1、一、质量规格要求和检验方法1. 质量规格要求应符合 GB 17203-1998食品添加剂 柠檬酸钙标准要求：项目 指标外观 白色结晶状粉末含量（以 Ca3(C6H5O7)2 计） ，% 98.0-100.5干燥失重，% 10.0-13.3盐酸不溶物，% 0.2铅（Pb） ，% 0.0005重金属（以 Pb 计） ，% 0.002砷（As） ，% 0.0003氟化物（以 F 计） ，% 0.003溶液澄清度 合格2. 检验方法（A）鉴别 1 试剂和溶液 （1）盐酸（GB 622） 。 （2）1 mol/L 乙酸（GB 676）溶液。 （3）1 mol/L 硫酸汞溶液。 （4）1 mol/L 高锰
2、酸钾（ GB 643）溶液。 （5）1 mol/L 草酸铵（ HG 3-976）溶液。 （6）2 mol/L 硝酸（ GB 626）溶液：125mL 浓硝酸加水稀释至1000mL。 2 鉴别试验 方法一： 将 0.5 g 样品溶解于 10mL 水和 2.5mL 的 2mol/L 硝酸的混合液中，加 1mL 1mol/L 硫酸汞溶液，加热至沸腾，再加 1mL 1mol/L 高锰酸钾溶液，产生白色的沉淀物。 方法二： 以尽量低的温度完全灼烧 0.5 g 样品，然后冷却，并将残余物溶于 10mL 的水和 1mL 1mol/L 乙酸的混合液中，经过滤后再把10mL 1mol/L 草酸铵溶液加入滤液中，
3、产生大容积的白色沉淀，并可溶解于盐酸中。（B ）含量的测定 1 试剂和溶液 （1）3mol/L 盐酸溶液。 （2）6mol/L 盐酸溶液。 （3）1mol/L 氢氧化钠（ GB 629）溶液：准确称取 4g 氢氧化钠，溶于水，稀释至 100mL。 （4）30% 三乙醇胺溶液：38mL 三乙醇胺加水稀释至 100mL。（5）钙指示剂：称取 10g 预先在 105110下烘干 2h 的氯化钠，置于研钵内研细，加入 0.1g 钙试剂，研细，混匀。 （6）0.05mol/L 乙二胺四乙酸二钠（ EDTA-2Na）标准溶液 配制： 称取 20g 乙二胺四乙酸二钠（GB 1401） ，加热溶于 1000m
4、L水中，冷却，摇匀。 标定： 称取 1g 于 800灼烧至恒重的基准氧化锌，称准至0.0002g。用少许水湿润，加 6mol/L 盐酸至样品溶解，移入 250mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取 30.0035.00mL，加 70mL 水，用 10%氨水中和至 pH 78，加 10mL 氨-氯化铵缓冲溶液甲（pH10） ，加 5 滴 0.5%铬黑 T 指示液，用 0.05mol/L 乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白试验。 计算： c= （1） 式中：c 乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度； V1氧化锌溶液消耗的体积，mL； m1氧化锌的质量，g； V2 乙二胺四乙酸二钠溶液
5、消耗的体积，mL； V3 空白试验乙二胺四乙酸二钠溶液消耗的体积，mL； 0.08138每毫升 1 mol/L 氧化锌的克数。2 测定方法 预先在 150下烘至恒重，准确称取 350400mg 柠檬酸钙样m1(V1/250)(V2-V3) 0.08138品（称准至 0.0001 g） ，加水 10mL，3mol/L 盐酸至溶解（约 2mL）后，加水稀释至约 100mL，加 30%三乙醇胺 5mL 和 mol/L 氢氧化钠 15mL，摇匀。调节 pH 值大于 13，加入钙指示剂约 0.1g，用0.05 mol/L 的乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。 3 分析结果的表述
6、 柠檬酸钙含量X（%） 按式（2）计算： X(%)= 100 （2） 式中： V0.05 mol/L 乙二胺四乙酸二钠标准溶液消耗的体积，mL； F0.05 mol/L 乙二胺四乙酸二钠标准溶液实际浓度与 0.05 的比值；m样品的质量，g； 8.307每消耗 1 mL0. 05 mol/L 的乙二胺四乙酸盐相当于 8.307 mg的柠檬酸钙。(C) 干燥失重的测定 称取 2 g 试样（称准至 0.001 g） ，于 150下干燥 4h，按中华人民共和国药典1995 年版二部附录进行测定。 (D) 盐酸不溶物的测定 称取 5g 试样(精确至 0.001g)，加 6 mol/L 盐酸 10mL
