1、丹龙醒脑片对血瘀证犬血液流变性和球结膜微循环的影响作者：刘旺华,周小青,李花,胡志希,顾星,黄献平 【摘要】 目的 观察丹龙醒脑片对血瘀证犬血液流变性和球结膜微循环的影响,以探讨其活血化瘀功效。方法 从后肢大隐静脉注射高分子右旋糖苷复制血瘀证犬模型,观察其血液流变性和球结膜微循环改变以及丹龙醒脑片对该模型的影响。结果 造模后,模型组全血粘度、全血还原粘度和血浆粘度显著升高,血沉和血沉方程 K 值升高,红细胞聚集指数和红细胞变形指数明显升高；球结膜微循环形态积分和流态积分明显增高(P0.010.05)。与模型组相比,丹龙醒脑片大中剂量组全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、血沉方程 K 值、红细胞聚
2、集指数、红细胞变形指数显著降低,球结膜微循环形态积分和流态积分亦显著降低(P0.010.05)。结论 丹龙醒脑片能改善高分子右旋糖苷所致血瘀证犬模型血液流变性,改善微循环障碍。这可能是其活血化瘀作用的机制之一。 【关键词】 丹龙醒脑片；活血化瘀；血瘀证；高分子右旋糖苷；血液流变学；球结膜；微循环；犬Effects of Danlongxingnaopian on Hemorrheology and Bulbar Conjunctiva Microcirculation of Blood Stagnant Syndrome in Dog Model LIU Wang-hua, ZHOU Xiao
3、-qing, LI Hua, et al Institute of TCM Diagnostis, Hunan University of TCM, Changsha 410007, China Abstract：Objective To probe the effects of Danlongxingnaopian on hemorrheology and bulbar conjunctiva microcirculation (BCM) in dog and to explore its effects of activating the blood and eliminating the
4、 stagnant. Methods The blood stagnant syndrome model was reproduced by injecting dextran 500 into the vein. The BCM and the hemorrheology properties were detected and compared. Results Compared with the normal group, indexes of the model group such as whole blood relative viscosity, whole blood redu
5、cing viscosity and plasm viscosity improved, erythrocyte sedimentation rate and erythrocyte sedimentation rate K increased, erythrocyte aggregation index and erythrocyte transmutation index increased, BCMs morphological mark and flow habitus mark increased (P0.010.05). Compared with the model group,
6、 Danlongxingnaopian groups whole blood relative viscosity, whole blood reducing viscosity, plasm viscosity, ESRK, erythrocyte aggregation index, erythrocyte transmutation index, BCMs morphological mark and flow habitus mark decreased (P0.010.05). Conclusion Danlongxingnaopian can improve hemorrheolo
7、gy properties and regulate microcirculation of blood stagnant syndrome in dog model followed by injecting dextran500 into the vein, which may be one of the mechanisms of the therapeutic actions of Danlongxingnaopian. Key words：Danlongxingnaopian；activating the blood and eliminating the stagnant；bloo
8、d stagnant syndrome；dextran500；hemorrheology；bulbar conjunctiva；microcirculation 丹龙醒脑片是临床防治血管性痴呆的有效药物,以往的研究表明,丹龙醒脑片具有改善脑缺血再灌注所致血管性痴呆大鼠血液流变性的功效1,对复合血栓诱导剂(二磷酸腺苷 1.25 mmol/L凝血酶 1.25104 U/L肾上腺素 1 g/L,1002005)诱导的脑血栓形成具有抑制作用,能抑制血栓形成时血浆血栓素 B2、6-酮-前列腺素 1 的升高2,以及改善高分子右旋糖苷所致血瘀证家兔血液流变性和微循环3。为了进一步探讨丹龙醒脑片的活血化瘀功效
