1、姜黄素固体分散体对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用作者：韩刚，万红，翟冠钰，范颖【摘要】 目的研究姜黄素固体分散体对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法以聚乙烯吡咯烷酮（K30）为载体制备姜黄素固体分散体。将 50 只雄性昆明种小鼠随机分成 5 组：正常对照组、四氯化碳肝损伤模型组、姜黄组、姜黄素固体分散体低、高剂量组。采用腹腔注射四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型，测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT） 、天冬氨酸氨基转移酶（AST） ；测定肝脏丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力；计算肝指数。结果与四氯化碳模型组比较，姜黄素固体分散体组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨
2、基转移酶活力明显降低，姜黄素固体分散体能有效降低四氯化碳所致小鼠急性肝损伤，改善肝细胞损伤程度。结论姜黄素固体分散体对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有显著的保护作用。 【关键词】 姜黄素 固体分散体 四氯化碳 急性肝损伤 聚乙烯吡咯烷酮Abstract:ObjectiveTo study the effects of curcumin solid dispersion on acute liver injury of mice induced by carbon tetrachloride (CCl4).MethodsThe curcumin solid dispersion was prepar
3、ed with excipient of polyvinylpyrrolidone. Fifty mice were randomly divided into five groups: control group, carbon tetrachloride group, curcumin group, low and high dosage of curcumin solid dispersion groups. The acute liver injury model was established by intraperitoneal administered carbon tetrac
4、hloride. The contents of alanine aminotransferase (ALT), asparate aminotransferase (AST) in serum and the activity or content of superoxide dismutase (SOD) and malondialdehtyde (MDA) in liver were measured to evaluate the protective effect of curcumin solid dispersion.ResultsThe curcumin solid dispe
5、rsion significantly decreased serum ALT activity, liver MDA content and SOD activity in CCl4 poisoned mice.ConclusionThe curcumin solid dispersion protects mice against liver injury induced by CCl4.Key words: Curcumin; Solid dispersion; Carbon tetrachloride; Acute liver injury; Polyvinylpyrrolidone姜
6、黄素为中药姜黄中的主要成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗肺纤维化、降血脂等多种药理活性1 。但姜黄素难溶于水，体内吸收差，生物利用度低，限制了姜黄素在临床上的应用。利用固体分散体技术，选用不同的高分子载体将姜黄素制成固体分散体，可以增加姜黄素的溶解度，提高其生物利用度2 。本研究以聚乙烯吡咯烷酮（K30）为载体制备姜黄素固体分散体，通过四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型来检测姜黄素及姜黄素固体分散体对小鼠急性肝损伤的保护作用，对姜黄素固体分散体的作用机制进行探讨。1 材料与仪器1.1 动物1822 g 昆明种健康雄性小鼠，华北煤炭医学院动物中心提供。动物合格证：SYXK(冀) 2007-0017。
