1、不同栽培品种阳春砂的化学成分比较作者：宁鑫,吴睿,何瑞,詹若挺,徐晖,陈蔚文【摘要】 【目的】比较阳春砂的 3个栽培品种长果、圆果及春选果实化学成分的差异。 【方法】分别采用气相色谱法、水蒸气蒸馏法、甲苯法对 3个不同品种 10个批次的阳春砂中乙酸龙脑酯、挥发油、水分的含量进行测定。 【结果】阳春砂 3个栽培品种长果、圆果、春选中挥发油含量差异无显著性意义(P005), 但春选品种乙酸龙脑酯含量较长果、圆果显著偏低(P005) 。3 个品种水分含量均小于 150 mL/kg,符合药典要求。 【结论】不同栽培品种阳春砂的化学成分含量有所不同。 【关键词】 阳春砂/化学;挥发油/分析;乙酸龙脑酯/
2、分析;色谱法，气相研究显示阳春砂道地产区的栽培品种有长果和圆果阳春砂1,在广东省阳春市砂仁试验示范场(简称砂仁示范场)还有小面积种植的选育中品种“春选”阳春砂。它们在形态和开花习性上均存在差异2。为进一步考察它们的品质区别,本研究测定了阳春市不同产区 3个栽培品种阳春砂干燥成熟果实的挥发油、水分及乙酸龙脑酯含量。现将结果报道如下。1 材料与方法11 材料 10批道地药材阳春砂果实分别来源于阳春蟠龙、阳春春湾大垌、阳春永宁庙龙、阳春双窑大陈、阳春春湾、阳春砂仁示范场等地,均为 20072008 年采收。样品经广州中医药大学詹若挺教授鉴定为姜科植物阳春砂 Amomum villosum Lour.
3、(AVL)的干燥成熟果实。12 仪器与试剂 HP6890 型气相色谱仪(带氢火焰离子化检测器)(美国 Agilent公司)，XR 205 SMDR 型电子分析天平(德国 Sartorius公司)。乙酸龙脑酯对照品(批号：110759200303) 、萘对照品(批号：11673200602) 均购自中国药品生物制品检定所，流动相甲醇为色谱纯,其他试剂为分析纯,水为超纯水。13 挥发油含量测定取阳春砂供试品,去壳,将种子团置铜盅捣碎,过 23 号筛,取约 20 g,称定质量,置 1 000 mL磨口圆底烧瓶中,加蒸馏水 300 mL,浸泡 1 h,参照挥发油含量测定甲法3测定并计算供试品中挥发油含
4、量。每个批次平行测定 3次。14 水分含量测定取阳春砂供试品,置铜盅捣碎成直径不超过 3 mm的颗粒或碎片,取约 20 g,称定质量,置 500 mL的短颈圆底烧瓶中,加甲苯 200 mL,参照水分测定第 2法3测定并计算供试品含水量。每个批次平行测定 3次。15 乙酸龙脑酯含量测定4-5151 色谱条件安捷伦 HP5 毛细管柱(30 m032 mm,025 m);进样口温度：250 ，气化室温度：250 ，分流比为 501，流动相为 N2,流速为 15 mL/min;程序升温,起始温度 70 ,保持 1 min,以 10 /min 速度上升至 280 ,保持 3 min。氢火焰离子化检测器(
5、FID),温度 300 ,H2 为 30 mL/min,空气为 400 mL/min。尾吹气为 N2,流速为30 mL/min。152 对照品溶液制备取乙酸龙脑酯适量,精密称定,置 25 mL量瓶中,加无水乙醇制成 7544 mg/mL的溶液,作为对照品溶液。153 内标溶液的制备精密称定萘适量,置 100 mL量瓶中,加无水乙醇制成 0905 6 mg/mL的溶液,作为内标溶液。154 供试品溶液制备取 13 项下提取所得挥发油加无水硫酸钠 02 g,振摇,静置过夜。精密吸取脱水后的挥发油 10 L,置 1 mL容量瓶中,加无水乙醇稀释并定容至刻度,摇匀,精密吸取上述溶液 05 mL置 1
