1、呼吸科病房肠杆菌科细菌耐药性分析及产ESBLs 菌株的检出【摘要】 目的 检测呼吸科病房肠杆菌科细菌的耐药性和产 ESBLs 的情况。方法 收集 85 株临床分离菌株采用 MIC 检测耐药性，采用筛选试验和确证试验检测 ESBLs。结果 亚胺培南的敏感性最高，三代头孢的耐药性最高，ESBLs 检出率为 41.2%。结论 呼吸科病房肠杆菌科细菌产ESBLs 比率较高，对三代头孢耐药率高，建议使用亚胺培南和酶抑制剂类抗生素。 【关键词】 肠杆菌科 耐药性 ESBLs随着现代医学的迅速发展和抗生素的广泛应用，细菌的耐药性问题日趋严重，呼吸科病房作为医院的主要科室病房，病原菌耐药现象尤为突出。其中，超
2、广谱 -内酰胺酶（extended spectrum -lactamases,ESBLs）因其底物范围广，传播速度快，引起了广泛关注。肠杆菌科细菌是主要的产 ESBLs 菌，易引起医院感染的爆发流行。为了解呼吸科病房肠杆菌科细菌的耐药性及产 ESBLs 的情况，笔者收集了我院呼吸科病房 2006 年 1 月2007 年 6 月检出的肠杆菌科细菌 85 株，进行分析总结。1 材料与方法1.1 菌株来源 从我院 2006 年 1 月2007 年 6 月呼吸科病房送检的痰液、尿液、血液、胸腹水和分泌物等感染性标本中，分离到肠杆菌科细菌 85 株，其中肺炎克雷伯菌 30 株，大肠埃希菌 22 株，铜绿
3、假单胞菌 20 株，不动杆菌属 6 株，奇异变形杆菌 2 株，沙雷氏菌 3 株，嗜麦芽窄食单胞菌 2 株。1.2 质控菌株 由卫生部临床检验中心提供，包括大肠埃希菌（ATCC25922）和肺炎克雷伯菌（ATCC700603） 。1.3 培养和鉴定及药敏试验方法 细菌培养按照全国临床检验操作规程第 3 版进行，采用英国 SENSITITRE 荧光快速微生物鉴定/药敏分析系统鉴定细菌和抗生素敏感试验，按照美国临床实验室标准委员会（NCCLS）2004 版药敏指南为结果判断标准。1.4 初筛试验 按 NCCLS 初筛标准，在纸片法药敏试验中，只要符合下列任何指标:头孢他啶22mm，头孢曲松25mm，
4、头孢噻肟27mm，氨曲南27mm，即为产 ESBLs 可疑菌株。1.5 纸片确证试验 用头孢他啶（CAZ,30g/片）和头孢他啶加克拉维酸（CAZ/CLV,30g/10g） ；头孢噻肟（FTX, 30g/片）和头孢噻肟加克拉维酸(FTX/CLV,30g/10g),分别测量两种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径，加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌环直径相比5mm 可确诊为 ESBLs 菌株。1.6 统计学处理 对产 ESBLs 和非产 ESBLs 菌株进行 2 检验。2 结果2.1 产 ESBLs 阳性率 肠杆菌科细菌 85 株共检出产 ESBLs 菌 35株，产酶率 41.2%。其中，肺炎克雷伯菌产
5、酶株 14 株（产酶率 46.7%） ，大肠埃希菌产酶株 9 株（产酶率 40.9%） ，铜绿假单胞菌产酶株 8 株（产酶率 40%） ，不动杆菌产酶株 2 株（产酶率 33.3%） ，其余产酶株为变形杆菌 1 株，沙雷氏菌 1 株。2.2 产 ESBLs 菌与非产 ESBLs 菌药敏结果比较 采用微量稀释法检测临床常用 18 种抗生素的最低抑菌浓度（MIC） ，结果表明产 ESBLs 菌的 MIC 均高于非产 ESBLs 菌，对 -内酰胺类抗生素有较高的耐药率，产酶菌对 18 种抗生素的耐药率均明显高于非产酶菌。见表 1。表 1 产ESBLs 菌（n=35）和非产 ESBLs 菌 (n=50
6、) 耐药率比较3 讨论超广谱 -内酰胺酶(ESBLs)又称氧亚氨 -内酰胺酶,是以能灭活窄谱和广谱头孢菌素、单环类抗生素及抗 G-杆菌青霉素等抗生素为特征的 -酰胺酶，属于 Ambler 分类的 A 类，按 Bush 分类属 2be 群1 ，大多数是 TEM-1、TEM-2、SHV-1 酶的突变体。自 1983 年在欧洲首次发现，世界各地均有产 ESBLs 菌流行的报道。研究表明 ESBLs 多由质粒介导，能通过接合、转导和转化等方式使耐药基因在菌属间广泛传播，有较广的水解底物谱。ESBLs 主要由肠杆菌产生，以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为代表，本次调查 ESBLs 阳性率为 41.2%，与一些
7、地区报道的结果略有差异2 。产 ESBLs 菌株往往有多重耐药现象，ESBLs 的耐药基因编码经常与其他的耐药基因联合而使耐药性更加复杂。例如，与氨基糖苷类及磺胺类药物的耐药基因联合，而同时出现对氨基糖苷类及磺胺类药物耐药3 。本次研究结果表明产 ESBLs 菌株除对亚胺培南和阿米卡星的耐药率相对较低外，对三代头孢菌素类、单酰胺类（氨曲南）及广谱青霉素类（哌拉西林）均呈高度耐药。林尤仕等推荐使用碳青酶烯类（如亚胺培南） 、-内酰胺酶类抗生素加酶抑制剂、头孢类抗生素（如头孢西丁） 、其他类型的抗生素（阿米卡星）等治疗产 ESBLs 菌引起的感染4 。产ESBLs 菌株体外药敏试验显示并非对所有青
8、霉素类及头孢类抗生素耐药，但 NCCLS 规定上述抗生素及单环 -内酰胺类抗生素均应报告耐药。调查中发现，同一菌株常会出现一定时期的爆发流行，应引起重视。可定期进行病房空气消毒和院内环境消毒，强化护理清洁工作，减少致病菌传播。已感染患者应及时进行细菌鉴定和药敏试验，合理使用抗生素，并对 ESBLs 进行动态监测，对临床抗感染治疗具有重要意义。【参考文献】1 朱卫民，钱元恕.-内酰胺酶动力学研究进展及临床意义.国外医药抗生素分册，1998，19(6)：445.2 马越，李景云，张新妹.2002 年临床常见细菌耐药性监测.中华检验医学杂志，2004，27：38-45.3 王力红，石海鸥，张京利.重症监护病房医院感染前瞻性研究.中华医院感染学杂志，2002，12（4）：268-270.4 林尤仕，陈海.临床分离细菌耐药性监测及治疗对策.中国热带医学，2003，3（2）：208-209.
