1、气相色谱法测定佛山人参再造丸中龙脑的含量【摘要】 目的 建立气相色谱法测定佛山人参再造丸中龙脑含量的方法。方法 采用 HP5 石英毛细管柱（5% phenyl methyl siloxane）（30.0 m320 nm0.25 m）,柱温为 110 ,进样口温度为 180 ,检测器温度为 250 , 载气为氮气。结果 龙脑检测质量浓度在6.875220.00 g/mL (r=0.9999,n=6)范围内线性关系良好,平均回收率为 98.59%(RSD=1.52%)。 【关键词】 气相色谱法；佛山人参再造丸；龙脑；含量测定 Abstract:Objective To establish a me
2、thod for content determination of borneol in Foshanrenshenzaizao pills. Method The sample was analyzed on an HP5 capillary column (5% phenyl methyl siloxane, 30.0 m320 nm0.25 m) using nitrogen as carrier gas. The temperatures of the column, injector and detector were 110, 180 and 250 , respectively.
3、Result There was good linearity in the range of 6.88220.00 g/mL (r=0.9999, n=6). The average recovery and relative standard deviation of borneol were 98.58% and 1.52%, respectively. Conclusion This method is simple, accurate and reproducible for the quality control of Foshanrenshenzaizao pill. Key w
4、ords:gas chromatography; Foshanrenshenzaizao pill; borneol 佛山人参再造丸是由人参、人工牛黄、血竭、当归、冰片(合成龙脑)、大黄等组成的复方制剂，具有祛风化淤、活血通络的功效，用于中风、步履艰难、口眼歪斜、手足痉挛、左瘫右痪、筋骨疼痛、半身不遂、言语不清1 。处方中冰片(合成龙脑)是一味常用药，具有散郁火、清热、消肿等功效。冰片(合成龙脑)主要成分是互为异构体的龙脑和异龙脑，其化学结构无特征紫外吸收，因此薄层扫描法和气相色谱法24是测定这类化合物较好方法。本文建立气相色谱法测定佛山人参再造丸中龙脑的含量，方法简便，杂质无干扰，分离效果好
5、，结果准确，可作为该制剂质量控制的方法之一。 1 仪器与试药 Agilent HP6890 气相色谱仪，HP Chemstatations 工作站，FID 检测器；CQ 250 超声波处理器（上海,功率 250 W，频率 33 kHz） 。 龙脑（中国药品生物制品检定所，批号：110881200504 ）,水杨酸甲酯（中国药品生物制品检定所，批号：7078702 ）,佛山人参再造丸共 10 批（佛山冯了性药业有限公司） ，所用的其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为 HP5 石英毛细管柱（5% phenyl methyl siloxane）（30.0
6、m320 nm0.25 m）,柱温为 110 ,进样口温度为 180 ,检测器温度为 250 ,载气为高纯度氮气,分流比为 201，在上述色谱条件下,龙脑、水杨酸甲酯(内标)的理论塔板数均大于 40 000。龙脑与水杨酸甲酯(内标)的分离度大于 2。 2.2 溶液的制备 2.2.1 内标溶液的制备精密称取水杨酸甲酯适量, 置于 1 000 mL 容量瓶中，加入乙醇配制成浓度为 0.130 0 mg/mL 的溶液,摇匀,即得。 2.2.2 对照品溶液制备精密称取龙脑对照品适量，置于 100 mL 容量瓶中，加上述内标溶液溶解并稀释至刻度，制成浓度为 0.090 0 mg/mL的溶液,摇匀,即得。