9、,本实验拟从后肢大隐静脉注射高分子右旋糖苷方法复制犬血瘀证模型,观察其对该模型血液流变性和球结膜微循环的影响,为指导该药的临床应用提供实验依据。现报道如下。 1 实验材料 1.1 动物 杂种犬 36 只,体重(12.61.2)kg,湖南省中医药研究院提供 1.2 药物及试剂 丹龙醒脑片：由丹参、地龙等药物组成,湖南中医药大学药学院药剂教研室提供,批号 20050621；尼莫地平片,哈尔滨博莱制药有限公司生产,批号 05072201。高分子右旋糖苷(dextran500),分子量(Mr)50 万,瑞典 Amersham Biosiciences 生产,批号 286753。1.3 仪器XTW-J
10、微循环彩色显微分析仪(北京福凯科技发展有限公司产品)；LBY-N6 型血液流变仪,LBY-NJ2 型血小板聚集仪(北京普利生公司生产)。2 实验方法2.1 分组及给药先按性别、体重将犬分层,再随机分为 6 组,即正常组(A 组)、模型组(B 组)、丹龙醒脑片大剂量组(E 组,3.2 g/kg)、丹龙醒脑片中剂量组(D 组,1.6 g/kg)、丹龙醒脑片小剂量组(C 组,0.8 g/kg)、尼莫地平组(F组,0.008 5 g/kg),每组各 6 只。灌胃给药,每天 1 次,灌胃体积为 3.3 mL/kg,从造模前 5 d 开始,直到造模当天,给药剂量根据人临床剂量按动物体表面积换算。正常组和模
11、型组每天灌胃等量蒸馏水。2.2 造模灌胃给药第 5 天,末次给药后 1 h,后肢大隐静脉注射 3%戊巴比妥钠溶液 30 mg/kg 麻醉,固定于手术台上,参考文献4方法造模,除空白组外,各组犬后肢大隐静脉一次性注射 7.5%高分子右旋糖苷 20 mL/kg,造成血瘀证模型。空白组犬注入等量生理盐水。2.3 球结膜微循环检测给予高分子右旋糖苷 10 min 后,立即在微循环彩色显微分析仪下观察球结膜微循环,放大 80 倍,观察犬双眼颞侧球结膜微循环并记录,取平均值,按田牛氏“球结膜微循环综合定量评价方法”用软件进行分析。根据各项指标改变程度记录血管形态、流态、周围状态积分。2.4 血液流变性检测
12、检测完球结膜微循环 3 h 内,进行颈动脉采血。取血 5 mL,加入肝素抗凝试管(试验前每支试管加入 0.5%肝素生理盐水溶液 0.2 mL,100 以下烘干备用)；另外取血 2.5 mL,加入 3.8%枸橼酸钠抗凝。用 LBY-N6型血液流变仪,LBY-NJ2 型血小板聚集仪测定全血粘度(低切、中切、高切)、血浆粘度、全血还原粘度、红细胞压积、血沉、血沉方程 K 值、红细胞聚集指数、红细胞刚性、红细胞变形指数。2.5 统计学方法计量资料数据均用 xs 表示,用 SPSS11.0 版统计软件在计算机上进行统计。多组间比较用单向方差分析,两两比较方差齐时用 LSD 检验,方差不齐时,用 Dunn
13、etts T3 检验。3 结果(见表 1、表 2)表 1 丹龙醒脑片对血瘀证犬模型血液流变性的影响(略)注：与 A 组比较,P0.05,P0.01；与 B 组比较,*P0.05,*P0.01(下同)。表 2 丹龙醒脑片对血瘀证犬模型球结膜微循环的影响(略)4 讨论右旋糖苷(Dextran)为肠膜状明串球菌(Leuconnostoc mesenteroide),以蔗糖为底物,通过酶催化使蔗糖水解,同时葡萄糖被聚合生成高分子葡萄糖聚合体。按照国内外普遍采用的传统工艺,发酵生成的高分子右旋糖苷经过分子量降解处理后,获得分子量一千到几十万的不同聚合度的右旋糖苷分子,再通过醇沉淀分级后得到不同规格的产品
14、。按其分子量大小可分为：高分子右旋糖苷、中分子右旋糖苷、低分子右旋糖苷、小分子右旋糖苷。本实验所用高分子右旋糖苷分子量大,达到 500万,其粘稠度高,可以与红细胞形成桥联,使红细胞聚集,增加血液粘稠度,是制作血瘀证动物模型的常用试剂。本实验观察了大隐静脉注射高分子右旋糖苷所致血瘀证犬模型血液流变性和球结膜微循环以及丹龙醒脑片对该模型的影响。大隐静脉推注高分子右旋糖苷造模后,全血粘度、还原粘度、血浆粘度明显升高,血沉加快,血沉方程 K 值增大,红细胞聚集指数、红细胞变形指数升高,表明造模后红细胞聚集、血液粘稠度增高。丹龙醒脑片大、中剂量组的全血粘度、血浆粘度、还原粘度、血沉、血沉方程 K 值、红
15、细胞聚集指数、红细胞变形指数较模型组均有所降低(P0.010.05),表明丹龙醒脑片可以对抗高分子右旋糖苷所致的血液流变学障碍,改善血液流变性。造模后,模型组球结膜微循环形态积分和流态积分明显增高,说明造模后微循环血管形态发生了改变,微循环血流发生障碍。与模型组相比,丹龙醒脑片大、中剂量组球结膜微循环形态积分和流态积分明显降低(P0.010.05),表明丹龙醒脑片可能通过减轻红细胞聚集,改善红细胞变形指数,改善血液流变性,扩张血管,从而改善了微循环血管的形态和功能以及血流状态,使微循环趋于正常。这可能是丹龙醒脑片活血化瘀作用的机制之一。本实验造模后红细胞压积、红细胞刚性指数以及球结膜微循环管周
16、积分均无明显变化,可能与指标检测距造模时间间隔较短,红细胞数量、成分、刚性以及微循环毛细血管管壁、血管周围尚未出现明显异常病理改变有关,有待今后延长造模时间和增加造模次数进一步研究,以便进一步明确本方对微循环障碍时红细胞和毛细血管管壁的保护作用。【参考文献】1 刘旺华,周小青,李 花,等.丹龙醒脑片对血管性痴呆大鼠血液流变学影响的实验研究J.湖南中医学院学报,2002,22(4)：47.2 刘旺华,周小青,李 花,等.丹龙醒脑片对脑血栓形成大鼠脑血管通透性及对花生四烯酸代谢的影响J.中西医结合心脑血管病杂志,2005, 3(9)：776778.3 周小青,刘旺华,李 花,等.丹龙醒脑片对血瘀证家兔血液流变性和球结膜微循环的影响J.中国中医药信息杂志,2006,13(1)：3739.4 陈 奇.中药药理研究方法学M.北京：人民卫生出版社,1993.653654.
