藏药“佐太”主要药效学研究.doc

1、藏药“佐太”主要药效学研究作者：蒋婀娜 张春光 王建华 李中港 程芳 薛霞 刘兆平【摘要】 目的通过动物实验研究藏药“佐太”的抗惊厥、解热、抗炎及增强免疫的作用。方法尼可刹米注射液致小鼠惊厥法、伤寒 Vi 多糖疫苗致热家兔法、二甲苯致小鼠耳肿胀法和不同剂量“佐太”对小鼠非特异性免疫功能的影响。结果“佐太”能明显延长小鼠惊厥潜伏期及死亡潜伏期；明显降低因伤寒 Vi 多糖疫苗致热的新西兰兔体温；显著降低二甲苯致小鼠耳肿胀度；明显提高小鼠廓清指数和吞噬指数。结论“佐太”具有良好的抗惊厥、解热、抗炎及增强免疫的作用。 【关键词】 佐太 惊厥 解热 抗炎 免疫“佐太”为藏语译音，也有音译为“佐塔” 、

2、“坐台” 、 “佐台”及“唑台”的，是生产“七十味珍味丸” 、 “二十五味松石丸” 、 “仁青常觉” 、“坐珠达西”等名贵藏成药的主要原料，也可配合普通药物增加疗效，是一种常用珍宝类药物1 。临床上“佐太”并不单独使用，而是主要用做复方佐剂，与诸药相配，增强诸药疗效，缓解毒性。据报道， “佐太”与朱砂的主要化学成分类似（硫化汞） 2 ，朱砂主要功效为镇静安神、清热解毒。通过参考相关文献，本课题从“佐太”抗惊厥、解热、抗炎和增强免疫方面进行研究，从而为相关研究提供参考。1 材料1.1 药物与试剂佐太，西藏自治区藏药厂提供，批号：061124；安定（地西泮） ，购自山东大学齐鲁医院，批号：0610

3、009；阿司匹林肠溶片，山东鲁抗辰欣药业有限公司，批号：0704172021；胸腺肽肠溶片，西安迪塞生物药业有限责任公司，批号：0701048；尼可刹米注射液，上海禾丰制药有限公司，批号：060904；伤寒 Vi 多糖疫苗，北京天坛生物制品股份有限公司，批号：2006030105；二甲苯，天津市富宇精细化工有限公司，批号：060922。1.2 仪器 722N 型可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司；ALC-2100.2 型电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；ALC-110.4型电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；ALS-15 型电子计重称，上海永杰衡器有限公司；打耳器，山东省医学科

4、学院设备站；microlife电子温度计。1.3 动物昆明种小鼠，体重 1822 g，雌雄各半；新西兰兔，体重 2.53.0 kg，雌雄各半。山东大学实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK(鲁)20030004，动物质量合格证号：004134。1.4 给药剂量设计据杨宝寿等2报道：60 kg 人日用量为0.667 mgkg-1，按倍数法折算小鼠和兔等效剂量分别为 6.67 mgkg-1和 2.00 mgkg-1。久美彭措3报道：“佐太”在临床应用中成人每日量分别为 1520 mg，相当于 0.250.33 mgkg-1，按倍数法折算小鼠和兔等效剂量分别为 2.503.30 mgkg-1

5、和 0.750.99 mgkg-1。结合文献报道及等比原则，设定小鼠低剂量组为 3.3 mgkg-1，中剂量组为 6.6 mgkg-1，高剂量组为 13.2 mgkg-1；新西兰兔低剂量组为1.0 mgkg-1，中剂量组为 2.0 mgkg-1，高剂量组为 4.0 mgkg-1。1.5 数据处理实验数据以 s 表示，采用 SPSS11.5 统计软件进行数据分析。2 方法和结果2.1 佐太对尼可刹米注射液致小鼠惊厥作用的影响试验4，5取昆明种小鼠 50 只，雌雄各半，体重 1822 g。按体重随机分为 5 组，每组 10 只，雌雄各半，分别为阴性对照组（0.5%羧甲基纤维素钠） 、阳性对照组（安

