1、贵州野生与栽培头花蓼的主要药效质量评价研究作者:钱海兵 王祥培 孙宜春 黄国钧 万德光【摘要】 目的通过野生与栽培头花蓼主要药效学的研究,对贵州野生与栽培头花蓼进行药效质量评价。方法采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进、二甲苯致小鼠耳肿胀实验、角叉菜胶致小鼠足肿胀和小鼠棉球肉芽肿等实验进行抗炎实验,采用醋酸扭体法进行镇痛实验。结果野生与栽培头花蓼对小鼠腹腔毛细血管通透性、小鼠足肿胀、小鼠耳肿胀和棉球肉肿等炎症具有明显的抑制作用;对醋酸引起的扭体反应有明显的镇痛作用;相同剂量的野生与栽培头花蓼之间没有明显差异。结论贵州产野生与栽培头花蓼在主要药效质量方面没有明显差异。 【关键词】 头花蓼;野生;
2、栽培;药效质量评价Abstract:ObjectiveTo estimate the quality of wild and cultivated Polygonun capitatum Ham by the study of primary pharmacodynamics.MethodsAnti-inflammation effect of wild and cultivated Polygonun capitatum were observed by mouse abdominal cavity capillary permeability increase test induced b
3、y acetic acid, mouse auricle swelling test induced by xylene, mouse pedal swelling test induced by carrageenin and cotton granuloma test in mouse. Analgesic action of wild and cultivated Polygonun capitatum was observed by aceticacid-induced twisting test.ResultsBoth wild and cultivated Polygonun ca
4、pitatum could inhibit cotton-induced granuloma of mice, and inhibit twisting response of mice obviously. In the same dose, there had no significant difference between wild and cultivated Polygonun capitatum.ConclusionThere is no significant quality difference between the primary pharmacodynamics qua
5、lity evaluation of wild and cultivated Polygonun capitatum in Guizhou.Key words:Polygonun capitatum; Wild; Cultivated; Quality evaluation头花蓼为蓼科植物头花蓼 Polygonum capitatum Ham exD.Don 的干燥全草或地上部分,具有清热利湿、解毒、止痛的功效,主产于贵州,为贵州道地药材,苗族将其广泛用于泌尿系统疾病的治疗。作为市售治疗泌尿系统感染的成药制剂热淋清的原料药,头花蓼现已有 GAP 的种植基地,为进一步进行质量评价,本研究以贵州施
6、秉头花蓼 GAP 种植基地当地野生品为对照,进行了头花蓼野生与栽培的主要药效质量研究。1 材料与仪器1.1 药材与试剂 栽培头花蓼,采自贵州施秉头花蓼 GAP 种植基地;野生头花蓼,采自贵州施秉,经成都中医药大学万德光教授鉴定为蓼科植物头花蓼。1.2 动物 昆明种小鼠,68 周龄,体重 1822 g,雌雄兼有,由贵阳医学院实验动物中心提供。1.3 仪器与设备 LDZ5-2 型自动平衡离心机,北京医用离心机厂产品;千分尺,上海量具刃具厂产品;752 型紫外光栅分管光度计,上海第三分析仪器厂产品。2 方法2.1 对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响 取昆明种小鼠 60 只,随机分为 6 组,分别为
7、正常对照组、野生高剂量组、野生低剂量组、栽培高剂量组、栽培低剂量组和阿司匹林对照组,每组 10 只。灌胃给药,连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g,末次给药后 1 h,尾静脉注射 0.5%伊文思蓝生理盐水溶液 0.1 ml/10 g,随即腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.1 ml/10 g,20 min 后脱颈处死小鼠,腹腔注射生理盐水 4 ml,充分冲洗后,抽取腹腔冲洗液 3 ml,2 500 r/min 离心 5 min,取上清液,紫外分光光度计 590 nm 处测定吸收度(OD 值) ,进行组间比较。2.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取昆明种小鼠 60 只,分组同“1.4.1”