7、 2.2.3 供试品溶液的制备取本品剪碎，取约 2 g，精密称定，加硅藻土 2 g 研碎，置于具塞锥形瓶中，精密加入上述内标溶液 25 mL，密塞，称定重量，超声处理 30 min，放冷，再称定重量，用乙醇补足减少的重量，取续滤液，即得。 2.3 测定方法 吸取对照品溶液按上述色谱条件注入气相色谱仪，测定龙脑和水杨酸甲酯峰面积，计算校正因子；吸取供试品溶液按上述色谱条件注入气相色谱仪，按内标法计算即得。 2.4 线性关系考察 精密称取龙脑对照品适量，加上述内标溶液稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 220.00 g/mL 龙脑对照品溶液；精密吸取该对照品溶液 5 mL置于 10 mL 的容量瓶中，加
8、上述内标溶液稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 110.00 g/mL 龙脑对照品溶液；同上逐级用内标液稀释配制 6 个不同浓度梯度 220.00、110.00、55.00、27.50、13.75、6.875 g/mL 的对照品溶液。吸取上述溶液,按上述色谱条件进样，记录其峰面积,并以龙脑质量浓度()为横坐标,龙脑峰面积与内标峰面积之比(A)为纵坐标,进行线性回归,得回归方程 A=0.012 4-0.015 1(r=0.999 9,n=6)。结果表明龙脑检测质量浓度在 6.875220.00 g/mL 范围内线性关系良好。 2.5 阴性干扰的考察 取缺冰片的处方，按工艺制成阴性制剂，按“2.2.3”
9、项方法加乙醇超声提取制得阴性对照溶液。分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液按上述色谱条件进样分析。结果表明其他味药及辅料对龙脑测定无干扰,见图 1。 图 1 气相色谱图 略 2.6 仪器精密度试验 取同一供试品溶液（批号为 GC0007）按上述色谱条件重复进样 6 次，测定龙脑的含量,结果龙脑含量的 RSD 为 1.02%，表明仪器精密度良好。 2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，按上述色谱条件分别于 0、1、2、4、6、8 h 进样测定，计算龙脑峰面积与内标峰面积之比的 RSD 为 1.69%。结果表明供试品溶液在 8 h 之内稳定。 2.8 重复性试验 精密称取同一批号（批号为
10、GC0007）的样品 5 份各 2 g，按“2.2.3”项方法制得供试品溶液，测定每一份供试品含量，结果平均值为 0.5972 mg/g,RSD=1.09%。结果表明本法重复性良好。 2.9 加样回收率试验 取已测得含量的样品（批号为 GC0007，龙脑质量比为 0.597 2 mg/g）6 份各 1 g，精密称定，分别加入硅藻土 1 g,研碎，各精密加入龙脑对照品溶液（质量浓度为 0.6017 mg/mL）1 mL，按“2.2.3”项方法制得供试品溶液，测定，结果平均回收率为 98.59%，RSD 为 1.52%。 2.10 样品测定 取 10 批样品，分别按供试品的溶液制备方法制得供试品溶
11、液，按“2.3”项测定，结果见表 1。 表 110 批样品测定结果 略 3 讨 论 3.1 参考文献24提取溶剂选择有乙醇、乙酸乙酯和氯仿等，内标物的选择有萘和水杨酸甲酯。通过试验比较,加硅藻土研碎，乙醇为提取溶剂，超声提取（功率 250 W，频率 33 kHz） ，水杨酸甲酯为内标物，龙脑提取率明显提高，乙醇的毒性、刺激性较小、价格较低且水杨酸甲酯与龙脑都具有良好的分离度,故采用乙醇为提取溶剂、超声提取和水杨酸甲酯为内标物的方法。 3.2 采用超声提取法，试用不同的提取时间（20 min、30 min、40 min）对样品进行提取，结果 30 min 与 40 min 样品的含量较大而且无明显差别，说明乙醇 30 min 的超声提取样品已经提取完全，为节约时间及节省成本，超声提取时间确定为 30 min。 【参考文献】 1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂D.1994：113. 2 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部S.北京：化工工业出版社，2005：358，433，570,617，666. 3 魏学冰.气相色谱法测定肤疡软膏中冰片的含量J.中成药,2004,26(1):76. 4 刘杰，董文玲.4 种中药橡胶膏剂中樟脑、薄荷脑、冰片和水杨酸甲酯的气相色谱法测定J.中成药,2004,26(10):795.