7、和水 50mL，混合加热 30min，将所得溶液用洗净的 105烘 2 h 并冷却称重的 3 号石英沙芯漏斗、真空泵抽滤，用 200mL 水冲洗 5 次过滤、洗涤，沉淀物在 105烘箱内干燥 2h，冷却称重，残留物称重不得超过10mg（即 0.2%） 。(E) 砷的测定 溶解 1g 试样（称准至 0.001g） ，加 3 mol/L 盐酸 5mL 溶解，加水稀释至 35mL，以此溶液为供试液，按中国药典 1995 年版二部附录第56 页第二法测定。 (F) 重金属的测定 V8.307Fm1000按 GB 8451 进行测定。 (G) 铅的测定 按 GB 8449 方法测定。 (H) 氟化物的测
8、定 1 试剂和溶液 （1）高氯酸（GB 623） 。 （2）硝酸钍溶液：称取硝酸钍 250mg，加水溶解后稀释至1000mL。 （3）茜素磺酸钠溶液（1-1000） 。 （4）0.05mol/L 氢氧化钠（ GB 629）溶液。 （5）0.1L mol/L 盐酸（ GB 622） 。 （6）氟化钠标准溶液：精密称取经 105干燥 1h 的氟化钠（GB 1264）22.1mg，置 100mL 容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取 10mL，置另一 100mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得每 1mL 氟化钠标准溶液相当于 10g 的氟。2 仪器和设备 一般实验室用仪器和： （1）
9、蒸馏测氟装置（见图 1） 。 （2）比色管 50mL。图 1 测氟示意图1- 蒸汽发生器（1000 mL 烧瓶） ；2-安全管（5 mm） ；3-玻璃管（5 mm） 4-橡皮塞；5-三通管和螺丝夹；6-温度计（ 200） ；7- 三口瓶（250 mL） ；8-玻璃弯管；9- 直形冷凝器（500 mm） ；10-玻璃弯管；11-容量瓶；12-加热套或电炉；13、14- 橡皮塞 3 操作方法 称取试样 2.0 g（精确至 0.1 g） ，置于 250mL 三口瓶中（见图1） ，加 1020 粒玻璃珠，慢慢加入 5mL 高氯酸，用 15mL 水冲洗瓶壁。在三口瓶上装好温度计和玻璃管，并将温度计的水银
10、球和玻璃管插入三口瓶里的试液中，并按测氟示意图将三口瓶与蒸汽发生器和直形冷凝管相连，在蒸汽发生器中加入 500mL 水，打开螺丝夹，加热至沸腾，关闭螺丝夹，将水蒸气通入三口瓶中，通过电炉使三口瓶液体保持在 135140，直到馏出液约为 70mL 停止蒸馏。用水稀释馏出物至 80mL，混匀，移取 40mL 溶液于一 50mL 比色管中，在相同的管中装入 40mL 水作为对照液，每一只管子中，加入0.1mL 茜素磺酸钠溶液（ 1-1000） ，混匀，滴加 0.05mol/L 氢氧化钠溶液，边搅拌边加到含馏出物的管中，直到试样管呈粉红色与对照管一致，然后，在样品与对照管中各加入 1mL 0.1mol
11、/L 盐酸，混匀。由滴定管以每次 0.05mL 的量在样品管内加入硝酸钍溶液，使样品溶液变为粉红色。同时在对照管内也精确加入同样体积的硝酸钍溶液，混匀，再用滴定管加入氟化钠标准溶液，使样品管与对照管的颜色一样后，稀释至相同体积，混匀，放置使管内气泡全部逸出后比较，在对照管内加 12 滴氟化钠标准溶液，溶液颜色发生明显变化（即对照管内溶液颜色明显深于样品管颜色）可确定终点，消耗的氟化钠标准溶液不得超过 3.0mL（0.003%） ，每 1mL 氟化钠标准溶液相当于 10g 氟。（I）溶液澄清度的测定 称取试样 5g，用 5mL 37%浓度的盐酸和 50mL 水混合加热，然后用水稀释至 100mL
12、，按 中华人民共和国药典 1995 年版二部附录 IXB澄清度检查法进行测定。 二、生产使用工艺1. 生产工艺（1）工艺流程图：（2）工艺描述：a. 将柠檬酸、碳酸钙及水加入到反应罐中进行中和反应；b. 反应结束后进行离心过滤；c. 洗涤。用清水洗涤，加热至 70-80，反复多次洗涤；d. 在 75条件下进行干燥到含水量 1%以下，得到柠檬酸钙。2. 使用工艺柠檬酸钙在风味发酵乳中的应用高钙风味发酵乳高钙风味发酵乳配方：配料 用量鲜牛奶 916.00g白砂糖 70.00g纯净水 +菌种 +羟丙基二淀粉磷酸酯 3.00g琼脂 1.00g食品添加剂柠檬酸钙 10.00g合计 1000.00g柠檬酸
13、碳酸钙 中和 过滤 洗涤 干燥 柠檬酸钙水2. 高钙风味发酵乳工艺：琼脂、果胶 溶解牛奶标准化 混料 预热 均质 巴氏杀菌冷却接种发酵柠檬酸钙灌装冷却至 4熟化冷却至 25溶解1）将白砂糖与琼脂、羟丙基二淀粉磷酸酯、柠檬酸钙混合，再缓慢加入到搅拌的 80-85鲜牛奶中，连续搅拌 10-15 钟，使其分散均匀；2）预热至 60-65；3）在 18-20/4 MPa 条件下均质；4）90-95，10-5 分钟杀菌；5）冷却至 43，并进行接入菌种发酵；6）发酵至酸度控制在 60-65。 T；7）冷却至 25左右，缓慢搅拌至均匀；8）灌装；9）成品冷藏于 2-6，熟化 12-24 小时；10）检验合
