1、蒙药索布如札特巴提取物的抗氧化活性研究作者：敖恩宝力格，王金妞，邰丽华【摘要】 目的研究蒙药索布如札特巴的抗氧化作用。方法采用无水乙醇和蒸馏水分别对蒙药索布如札特巴进行超声波提取，检测其提取物对于二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基的清除作用，以及对 - 胡萝卜素-亚油酸氧化体系的抑制作用。结果索布如札特巴乙醇提物和水提取物对 DPPH 自由基有较好的清除作用，其达到 50%清除率所需浓度IC50 值分别为 0.8 g/L 和 1.2 g/L；而且对 - 胡萝卜素-亚油酸氧化体系有明显的抑制作用，其 IC50 值分别为 1.1 g/L 和 1.5 g/L。结论索布如札特的乙醇提取物及水提取物具有抗
2、氧化活性，80%乙醇提取物的抗氧化作用明显高于水提取物。 【关键词】 蒙药； 索布如札特巴； 抗氧化性蒙药索布如札特巴是由石榴、豆蔻、广枣等 8 味蒙药材组成。主要功能是祛寒、除湿；用于痰、寒、气三型的心脏病的治疗1 ，但迄今未见对其药理学方面的研究报道。在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种自由基和活性氧，过多的活性氧与自由基通过损伤生物大分子，破坏细胞的结构和功能，促使疾病的发生与发展。研究发现，氧自由基与衰老、肿瘤、炎症、动脉硬化、肝和肺疾病等发生密切相关。抗氧化剂由于能清除人体的这些自由基而具有预防癌症、心血管疾病等疾病以及抗衰老的作用2，3 。而人工合成的抗氧化剂如 BHA 等可导致
3、 DNA 的损伤及恶性肿瘤的发生而其安全性受到质疑，因此高效、安全的天然抗氧化剂的提取及其应用无疑具有重要的意义。蒙药是中华民族的瑰宝,历史悠久，在治疗疾病中发挥了独具特色的作用，但就其开发利用来讲，还比较落后。本文旨在通过测定蒙药索布如札特巴抗氧化活性，为合理地开发利用这一宝贵的民族药物提供参考，并为开发天然抗氧化剂提供新的实验依据。1 材料与仪器蒙药索布如札特巴由内蒙古中蒙医院提供。二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基、-胡萝卜素、亚油酸由美国 sigma 公司提供。2,6- 二叔丁基对甲酚(BHT)和抗坏血酸（Vc） ，无水乙醇，吐温 40，氯仿等均为国产分析纯试剂。实验用水为二次石英亚沸蒸
4、馏水。主要仪器有 721 型分光光度计、KQ3200V 型超声波清洗器、FA2104N 电子天平等。2 方法2.1 提取方法准确称取样品 5.00 g 于 100 ml 锥形瓶中，加入 80%浓度的乙醇（或蒸馏水）50 ml，浸泡 6 h，超声辅助提取（12 kHz，10 min） ，过滤，滤液用冷冻干燥仪干燥，称重，然后用浓度为 10%的DMSO（dimethylsulfoxide）溶液使其溶解并用蒸馏水稀释至一定体积。2.2 DPPH 自由基的清除活性的测定 DPPH 自由基溶解于无水乙醇配成 0.05 mmol/L 的溶液。将 0.1 ml 不同浓度的蒙药提取物溶液加入 4 ml DPP
5、H 溶液中，迅速混匀，在黑暗的环境中放置 60 min 后在 517 nm 处测定溶液的吸光度。以抗坏血酸为对照。样品清除自由基的能力由下面的公式得出：抗氧化率（%）=(Ac-As)/Ac100%。式中 Ac 及 As为 60 min 后空白及待测样的吸光值。2.3 - 胡萝卜素抗氧化率的测定将 0.15 mg - 胡萝卜素溶解于 15 ml 氯仿，加入 30 mg 亚油酸和 200 mg 吐温 40，然后于 50 旋转真空干燥。加入 75 ml 无氧蒸馏水，于超声波中形成乳化液。取 0.1 ml样品乙醇液与 5 ml 乳化液于试管中混合，以不加提取物样品的等量乙醇代替与乳化液混合作为空白样。
6、在 45 保温，于波长为 460 nm 处测定吸光度。同时采用 BHT 进行对照实验。抗氧化率用下式进行计算。抗氧化率（%） = 100(C-S)/C 。式中, C =ln(Ac0/Ac60)/60 ；S =ln(As0/As60)/60 ；C 为对照吸光值的降低率，S 为样品吸光值的降低率；Ac0 与 As0 分别为 t = 0 min 时对照与样品的吸光度；Ac60 与 As60 分别为 t = 60 min 时对照与样品的吸光度。3 结果3.1 DPPH 自由基清除活性分析 DPPH 自由基是比较稳定的有机物自由基，广泛应用于测定纯抗氧化剂或植物提取物的体外抗氧化活性46 。本研究以抗坏
7、血酸为参照，利用该法对比了两种提取物的 DPPH自由基清除效果。如图 1 所示，抗坏血酸及索布如札特巴 80%乙醇提取物和水提取物的 DPPH 自由基清除能力随其浓度升高而显著增强，且 80%乙醇提取物的抗氧化作用明显强于水提取物。在本试验条件下，抗坏血酸的半数抑制浓度(IC50)约为 0.4 g/L，索布如札特巴 80%乙醇提取物的 IC50 约为 0.8 g/L，而水提取物的 IC50 约为 1.2 g/L，可见索布如札特巴的乙醇及水提取物具有较好的抗氧化作用。3.2 - 胡萝卜素 -亚油酸氧化体系的抑制分析 - 胡萝卜素氧化抑制试验法主要评价的是抗氧化物质在乳化脂质体系中的抗氧化能力。图
8、 2 为采用 - 胡萝卜素氧化抑制试验法测定的索布如札特巴 80%乙醇及水提取物与抗氧化剂 BHT 抗氧化效果的对比。在脂质体系中醇溶性的 BHT 是公认的强抗氧化剂，在本试验条件下，BHT 也呈现出极强的抗氧化性，其 IC50 约为 0.8 g/L。而索布如札特巴提取物同样表现出优良的抗氧化活性，其中 80%乙醇提取物的 IC50 约为 1.1 g/L，而水提取物的 IC50 约为 1.5 g/L。4 讨论索布如札特巴是蒙医临床上用于治疗痰、寒、气三型的心脏病1 ，其疗效在几百年的应用中得到了证实。本研究首次对索布如札特巴进行抗氧化作用检测。结果表明，索布如札特巴 80%乙醇提取物及水提取物
9、对 DPPH 自由基有很好的清除作用，而对 - 胡萝卜素也有较好的氧化抑制作用，且这两种作用与提取物的浓度呈正比，其中尤以索布如札特巴乙醇提取物的抗氧化活性强，接近于抗坏血酸与 BHT 的抗氧化活性，这证明索布如札特巴中抗氧化活性成分在乙醇中的溶解性较好。以上结果提示了索布如札特巴提取物可能在抗炎症、抗高血脂、抗凝、抗衰老等方面有一定作用。但具体是哪种物质对抗氧化起主要作用，尚需进一步的研究。【参考文献】1武绍新. 蒙医成方选 M. 呼和浩特：内蒙古人民出版社，1984：309.2Vimala S, Adenan MI. Malaysian tropical forest medicinal
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