1、藏药翁布不同提取物的体外抑菌实验研究作者：鲍敏 曾阳 米琴 陈振宁【关键词】 翁布；,水提物；,醇提物；,抑菌摘要：目的研究藏药翁布不同提取物的体外抑菌作用。方法采用滤纸片扩散法对藏药翁布 Myricaria germanica (L.) Desv.水提物和醇提物分别进行了体外抑菌实验研究。结果藏药翁布水提物和醇提物对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为 70%和 50%，对其他 8 种菌的最低抑菌浓度均在 5%以下，有显著的抑菌作用。结论翁布水提物的抑菌效果好于醇提物。关键词：翁布； 水提物； 醇提物； 抑菌Bacteriostasis Study of the Different Extracts
2、 from the Traditional Tibetan Herb Myricaria germanica (L.) Desv in vitro Abstract：ObjectiveTo study the bacteriostasis in vitro of aqueous extract and alcohol extract from the Tibetan herb Myricaria germanica. MethodsFilter paper dispersion Result: The MIC of aqueous extract and alcohol extract to
3、E. coli were 70% and 50% respectively, and the MIC of the other eight bacteria was under 5%. ConclusionThe extracts has obvious bacteriostasis effects, and the bacteriostasis effect of aqueous extract is better than that of alcohol extract.Key words：Myricaria germanica (L.) Desv; Aqueous extract; Al
4、cohol extract; Bacteriostasis 藏药翁布原植物为柽柳科 Tamaricaceae 水柏枝属 Myricaria Desv，水柏枝 Myricaria germanica (L.) Desv.，灌木，高达 2.5 m，茎直立且多数分枝，枝红棕色；叶小，线形或线状长圆形，分布于西藏、青海、四川、云南、甘肃、陕西、山西，生长于海拔 2 0002 900 m 的河滩环境1 ，为传统藏药，据晶珠本草记载，翁布有清热解毒，发散透疹，治黄水病的功效2 。清热解毒中草药对多种细菌或病毒所致的感染性疾病有良好的治疗效果3 ，本文分别采用翁布的水提物和醇提物对多种菌进行体外抑菌实验，拟
5、观察翁布体外的抑菌效果，为藏药翁布的开发和应用提供基础理论依据。1 材料与仪器1.1 药物藏药翁布采自青海省祁连县海拔 2 900 m 的河滩，由青海师范大学生命与地理科学学院吴学明教授鉴定。1.2 菌种枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、梭状芽孢杆菌 Clostridium sp.、变形杆菌Proteus vulgaris、大肠杆菌 Escherichia coli、痢疾杆菌 Shigella dysenteriae、巨大芽孢杆菌 Bacillas megaterium、八叠球菌 Sarcina maxima、四联球菌