6、mL容量瓶中,加入内标溶液定容至刻度,摇匀,备用。155 标准曲线的制备精密吸取对照品溶液005 、01 、02 、03 、04 、05 mL,分别置于 1 mL容量瓶中,精密加入内标溶液 05 mL,再加无水乙醇定容至刻度,摇匀。分别精密吸取1 L,按 151 项下色谱条件测定,以对照品与内标物峰面积之比为纵坐标 Y,以对照品的进样量为横坐标 X绘制标准曲线,计算得回归方程：Y=1785 7X-0091 1,r=0999 6,结果表明乙酸龙脑酯在 0377 23772 g 范围内有良好的线性关系。2010 年第 27卷广州中医药大学学报宁鑫，等.不同栽培品种阳春砂的化学成分比较第 3期 15
7、6 精密度实验取 155 项下的溶液,按照相同方法测定,连续进样 10次,每次进样 1 L,以萘为内标,按乙酸龙脑酯与内标物峰面积之比计算,结果峰面积之比的 sR为 064%(N=10), 表明方法精密度良好。157 测定方法吸取供试品溶液 1 L,按照 151 项下色谱条件测定,记录色谱图,根据标准曲线计算乙酸龙脑酯含量。每个批次平行测定 3次。16 统计学方法采用 SPSS 160 软件进行数据的统计分析，计量资料以均数标准差(s)表示，组间比较采用方差分析，方差不齐采用秩和检验，检验水平 =055 。2 结果21 气相色谱图按拟定的色谱条件测定,所得色谱图见图 1,内标物的保留时间 tR
8、=7955 7958 min,乙酸龙脑酯的保留时间tR=9255 9259 min,表明方法稳定。22 不同栽培品种阳春砂的挥发油、水分、乙酸龙脑酯含量测定表 1结果显示:3 个品种阳春砂水分含量差异无显著性意义(P005),且均低表 1不同栽培品种阳春砂样品中挥发油、水分和乙酸龙脑酯含量测定结果于 150 mL/kg,符合中国药典(2005 版)中砂仁项下规定。3 个品种挥发油含量差异无显著性意义(P005), 但春选阳春砂乙酸龙脑酯含量偏低,与长果、圆果阳春砂比较差异均有显著性意义(P005) 。3 讨论本实验分析测定了道地产区 3个栽培品种 10个批次的阳春砂挥发油、水分及乙酸龙脑酯含量
9、,为阳春砂不同品种的质量评价及优良品种选育提供了科学依据。来自阳春市 5个不同产区的长果阳春砂品种,其中有 2个批次(CG080829、CG080828)挥发油含量低于 30 mL/kg,不符合中国药典(2005年版)中砂仁项下的规定,这可能受不同生态环境或采收后处理、保存方式不同的影响。乙酸龙脑酯是砂仁挥发油中主要成分,本课题组利用气质联用色谱峰面积归一化法分析了不同批次阳春砂挥发油,结果显示多数挥发油样品中乙酸龙脑酯的相对百分含量超过 60%(待发表)。乙酸龙脑酯也是砂仁发挥药理作用的重要有效成分,具有显著的抑制番泻叶所致小鼠腹泻、冰醋酸所致小鼠疼痛及抑制离体家兔小肠平滑肌运动等作用6。本
10、文结果显示,阳春砂春选品种乙酸龙脑酯含量较其他 2个品种低,其药效是否也存在区别有待研究。另外,由于本实验中测定的春选品种批次较少,因此要进一步确证以上结论,还需要收集更多的阳春砂春选样品进行分析。【参考文献】1张丹雁,刘军民,徐鸿华. 阳春砂不同栽培品种的比较鉴别J. 广州中医药大学学报, 2005,22(1) :1.2 杨锦芬,何瑞,詹若挺,等. 道地产区阳春砂不同栽培品种果实、花形态特征的调查与分析研究C. 全国第八届天然药物资源学术研讨会论文集, 2008：428.3 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)M. 北京：化学工业出版社, 2005:附录 57,附录 47.4 曾元儿,胡冬生,丁平,等. 砂仁药材质量标准研究J. 中国中药杂志, 1999,24(11):6515 刘波,刘红斌,王京昆,等. 阳春砂仁药材质量标准研究J. 云南大学学报, 2008,30(3):2866 李晓光,叶苗,徐鸿华. 砂仁挥发油中乙酸龙脑酯的药理作用研究J. 华西药学杂志, 2001,16(5) :356.
