新生及少许结缔组织增生（Fig 1B）. 病变区域可见浅染无定形物、脂质、坏死物及胆固醇
11、结晶（HE 片呈针状空隙）及钙化颗粒物，接近底部有少许淋巴细胞、中性粒细胞（Fig 1C）. 2.2.3 脂必妥组（C 组）肉眼可见本组各例兔主动脉虽有灰黄色条纹状脂纹，但多数例主动脉内膜的条纹状脂纹较模型组少，只有个别病例病灶范围稍大. 光镜下，每例主动脉内膜都稍有增厚. 病灶可见表层纤维帽较薄，其下为大量泡沫细胞，泡沫细胞圆形体积大，胞质内大量空泡（制片已被溶解所致） 、少许平滑肌细胞、细胞外脂质及少许炎细胞（Fig 1D） ，符合 AS症的早期脂纹纤维斑块期改变. 2.2.4 安心颗粒组（D 组）本组有 1/4的动物主动脉内膜光滑无增厚、无粥样病损，肉眼无脂质斑块形成，其他有病变的主动脉
12、，其病变都相对较 B、C 组减轻，并呈早期脂纹期改变. 光镜下，无病变主动脉壁、内膜、中膜、外膜均清晰可见，各层结构正常（Fig 1E） ；病变主动脉内膜轻微增厚，内皮细胞下有少量泡沫细胞聚集，该处未见胆固醇结晶，亦未见溶解坏死组织（Fig 1F）. 3 讨论 采用喂饲高脂、高胆固醇饮食制作家兔高脂血症 AS模型是经典造模方法. 本实验在成功地运用该法造模基础上，以脂必妥片作对照，观察安心颗粒预防性给药对实验性家兔高脂血症 AS形成的干预作用. 结果表明，该药对高脂、高胆固醇所致 AS有明显的拮抗作用，脂必妥片虽也有一定的作用，但不及安心颗粒. 安心颗粒由人参、桂枝、瓜蒌皮、水蛭、茯苓等中药配
13、方制成. 现代药理研究表明，人参的主要药效成分为人参皂甙，而人参总皂甙能显著降低高脂饲养大鼠血中的总胆固醇、三酰甘油和过氧化脂质含量，保护血管内皮细胞，降低或减少 AS的发生4. 桂枝也有明显的降血脂作用5. 水蛭和水蛭素对高脂血症家兔胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白胆固醇有明显的降脂作用，并可降低血中丙二醛含量，减轻家兔主动脉斑块面积和心肌小 AS程度6. 据此推测，安心颗粒防治 AS的机制可能与其降低血脂和抗脂质过氧化作用有关. 通过降低血脂水平，减少脂质在细胞的沉积. 同时，其抗脂质过氧化作用可减轻动脉内皮细胞损害，抑制血管平滑肌的增生，从而阻止了 AS的形成. 【参考文献】 1 余胜珠，
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