14、格后出库。三、食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明按 GB/T 5009.92-2003食品钙的测定执行：原子吸收分光光度法1. 原理试样经湿消化后，导入原子吸收分光光度计中，经火焰原子化后，吸收 422.7nm 的共振线，其吸收量与含量成正比，与标准系列比较定量。2. 试剂(1) 盐酸。(2) 硝酸。(3) 高氯酸。(4) 混合酸消化液：硝酸十高氯酸4+1(5) 0.5 mol/L 硝酸溶液：量取 32mL 硝酸，加去离子水并稀释至1000mL(6) 20g/L 氧化镧溶液：称取 23.45g 氧化镧（纯度大于 99.99%)，现用少量水湿润再加 75mL 盐酸于 1000mL 容量瓶中
15、，加去离子水稀释至刻度。(7) 钙标准储备溶液：准确称取 l.2486g 碳酸钙（纯度大于 99. 9%)，加 50mL 去离子水，加盐酸溶解，移入 1000mL 容量瓶中，加 20g/L氧化镧溶液稀释至刻度。贮存于聚乙烯瓶内，4保存。此溶液每毫升相当于 500g钙。(8) 钙标准使用液：钙标准使用液的配制见表 1。钙标准使用液配制后，贮存于聚乙烯瓶内，4保存。表 1 钙标准使用液配制元素标准储备溶液浓度（ g/mL）吸取储备标准溶液量/mL稀释体积（容量瓶）/mL标准使用液浓度（g/mL）稀释溶液钙 500 5.0 100 25 20g/L 氧化镧溶液3. 仪器与设备所用玻璃仪器均以硫酸-重
16、铬酸钾洗液浸泡数小时，再用洗衣粉充分洗刷，后用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晒干或烘干，方可使用。(1) 实验室常用设备。(2) 原子吸收分光光度计。4. 分析步骤(1)试样处理(a) 试样制备微量元素分析的试样制备过程中应特别注意防止各种污染。所用设备如电磨、绞肉机、匀浆器、打碎机等必须是不锈钢制品。所用容器必须使用玻璃或聚乙烯制品，做钙测定的试样不得用石磨研碎。鲜样（如蔬菜、水果、鲜鱼、鲜肉等）先用自来水冲洗干净后，要用去离子水充分洗净。干粉类试样（如面粉、奶粉等）取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。(b) 试样消化精确称取均匀干试样 0.5g-1.5g(湿样 2.0 g
17、-4.0 g，饮料等液体试样 5.0 g-10.0g)于 250mL 高型烧杯，加混合酸消化液 20mL-30mL，上盖表面皿。置于电热板或沙浴上加热消化。如未消化好而酸液过少时，再补加几毫升混合酸消化液，继续加热消化，直至无色透明为止。加几毫升水，加热以除去多余的硝酸。待烧杯中液体接近 2mL-3mL时，取下冷却。用 20g/L 氧化镧溶液洗并转移于 10rnL 刻度试管中，并定容至刻度。取与消化试样相同量的混合酸消化液，按上述操作做试剂空白试验测定。（2）测定将钙标准使用液分别配制不同浓度系列的标准稀释液，见表 2，测定操作参数见表 3表 2 不同浓度系列标准稀释液的配制方法元素 使用液浓
18、度/（g/mL） 吸取使用液量/ mL 稀释体积/ mL 标准系列浓度 （g/mL） 稀释溶液1 0.52 13 1.54 2钙 25550320g/L 氧化镧溶液表 3 测定操作参数元素 波长/nm 光源 火焰 标准系列浓度范 稀释溶液围（g/mL ）钙 422.7 可见光 空气-乙炔 0.5-3.0 20g/L 氧化镧溶液其他实验条件：仪器狭缝、空气及乙炔的流量、灯头高度、元素灯电流等均使用的仪器说明调至最佳状态。将消化好的试样液、试剂空白液和钙元素的标准浓度系列分别导入火焰进行测定。5. 结果计算见式（1）X= （1） 式中X-试样中元素的含量，单位为毫克百克(mg/100g) c1-测
19、定用试样液中元素的浓度单位为微克每毫升（g/mL）c0-试剂空白液中元素的浓度单位为微克每毫升（g/mL）V-试样定容体积，单位为毫升（mL）：f-稀释倍数；m-试样质量，单位为克（g） 。计算结果表示到小数点后两位。6. 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10.滴定法（EDTA 法）1. 原理钙与氨羧络合剂能定量地形成金属络合物，其稳定性较钙与指示剂所形成的络合物为强。在适当的 pH 值范围内，以氨羧络合剂 EDTA滴定，在达到当量点时，EDTA 就自指示剂络合物中夺取钙离子，使溶液呈现游离指示剂的颜色（终点） 。根据 EDTA 络合剂用量，可计算钙的含量。2. 试剂（1）1.25mol/L 氢氧化钾溶液：精确称取 70.13 g 氢氧化钾，用水稀m1000（c 1-c2）Vf100
