1、蒙藏药制剂中肉豆蔻、檀香及其混合物提取工艺研究作者：杜建喜 郝心敏 黄海波 武宇科 杨玉梅【摘要】 目的：在蒙药制剂檀香与肉豆蔻组对用药时，对混合提取工艺问题进行研究。方法：采用单独和混合两种提取方式对提取物进行色谱及相关分析比较，并对提取工艺过程细节进行观察分析。结果：两组分单独提取与混合提取的提取物成分存在差异，而且目前采取的收得挥发油后水提液直接浓缩工艺提取法，使提取物中的易挥发脂性部分蒸发损失。结论：对制剂提取工艺采用间歇式方法，先收取析出的脂状物，再进行浓缩较为合理。 【关键词】 蒙药;肉豆蔻;檀香;脂状物;提取工艺Abstract Objective: To explore and
2、 discuss the mixing extraction techniques of nutmeg and sandalwood in traditional Mongolian and Tibetan medicine while they are used together for medication. Methods: An analytic comparison of extraction through mixing and separate extraction methods was made with thin-layer chromatography, and the
3、detailed process of extraction were observed and analyzed as well. Results: There was difference in the extraction content between mixing extraction and separate extraction, and the direct extraction techniques prevailingly in use at present was apt to cause the loss of low-melting-point volatile li
4、pid in the process of extraction. Conclusion: It is reasonable to accept preparation technique in interval method, with lipid matter collected first and then with preparation concentrated.Key words TRADITIONAL medicine; Sandalwood; Nutmeg; Extraction process; Lipid membranes肉豆蔻与檀香两味含芳香性挥发油中药材，在蒙藏医药制
5、剂处方中常同时应用，如冠心七味片、三味檀香颗粒、赞丹-3 汤、二十五味驴血丸、十味丛菔散等。现制剂考虑到工艺的简洁性，在含肉豆蔻与檀香的复方制剂中对两味药材进行混合提取。本实验通过对檀香肉豆蔻进行单味和混合(复方)提取方法，对各组分的提取物用薄层色谱法和气相色谱法进行成分比较，观察和分析混合提取与单味提取有无差别。1 材料与仪器1.1 药材与试剂 肉豆蔻、檀香购于安徽亳州药材市场，经包头药品检验所中药室检验符合药典标准。薄层色谱硅胶(化学纯，青岛海洋化工厂)，其余试剂均为分析纯。1.2 仪器 RE-52C 型旋转蒸发器(巩义市英峪予华仪器厂)，GC122气相色谱仪(上海禾工科学仪器有限公司)。
6、2 方法檀香、肉豆蔻单独及混合物的提取。分别取檀香、肉豆蔻各 100 g，按 2005 年版药典附录 XD 挥发油提取方法提取，至提取器中油量不再增加，停止加热，分离挥发油备用。剩余部分水煎提取 2 次，每次热过滤，滤液密闭处理，静置过夜。在静置过夜的过程中发现在肉豆蔻及混合提取物溶液中漂有黄色脂状物质，这种物质在连续提取浓缩过程中没有发现，因此将其分离备用。水提液用旋转蒸发仪浓缩、干燥，得到水提浸膏备用。药渣用 95 %乙醇加热回流提取 2 次，热过滤后合并滤液，旋转蒸发仪浓缩、干燥，得醇提膏备用。同时将檀香和肉豆蔻各 100 g组成混合物，照前法操作，得混合物的挥发油、脂状物、水提膏及醇提
7、膏。按上述方法均提取 2 次取平均值。3 结果3.1 挥发油提取率 檀香、肉豆蔻混合提取与单味提取相比其挥发油提取率略下降，推测两种物质混合加热提取时生成沸点较高物质，其不能随水蒸气蒸发。挥发油提取率=挥发油(mL)投料药材质量(200 g)100 %。见表 1。表 1 檀香、肉豆蔻单味与混合挥发油提取率药材质量(g)挥发油(mL)提取率(%)檀香3.2 提取总得膏率 按分别得到的脂状物、水提膏、醇提膏计算总得膏率，总得膏率=总提取质量(g)投料药材质量(200 g)100 %。混合提取总得膏率(33.7 %)明显高于等量单味提取总得膏率(19.4 %)，结果提示混合提取时发生了增溶现象，即增