6、Tetracoccus sp.，由青海师范大学生命与地理科学学院微生物实验室提供，以牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养4 。1.3 仪器 HHS114 电热恒温水浴锅，XMTA7000 水夹套培养箱，YX280B 手提式压力蒸汽消毒器，ZHJH1115 无菌操作台。2 方法2.1 藏药翁布的水提法5将阴干翁布嫩枝剪碎，称取 50 g，置烧杯中加蒸馏水浸泡 30 min 后加热煮沸，再用文火加热 30 min，过滤得第 1 次水提取物，将滤渣用同样方法得第 2 次、第 3 次水提取物，合并 3 次滤液，置于烧杯中，在 70恒温水浴锅中蒸发浓缩至 50 ml，得到翁布水提物（含生药量 1 g/ml） 。2
7、.2 藏药翁布的醇提法5将阴干翁布嫩枝剪碎，称取 50 g，加 70的乙醇 150 ml 回流提取 1 h 后，过滤得第 1 次乙醇提取物，将滤渣再次回流得第 2 次、第 3 次乙醇提取物，合并 3 次滤液，减压蒸馏除去乙醇至 50 ml，得到翁布醇提物（含生药量 1 g/ml） 。2.3 菌种活化培养3将各菌株接种到牛肉膏蛋白胨斜面培养基中，37培养 24 h 后，利用血球板计数法将各菌株用无菌水配制成浓度约为 107 个/ml 的菌悬液，备用。2.4 最低抑菌菌浓度（MIC）的测定6将上述藏药翁布水提物和醇提物（浓度 100）用蒸馏水稀释配制成浓度为1%，2%，3%，4%，5%，10%，2
8、0%，30%，40，50，60，70，80%的试液，采用滤纸片扩散法测定各种菌的最低抑菌浓度。用打孔器将新华滤纸打成 8 mm 的圆片，滤纸经高压灭菌后，放在试液及空白对照的生理盐水中浸泡 30 min，沥去多余试液，用无菌镊子放在涂好菌液的培养基上，25培养 24 h，以滤纸片周围刚出现抑菌圈的浓度为最低抑菌菌浓度（MIC） ，各浓度设 3 个重复，取其平均值。2.5 藏药翁布提取物的抑菌实验6将上述藏药翁布水提物和醇提物（浓度 100） ，以生理盐水作为对照，采用滤纸片扩散法测量滤纸片周围形成的抑菌圈直径，重复 3 次，取其平均值。比较翁布水提物和醇提物的抑菌作用。3 结果3.1 藏药翁布
9、最小抑菌浓度（ MIC）测定藏药翁布不同提取物对各菌的最小抑菌浓度（MIC）测定结果见表 1。由表 1 可知，藏药翁布水提物和醇提物对大肠杆菌的抑菌作用不明显，最低抑菌浓度分别为 70和 50，对其他 8 种菌均有明显的抑菌作用，最低抑菌浓度均为 5以下，有显著的抑菌作用。3.2 藏药翁布不同提取物抑菌效果藏药翁布水提物和醇提物的抑菌结果见表 2。表 1 翁布不同提取物对各菌的最小抑菌浓度(略)表 2 藏药翁布不同提取物对各菌的抑菌圈直径(略)由表 2 可知，藏药翁布水提物和醇提物都有很强的抑菌作用，从抑菌圈直径看，醇提物对四联球菌的抑菌效果好于水提物，而水提物对其它菌的抑菌效果较好。4 讨论
10、临床资料表明，清热解毒中草药对多种细菌所致的感染性疾病有良好的治疗效果。现代实验研究显示，清热解毒类中草药能抑制细菌的糖、蛋白质、核酸代谢，抑制细菌繁殖，提高巨噬细胞、中性白细胞吞噬功能3 。本实验所用藏药翁布具有清热解毒作用，其水提物和醇提物对本实验提供的常见菌种都有相近最低抑菌浓度（大肠杆菌除外）和不同程度的抑菌作用，如金黄色葡萄球菌能引起皮肤粘膜、多种组织器官的化脓性炎症，是最常见的化脓性球菌7 ，因此，本实验结果可为开发藏药翁布作为治疗化脓性感染的药物提供基础研究数据。藏药翁布对其他致病菌有无抑制作用有待于进一步研究。参考文献：1 中国科学院西北高原研究所.藏药志M.西宁：青海人民出版社，1991：318.2 毛继祖，罗达尚，王振华，等.晶珠本草（蒂马尔、丹增彭措著） M.上海：上海科学技术出版社，1986.3 夏稷子，千里光.五种中草药的体外抑菌实验J.中国微生态学杂志，1997，9（4）：50.4 沈 萍，范秀容，李广武.微光扬学实验M.北京：高等教育出版社，2000：214.5 陈 奇.中药药理实验方法学M.上海：上海科技出版社，1996：67.6 黄秀梨.微生物实验指导M.北京：高等教育出版社施普林格出版社，2001:62.7 陆德源.医学微生物学，第 5 版M.北京：人民卫生出版社，2001:93.