6、定片，1.0 mgkg-1） ，佐太低剂量组（3.3 mgkg-1） ，中剂量组（6.6 mgkg-1） ，高剂量组（13.2 mgkg-1） 。各剂量组分别灌胃（ig）给予相应体积的药物，给药容积为 0.2 ml（10 g）-1。给药 1 次/d，连续给药 4 d。末次给药前禁食 14 h，自由饮水，药后 30 min，各组小鼠皮下注射（sc）给予尼可刹米注射液 770 mgkg-1，立即观察小鼠出现惊厥的时间（惊厥潜伏期） 、发生惊厥的动物数、死亡动物数（未惊厥小鼠的潜伏期计作 120 min）及死亡潜伏期（从出现惊厥至死亡时间） ，计算惊厥率和死亡率。通过比较上述指标，评价药物抗惊厥作用

7、。结果如表 1 所示，佐太 6.6，13.2 mgkg-1 剂量组惊厥潜伏期与阴性对照组比较差异有显著性(P0.01)，能显著延长小鼠惊厥潜伏期，小鼠死亡潜伏期亦明显延长。提示其具有良好的抗惊厥作用。表 1 佐太对尼可刹米注射液致小鼠惊厥作用的影响（略）与阴性对照组比较，*P0.01；与阳性对照组比较，P0.01；n=102.2 佐太解热作用试验（伤寒 Vi 多糖疫苗致热家兔法） 6,7取健康新西兰兔，雌雄各半，体重 2.53.0 kg，室温 20时，基础肛温在 38.038.8的兔用于试验。试验前测正常肛温两次，温差值不超过 0.3。耳缘静脉注射伤寒 Vi 多糖疫苗（0.5 mlkg-1）

8、，1 h 后测肛温，取升温 0.8 以上的新西兰兔 30 只，按升温高低随机分组，共 5 组，每组 6 只，雌雄各半。分别为阴性对照组（0.5%羧甲基纤维素钠） 、阳性对照组（阿斯匹林肠溶片 50 mgkg-1） ，佐太低剂量组（1.0 mgkg-1） ，中剂量组（2.0 mgkg-1） ，高剂量组（4.0 mgkg-1） 。各组分别灌胃（ig）给予相应体积的药物，给药容积为 2.0 mlkg-1。给药后每隔 1 h 同法测量兔肛温，共测 5 次，以不同时间所测肛温与基础肛温之差，为体温变化的指标。统计肛温差值进行比较，评价不同剂量组佐太解热作用。表 2 佐太解热作用试验（伤寒 Vi 多糖疫苗

9、致热家兔法） （略）与阴性对照组比较，*P0.05；n=6结果如表 2 所示，新西兰兔耳缘静脉注射伤寒 Vi 多糖疫苗 1 h 后，肛温明显升高。灌胃给予佐太后，新西兰兔肛温明显降低，药后 1 h 佐太 2.0，4.0 mgkg-1 剂量组出现明显的解热作用，解热作用可持续 5 h。提示其具有良好的解热作用。2.3 佐太对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用试验6,8取昆明种小鼠 50 只，雌雄各半，体重 1822 g。按体重随机分为 5 组，每组10 只，雌雄各半，分别为阴性对照组（0.5%羧甲基纤维素钠） 、阳性对照组（阿斯匹林肠溶片,200 mgkg-1） ，佐太低剂量组（3.3 mgkg-1）

10、 ，中剂量组（6.6 mgkg-1） ，高剂量组（13.2 mgkg-1） 。分别灌胃（ig）给予相应体积的药物，给药容积为 0.2 ml（10 g）-1。给药 1次/d，连续给药 4 d。末次给药后 30 min，用二甲苯 0.05 ml/只滴于小鼠右耳内外两面致炎，左耳为对照侧。30 min 后，颈椎脱臼处死动物，用直径 8 mm 的打耳器左、右两耳相应部位各打一耳片，用电子天平称重，以左右耳片重量之差作为肿胀度。计算各组肿胀度，求出肿胀抑制率（%） 。肿胀度（mg）右耳片重左耳片重肿胀抑制率（%）=阴性对照组平均肿胀度给药组平均肿胀度阴性对照组平均肿胀度100%结果如表 3 所示，与阴性

