1、母牛分枝杆菌菌苗预防尖锐湿疣复发及其对细胞免疫的影响【摘要】 目的 探讨母牛分枝杆菌菌苗预防尖锐湿疣复发的效果，及其对细胞免疫的影响。方法 治疗组采用肌肉注射母牛分枝杆菌菌苗联合激光治疗,对照组仅用激光治疗。采用双抗体夹心 ELISA 技术检测尖锐湿疣(CA)患者(治疗组和对照组)治疗前后血清 IL10 、IFN 水平。结果 和治疗前相比，治疗后治疗组 IL10 水平明显降低，IFN 水平明显升高 (P0.05)；与对照组比较，差异有显著性；而对照组治疗前后 IL10 、IFN 水平无明显改变(P0.05)；治疗组复发率为13.8%，对照组为 42.9%，差异有显著性 (P0.05)。结论 母
2、牛分枝杆菌菌苗能有效提高尖锐湿疣患者的细胞免疫功能，减少该病的复发率。【关键词】 母牛分枝杆菌菌苗；尖锐湿疣；细胞免疫 Abstract:Objective To study the effect of Mycobacterium vaccine on the patients with condyloma acuminatum (CA) and cellular immunity. Methods Patients of CA were randomly divided into treatment group (M.vaccine and laser group) and control
3、group (laser group). Doubleantibody sandwich ELISA (DAS ELISA) was used to study the serum levels of interleukin10 (IL10) and interferongamma (IFN) in CA patients (before and after treatment with or without vaccine). Results After treatment, the levels of IL10 in the treatment group were significant
4、ly decreased while the levels of IFN were significantly increased (P0.05). There was no significant difference in the control group (P0.05). The effect on the treatment group was much better than that on the control group (P0.05). The relapse rates of the treatment group and the control group were 1
5、3.8% and 42.9% respectively. And there was significant difference between them (P0.05).Conclusion Vaccae could improve the cellular immune function of patients with CA, and decrease the relapse rate of CA. Key words:Mycobacterium vaccine; condyloma acuminatum (CA); cellular immunity 尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒
6、(HPV)感染所致，在 HPV 感染的各个阶段均存在免疫功能异常，尤其是细胞免疫功能的异常1 。有研究表明 CA 患者存在着明显的 Th1 和 Th2 细胞因子失衡2,3 。母牛分枝杆菌菌苗(商品名微卡) 属快生长非结核分枝杆菌，是一种具有多种免疫调节功效的新型免疫调节剂，常用于治疗肺结核、哮喘、肿瘤等疾病。本实验通过研究 CA 患者经微卡治疗后血清 Th1/Th2 型细胞因子水平的变化，探讨微卡治疗 CA 的作用机制，为微卡的临床应用提供一定的理论依据。我科在 2005 年 6 月2007 年 6 月采用肌肉注射微卡联合激光治疗 CA 患者 100 例，收到较好的临床效果，现报告如下。 1
7、材料与方法 1.1 病例入选标准 全部病例均为皮肤性病科门诊符合卫生部制订的尖锐湿疣诊断标准的初诊患者，共 100 例，其中男 58 例，女 42 例；已婚 63 例，未婚 37例；年龄 19-64 岁，中位年龄 37 岁。病程 7 d 至 6 个月。发病部位：男性多位于冠状沟、阴茎头、包皮及系带等处；女性多位于大小阴唇、阴道口、尿道口及肛周。皮损形态多为乳头状、丘疹状、菜花状等，大小约为 0.55 cm。排除标准：(1)1 个月内曾系统应用免疫抑制剂者；(2)1 个月内曾系统应用皮质类固醇激素者；(3)1 个月内参加过研究药物实验者；(4)1 周内发生发热或外伤等应激情况者；(5)患有严重肝