7、1.2 试剂与药品丙氨酸氨基转移酶（ALT） 、天冬氨酸氨基转移酶（AST） 、超氧化物歧化酶（SOD） 、丙二醛（MDA）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；姜黄素上海三爱思试剂公司生产；聚乙烯吡咯烷酮、四氯化碳均购自北京化学试剂公司。1.3 仪器TU-1810 可见-紫外分光光度计(北京普析通用公司)； RE-52A 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂） ；SK-1 型快速混匀器（江苏医疗仪器厂） ；KDC-16H 高速离心机（科大创新公司） ；KQ-100 超声波清洗器（昆山市超声仪器公司） ；电热恒温水浴锅（上海器械厂） 。2 方法 2.1 固体分散体的制备采用溶剂法制备姜黄素固体分散体
8、，将姜黄素与聚乙烯吡咯烷酮（K30）按 14 的比例溶于无水乙醇，超声振荡 5 min，转入旋转蒸发仪中除去溶剂乙醇即得桔红色姜黄素固体分散体3 。2.2 动物分组与给药取雄性昆明种小鼠 50 只，随机分成 5 组，每组 10 只：正常对照组、四氯化碳致肝损伤模型组(模型组） 、姜黄素组、姜黄素固体分散体低剂量组、姜黄素固体分散体高剂量组。固体分散体低剂量组所给姜黄素与姜黄素组剂量一致。正常对照和模型组喂食普通饲料，姜黄素组、姜黄素固体分散体组分别用 0.5%的羧甲基纤维素钠配成混悬液，固体分散体低剂量组和高剂量组按 100 和 200 mg/kg 的剂量灌胃给药，给药 1次/d，灌胃前后 1
9、 h 禁食禁水，7 d 后除正常对照组外，各组小鼠均腹腔注射 0.1%四氯化碳花生油溶液，剂量为 10 ml/kg，18 h 后由小鼠眼球后静脉取血，并取标本做相关测定4 。2.3 检测指标血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT） 、天冬氨酸氨基转移酶（AST）含量测定按照试剂盒说明书操作步骤进行。取小鼠肝脏，称重，计算肝指数。一部分肝脏用冷的生理盐水制成 10%肝匀浆，用于检测肝组织中超氧化物歧化酶的活力、肝脏匀浆中 MDA 的含量。2.4 统计方法采用 SPSS11.5 统计软件，对实验数据进行单因素方差分析，数据均以 s 表示。3 结果3.1 姜黄素固体分散体对小鼠肝指数的影响与正常对照组比较，
10、模型组肝指数明显升高（P0.05） ；与模型组比较，给予姜黄素各组小鼠肝指数明显降低（P0.05） ；与姜黄素组比较，姜黄素固体分散体组有降低肝指数的趋势，但不具有统计学意义。结果见表 1。表 1 姜黄素固体分散体对小鼠肝指数的影响（略）3.2 姜黄素固体分散体对小鼠血清中 ALT 和 AST 的影响与正常对照组比较，模型组小鼠血清 ALT 和 AST 活性显著升高（P0.01） ，说明造模成功；与模型组比较，给予姜黄素各组小鼠血清 ALT 和 AST 明显降低（P0.01） ；与姜黄素组比较，姜黄素固体分散体组小鼠血清 ALT 和 AST 活性明显降低（P0.05） 。实验结果显示，姜黄素固
11、体分散体对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。结果见表 2。表 2 姜黄素固体分散体对肝损伤小鼠血清 ALT、AST 的影响（略）3.3 姜黄素固体分散体对小鼠肝组织中 SOD、MDA 的影响与正常对照组比较，模型组小鼠肝脏的 MDA 含量显著升高（P0.01） ，肝脏 SOD 活性显著降低（P0.01） ；与模型组比较，3个给药组均能显著地降低血清及肝脏 MDA 含量及升高肝脏 SOD 活性（P 0.05） ；与姜黄素组比较，高剂量组的 MDA 含量显著降低（P0.05） ，SOD 活性显著升高（P0.05） 。结果见表 3。表 3 姜黄素固体分散体对肝损伤小鼠肝匀浆 SOD、MDA
12、 的影响（略）4 讨论四氯化碳可以通过细胞色素的还原脱氢作用被代谢成为三氯甲基自由基，引发肝细胞脂质过氧化，从而导致肝细胞变性坏死，使肝细胞内 ALT 大量释放，导致血清中 ALT 水平升高5 。姜黄素具有二-芳基庚二烯铜结构，有较强的抗自由基的能力，是良好的自由基清除剂6 。但姜黄素难溶于水，体内不易吸收，影响了姜黄素的治疗效果。以聚乙烯吡咯烷酮为载体将姜黄素制备成固体分散体后，姜黄素的溶解度增加3 ，提高了姜黄素在小鼠体内的药理活性。实验结果表明，姜黄素组、姜黄素固体分散体低剂量组、姜黄素固体分散体高剂量组均能明显降低四氯化碳所致急性肝损伤模型小鼠血清ALT 和 AST 活性、降低肝脏的
13、MDA 含量和提高 SOD 活性；固体分散体低剂量组与姜黄素组给予的姜黄素剂量一致，但疗效显著优于姜黄素组；固体分散体高剂量组疗效又显著好于低剂量组，呈现出量-效关系。 姜黄素、姜黄素固体分散体对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤均具有保护作用，姜黄素固体分散体组对小鼠急性肝损伤的保护作用明显优于姜黄素组。【参考文献】1汪海慧，成 杨.姜黄素的药理作用的研究进展J.上海中医药大学学报，2007，21（6）：73.2张惠平，向大雄，罗杰英，等.固体分散技术在药剂学中的研究进展J.中国药学杂志，2007，42（11）：807.3韩刚,王传胜,张永,等.固体分散体提高姜黄素溶出度的研究J.中国中药杂志,2007,32(7):637.4张桥，王心如，周宗灿，等.毒理学基础，第 4 版M.北京:人民卫生出版社,2003:284.5Walsh K, Alexander G. Alcoholic Liver Disease. Postgrae Med J.2000,76:280.6梁广，田吉来，邵丽丽，等.姜黄素的构效关系及以其为先导化合物的抗肿瘤研究J.化学通报，2008，71（2）：110.
