1、白木香种子的超低温保存研究【摘要】 目的】探讨白木香种子长期保存的方法。 【方法】将不同含水量的白木香种子放置在液氮罐(-196)中保存 55d 后取出,测定其发芽率,并考察冷冻方法对其发芽率的影响。 【结果】含水量为.的种子发芽率完全丧失;含水量为.、.的种子发芽率大大降低;而含水量为.的种子仍能保持较高的发芽率。速冷的白木香种子比缓冻的发芽率高。 【结论】含水量为.的白木香种子置于液氮中保存为一种安全、有效的长期保存方法。 【关键词】 白木香 超低温保存 发芽率 白木香 Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg.是我国特有的珍贵药用植物,其野生种质已遭到严重破坏,被列为国
2、家二级重点保护野生植物 。白木香种子属顽拗性种子,正常含水量的种子常温条件下个月后其发芽率下降至以下,不利于保存。因此,探讨适合白木香种子长期保存的方法,对白木香种质资源的保护具有重要意义。国内学者对顽拗性种子的超低温保存已有报导- ,前期研究结果也表明 ,低温()有利于含水量为.的白木香种子的贮藏。本文对白木香种子进行超低温保存研究,以期寻找适合白木香种子长期保存的方法,现将结果报道如下。 1 材料与方法 1.1 材料 自白木香 GAP 基地(广东省电白县)采收果实,收集不同含水量的种子,密封,冰箱放置 20d 后,分别测其含水量与发芽率。 1.2 仪器 Sartorius BP 110S
3、电子分析天平(德国) ;电热恒温鼓风干燥箱GZX907OMBE (上海博讯实业有限公司医疗设备厂) ;LRH250GS 人工气候箱(广东省医疗器械厂) ;不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(广州市华南医疗器械有限公司) ;YJ875 医用净化工作台(中国) ;RO/DI50RE 纯水机(中国) 。 1.3 冷冻与解冻方法 将种不同含水量的种子密封于冷冻管中,直接投入液氮中保存;另将含水量为.的种子密封于冷冻管中,先置 4冰箱放置 4h,再于-冰箱放置 3h,最后投入液氮中保存。55d 后取出,室温()min 解冻,分别测定其发芽率。 1.4 发芽率测定 在消毒过的培养皿上铺一层已消毒过的滤纸,加入少量
4、纯净水,以滤纸湿润,加水量以倾斜时有少量水为宜。另将种子用蒸馏水反复冲洗多次,放置滤纸上,粒与粒间距不小于种子大?匝橹肿臃殖桑醋椋 孔椋玻傲! 嘌 蠓旁谌斯 蛳渲校 玻浮妫 刻旃鄄欤 铀 质 螅 锹挤壳榭觯 垂 絧发芽/%(N 发芽/N 样本)100%,计算发芽率。 2 结果 白木香种子于液氮中贮藏 55d 后,发芽率受含水量的影响较大,含水量为.0的种子发芽率完全丧失;含水量为.、.的种子发芽率大大降低;含水量为.的种子仍能保持较高的发芽率(见表) 。冷冻方式研究结果表明,速冻的白木香种子比缓冻的发芽率要高。表 1 超低温保存对白木香种子发芽率的影响统计方法:秩和检验;:.,与超低温保存前比
5、较;:.,与前种含水量比较;:.,与缓冻比较 3 讨论 种子的超低温保存,含水量高低以及脱水方法是关键因素。含水量过高会造成保存材料在冷冻和解冻过程中受到冻害甚至死亡,过低又会造成脱水伤害影响活力。若能最大限度地减少脱水伤害和降低含水量,保存材料的活力就能得到最大限度的保持。本研究结果表明,含水量为.的白木香种子,超低温条件下保存 55d 后,较常温及低温()条件下保存d 后,能保持较高的发芽率5 ,表明超低温(-)利于白木香种子的长期保存,为白木香种质资源的长期保存提供了安全、有效的方法。 【参考文献】 徐鸿华,蔡永光,徐祥浩热带药用植物栽培M 广州:广东科技出版社,: 李庆荣,郑郁善顽拗性种子种质超低温保存研究进展 江西农业大学学报,(): 张治国,王君晖,刘 骅,等.铁皮石斛种子的超低温保存研究 浙江省医学科学院学报,(): 张志娥,石思信,肖建平野生人参种子超低温保存 植物资源与环境,(): 刘军民,徐鸿华,徐梓勤,等不同贮藏方法对白木香种子发芽率的影响 广州中医药大学学报,():