11、对照组比较，佐太 6.6，13.2 mgkg-1剂量组小鼠耳肿胀度显著下降 (P0.01)，提示其具有良好的抗炎作用。2.4 佐太对小鼠非特异性免疫功能的影响试验6,9取昆明种小鼠 50 只，雌雄各半，体重 1822 g。按体重随机分为 5 组，每组 10只，雌雄各半，分别为阴性对照组（0.5%羧甲基纤维素钠） 、阳性对照组（胸腺肽肠溶片，5.0 mgkg-1） 、佐太低剂量组（3.3 mgkg-1） 、中剂量组（6.6 mgkg-1） 、高剂量组（13.2 mgkg-1） 。分别灌胃（ig）给予相应体积的药物，给药容积为 0.2 ml（10 g）-1。给药 1 次/d，连续给药 4 d。末次

12、给药前禁食 14 h，自由饮水，药前称体重，药后 30 min，尾静脉注射 50%印度墨汁，给药容积为 0.05 ml(10 g)-1。于 2 min 和 10 min 眼眶静脉丛取血 20 l 加到 0.1%碳酸钠溶液 2 ml 中，摇匀。在 680 nm 波长处测吸光度值(A)。小鼠处死后取肝脏和脾脏称重。计算廓清指数（k）及吞噬指数（）值进行统计处理。廓清指数（k）=lg（A2/A10）/t，吞噬指数（）=体重/（肝重+脾重） 。表 3 佐太对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用（略）与阴性对照组比较，*P0.01；与阳性对照组比较，P0.01；n=10结果如表 4 所示，佐太 6.6，13.2

13、 mgkg-1 剂量组与阴性对照组比较，可明显提高小鼠廓清指数和吞噬指数。提示佐太在此剂量下能提高小鼠的非特异性免疫功能。表 4 佐太对小鼠非特异性免疫功能的影响（略）3 讨论佐太作为藏药之精华，其独特的疗效有目共睹，但因其炮制的主要原料为汞化合物，因此先前有关报道以安全性研究居多。本课题秉承了藏药传统医药理论思想的指导，结合现代医药理论与方法，通过实验研究证明，佐太能明显延长小鼠惊厥潜伏期及死亡潜伏期；能明显降低因伤寒 Vi 多糖疫苗致热的新西兰兔体温；能显著降低二甲苯致小鼠耳肿胀程度；可明显提高小鼠廓清指数和吞噬指数。以上结果说明，佐太具有良好的抗惊厥、解热、抗炎及增强免疫力的作用。相信随

14、着科学技术的不断进步及药品市场的进一步规范管理，这种具有民族特色、疗效独到的药物会逐步被人们认识并深入研究，从而更好地造福于全人类。【参考文献】1何毓敏，曾 勇，张 艺. 藏药“佐塔”及其安全性研究现状J.中国民族医药杂志，2006，2（1）：39.2杨宝寿，江吉村，降 拥，等. 藏药“佐塔”中汞的作用特点和安全性研究J.西藏研究,2004， （1）:74.3久美彭措. 藏药中重金属毒性的实验研究C.99 全国藏医药学术研讨会交流论文，1999：199.4徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学M.北京：人民卫生出版社，2001：813.5严铸云，李晓华，陈 新，等.僵蚕抗惊厥活性部位的初步研究J.时珍国医国药，2006，17（5）：6966中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南（药学 药理学 毒理学） M.北京：中国卫生部药政管理局，1994：120，167，173，187，121，136，151.7李洪梅，李小芹，邬洪波,等.退热清咽颗粒对大鼠的抗炎解热作用J.中国实验方剂学杂志，2003,9（6）：30.8朱萱萱，张忠华，王淑云，等.尿路清颗粒的药效学研究J.医药导报，2007，26（3）：238.9余晓红.解毒退热冲剂的退热与抗炎实验J.医药导报，2006，25（7）：636.