8、项。灌胃给药,连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g,末次给药后 1 h,于小鼠右耳双面均匀涂抹二甲苯 0.03 ml/只,左耳不涂作为对照,40 min 后脱颈处死小鼠,用 8 mm打孔器分别在双耳相同位置打下耳片,于分析天平上称取耳片重量,以重量差值为肿胀度,并计算肿胀抑制率。肿胀抑制率(%)=(空白对照组耳片重差-给药组耳片重差) / 空白对照组耳片重差100%2.3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响 取昆明种小鼠 60 只,分组同“1.4.1”项。灌胃给药,连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g。末次给药前,千分尺测量小鼠正常足掌厚度,给药后 40 min,分别在小鼠右后
9、肢足爪皮下注射 0.1%角叉菜胶 0.05 ml/只致炎。随后第 1,2,4,6 h 各测量 1 次,记录结果,计算肿胀度。肿胀度(mm)=致炎后足掌厚度-致炎前足掌厚度2.4 对小鼠棉球肉芽肿的影响 取昆明种小鼠 60 只,分组同“1.4.1”项。将 20 mg 灭菌棉球种植于小鼠皮下,自手术后第 1 天开始灌胃给药,连续 7 d。末次给药后24 h 取出棉球,置于 80烘箱 6 h 烘干,称重,计算肉芽重量。肉芽重量=肉芽肿干重-棉球重量2.5 对醋酸引起的扭体反应的影响 取昆明种小鼠 60 只,分组同“1.4.1”项。灌胃给药,连续 5 d,给药体积 0.2 ml/10 g。末次给药后
10、1 h,腹腔注射 0.6%冰醋酸溶液 0.2 ml/只,观察 20 min 内扭体次数,并计算镇痛率。镇痛率(%)=(空白对照组扭体次数-给药组扭体次数)/空白对照组扭体次数100%2.6 统计学处理数据均采用 SPSS10.0 for Windows 统计分析软件分析处理,数据用s 表示,两组之间的比较用 Dunnett t 检验。3 结果3.1 对醋酸致小鼠毛细血管通透性增加的影响 结果如表 1 所示,野生与栽培头花蓼对醋酸引起的腹腔毛细血管通透性增高具有明显的抑制作用,二者相应剂量之间没有明显差异。表 1 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(略)3.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 结果见表
11、2,野生与栽培头花蓼对二甲苯所致小鼠耳肿胀具有明显的抑制作用,野生与栽培之间没有明显差异。表 2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(略)3.3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响 结果如表 3 所示,野生与栽培头花蓼对角叉菜胶所致小鼠足肿胀均有一定的抑制作用,野生与栽培同种剂量之间没有明显的作用差异。表 3 对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响(略)3.4 对小鼠棉球肉芽肿的影响 结果如表 4 所示,野生与栽培头花蓼对小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用,且相同剂量的野生与栽培作用之间没有明显的差异。表 4 对小鼠棉球肉芽肿的影响(略)3.5 对醋酸引起的扭体反应的影响 结果如表 5 所示,野生与栽培头花蓼对角叉菜
12、胶所致小鼠足肿胀均有一定的抑制作用,野生与栽培同种剂量之间没有明显的作用差异。表 5 对醋酸引起的扭体反应的影响 (略)4 讨论苗药头花蓼是贵州苗族民间常用药物,为贵州六大苗药之一,其单方制剂也得到了广泛的临床应用1 。但由于野生资源有限,为了进行资源的有效保护和充分利用,进行规范的 GAP 种植是有效的途径之一。有学者对头花蓼的化学成分进行研究,同时在野生与栽培以及不同产地的品种质量控制方面也进行了相关的研究。研究发现不同产地的野生与栽培之间在挥发油成分,没食子酸含量以及总黄酮的含量均有明显的差异。即使是作为道地产区的贵州,在不同的区域范围内其化学成分也具有明显的差异25 。在主要药效方面,
13、也有人进行了头花蓼抗炎与镇痛研究6 ,但在野生与栽培药效质量评价的对比研究方面,相关的报道还比较少。本研究通过对 GAP 种植基地地区的野生与栽培进行药效质量的对比评价,发现在主要药效方面,野生与栽培没有明显的差异,对炎症和疼痛具有明显的抑制作用,为头花蓼的 GAP 种植提供了进一步的药效学评价资料。【参考文献】1张艳丽,杨玉琴,高言明,等. 贵州不同产地、不同物候期头花蓼中总黄酮的动态变化研究J. 中国中药杂志,2003,28(9):889.2王祥培,万德光,王祥森,等.不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的含量分析J. 时珍国医国药,2006,17(9):1713.3王祥培,万德光,吴红梅.川产野生与栽培头花蓼挥发油的 GC-MS 分析J. 贵阳中医学院学报,2007,29(5):61.4李勇军,骆宏丰,王永林,等.头花蓼黄酮类化学成分的研究J. 中国药学杂志,2000,35(5)300.5高玉琼,代泽琴,刘建华,等.头花蓼挥发性成分研究J. 生物技术,2005,15(3):55.6刘明,罗春丽,张永萍,等.头花蓼、飞龙掌血的镇痛抗炎及利尿作用研究J. 贵州医药, 2007,31(4):370.