8、、肾、血液系统及其它疾病者；(6)有营养不良，抑郁症或乙醇中毒，影响治疗实施者。将患者随机分成治疗组和对照组。治疗组:65 例，其中男 44 例，女 21 例；对照组 35 例，其中男 14 例，女 21 例。两组的年龄、性别等一般情况差异无显著性 (P0.05),具有可比性。 1.2 治疗方法 治疗组用 CO2 激光手术去除疣体后，肌肉注射微卡注射液，每次 1支，每周 1 次，2 个月为 1 个疗程。对照组用 CO2 激光手术去除疣体，但不采用微卡注射。两组病人在治疗期间要求每周复诊 1 次,治疗结束后嘱病人每个月就诊 1 次,观察 6 个月。如有新发皮疹,应及时就诊(不受 1 个月复诊 1
9、 次的时间限制)。 1.3 检测方法 抽取治疗前后 CA 患者静脉血 3 mL，应用 ELISA 双抗体夹心法，测定血清 IL10 、IFN 水平(IFN 和 IL10 ELISA 试剂盒为北京晶美公司产品)。 1.4 复发标准 疣体用激光去除后，随访 6 个月，随访期间有新发皮疹者定为复发，反之，则无复发。 1.5 统计学分析 应用 SPSS 11.0 for Windows 软件做统计学处理。采用 t 检验和 2检验，以 P0.05 为差异有显著性。 2 结 果 2.1 两组治疗前后血清 IL10 和 IFN 水平的变化 治疗后治疗组 IL10 水平明显降低，IFN 水平明显升高，与治疗前
10、比较差异有显著性 (P0.05)；而对照组 IL10 、IFN 水平在治疗前后无显著改变(P0.05)。治疗后治疗组 IL10 水平明显低于对照组,IFN 水平明显高于对照组(P0.05)。见表 1。 2.2 两组复发率比较 治疗组有 9 例复发，复发率为 13.8%；对照组有 15 例复发，复发率为 42.9%，对照组复发率明显高于治疗组,两组比较差异显著 (P0.05)。见表 2。表 1 两组治疗前后血清细胞因子 IL10 和 IFN 水平变化与治疗前比较:*P0.05;与对照组比较:#P0.05 表 2 两组的复发时间及例数 3 讨 论 尖锐湿疣(CA)是一种病毒感染性疾病，临床复发率较
11、高，以往CA 的治疗多采用抗病毒及局部治疗，随着对其发病机制研究的深入，细胞免疫功能的抑制和失衡越来越受到重视。有研究表明，CA 患者体内存在多种 Th1 和 Th2 型细胞因子水平异常及明显的 Th1/Th2 型细胞因子产生失衡4,5 。细胞免疫功能的抑制和失衡可能是 CA 患者病情反复发作、病程迁延不愈的原因。 本研究采用激光去除疣体联合微卡注射治疗。微卡属快生长非结核分枝杆菌，对人和动物无致病性，其含有丰富的型抗原和 65KD 抗原，可介导共同保护性免疫反应, 有效地提高 IFN mRNA 的表达，诱导 Th1 型 T 淋巴细胞分泌 IFN 等细胞因子, 从而提高 IFN 水平，激活巨噬
12、细胞，使其吞噬杀菌能力增强，并能增强单核细胞的吞噬作用，激活中性粒细胞、NK 细胞、血管内皮细胞等, 增加 H2O2 和 NO 水平，并与其它细胞因子协同，在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节方面有重要作用；降低 IL10 水平, 而 IL10 作为一种细胞因子合成抑制因子，能有效地抑制 Th1 型细胞因子(如 IL2 、IFN 等)在 mRNA 水平的合成，通过抑制 IL2 、IFN 等的产生达到其免疫抑制的目的。由此启动 Th1应答，抑制 Th2 应答，从而恢复 Th1/Th2 比例平衡，增强人体的免疫性和防御能力6,7 。本研究结果显示，与单独使用激光治疗相比，经联合治疗后治疗组 IL10 水平明
13、显降低，而 IFN 水平明显升高，而且复发率也明显降低。由此可见，运用微卡联合激光治疗 CA，有利于增强患者 Th1 免疫应答，降低 CA 复发率，值得临床推广。 【参考文献】 1ZARCONE R, BELLINI P, CARDONE G, et al. Vulvovaginal HPV infection: Immunological aspects J. Minerva Ginecol, 1996，48(3):61. 2 陆春,朱国兴,周建,等.尖锐湿疣患者血清 IL2 、IL6 及IL8 水平的检测及其临床意义J.中国实验临床免疫学杂志,1999,11(5): 22-23. 3 MA
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