8、加了药物有效部位的溶出。由于中药的起效功用往往在于其复方的运用，因此对于含有檀香和肉豆蔻的复方，可以采用两种药物共煎的提取工艺以增加药物有效成分的溶出。见表 2。表 2 檀香、肉豆蔻单味与混合提取总得膏率3.3 檀香、肉豆蔻单味和混合提取物 TLC 分析 取檀香、混合物和肉豆蔻的挥发油各 0.1 mL，分别用 10 mL 氯仿溶解，标记 1、2、3 号溶液，按照薄层色谱法1点样于同一硅胶 G 薄板上,以正己烷氯仿醋酸乙酯(1231)为展开剂展开,结果如图 1-A;取檀香、混合物和肉豆蔻的醇提膏各 0.1 g，分别用 10 mL 甲醇溶解，照前法点样标记 4、5、6，以氯仿苯(8520)为展开剂
9、展开,结果见图 1-B;取混合物和肉豆蔻的水提液脂状物(漂浮物)各 0.1 g，分别用 10 mL 氯仿溶解，点样，标记7、8 号(檀香水提液没有脂状物)以环己烷氯仿(32)为展开剂展开,结果见图 1-C。由图 1-A 可见混合物提取挥发油与檀香单独提取挥发油色谱图比较其 Rf 值有较大改变，而肉豆蔻单独提取挥发油的各斑点都能在混和提取物部位中相应位置显示，提示混合提取肉豆蔻挥发油各组分极性未见显著变化，而檀香挥发油组分极性发生明显改变。由图 1-B 可见醇提物中混合提取的斑点与单独提取斑点也有不同，混合提取有新的斑点生成。由图 1-C 看出肉豆蔻和混合水提取物的脂状成分与提取的挥发油的成分斑
10、点不同，提示有新组分生成。图 1 挥发油(A)、醇提物(B)、水提脂状物(C)TLC 图谱A：1-檀香，2-混合物，3-肉豆蔻B：4-檀香，5-混合物，6-肉豆蔻C：1-檀香，2-混合物，3-肉豆蔻，7-混合物脂状物，8-肉豆蔻脂状物3.4 肉豆蔻及其混合物挥发油 GC 测定 GC 条件：聚乙烯醇 20 %毛细管柱，柱规格 20 m;载气为高纯氦气，流量 40 mL/min;检测器 FID，氢气 40 mL/min，Air 400 mL/min，温度为 100 ;进样器不分流，进样口温度 130 ，进样量 3 L;柱温为恒温 100 ,保温 20 min。测定方法2：用微量进样器分别取肉豆蔻、
11、混合物挥发油 50 L，置于 10 mL 容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀。吸取 3 L 注入气相色谱仪，测定结果显示混合提取的挥发油组分与肉豆蔻挥发油组分相比有明显不同。(A)肉豆蔻挥发油,(B)混合提取挥发油 3.5 提取过程的连续与间歇形式结果对比 在中药生产中，提取是一个重要的操作单元。但是在生产过程中，檀香、肉豆蔻药材提取工艺通常是在加热下连续进行的提取操作。在本次实验中，对檀香、肉豆蔻及其混合物分别采取连续提取浓缩和提取液冷却静置过夜，分离浅黄色脂状物后再行浓缩处理(即间歇式)提取工艺操作的结果比较见表 3。在连续操作浓缩情况下，原本溶解在热水中的浅黄或黄色脂状物质大部分随水蒸气蒸
12、发而难以收集到。非连续操作工艺收取了水提液，冷却后析出的黄色脂状漂浮物，是可溶于热水且密度低于水的脂性组分。将该部分脂状物加入制剂，在大鼠心肌缺血药效学实验中，混合提取加脂组与模型组比较可明显减少心肌坏死面积(P0.05)，去脂组和单脂组心肌损伤的保护作用不明显(论文另行发表)。由此可见，连续提取工艺明显地损失了这一部分成分，从提高药效角度出发，该工艺方式应予改进。表 3 连续提取与间歇提取工艺的水提干膏得率比较从上述肉豆蔻与檀香两味药材分别提取和混和提取的对比，以及混和提取过程的连续与间歇方式的比较，可以看到这两味药在不同的提取方式、方法中结果有很大差别。采用混合提取工艺，总提取率高于分别提
13、取;间歇提取得膏率大于连续提取得膏率;通过对檀香、肉豆蔻单味与混合提取物的 TLC、GC 分析，可见混合提取后发生了一些明显的组分变化，这些组分的具体结构尚需通过 GC-MS 来确定。若在质量监测方面仍用檀香单提挥发油来检验复方提取物，则所含组分很难相互对应，尤其在有其他药材混合时更为复杂;所以在对中药材的制剂化研究中应重视混合提取后成分变化问题，不能简单地以单味药物的组分在药剂工艺和标准中作为对照或监测指标，一定要以实际分析结果与监测为依据，确实制定准确合理的工艺与标准检测方法，而细致的实践工作是获得合理工艺与监测方法的唯一途径。【参考文献】1 巴俊杰，陈其秀，赵冬冬，等.蒙药乌兰温都顺-7 的薄层色谱鉴别J.中国民族医药杂志，2005,5(3):28.2 王莹,杨秀伟,陶海燕，等.商品肉豆蔻挥发油成分的 GC-MS 分析J.中国中药杂志,2004,29(4):339.
