1、第六章 免疫应答（immune response，Ir）,第一节 免疫应答概述,免疫应答（immune response，IR）是指免疫系统识别和清除抗原的整个过程。在多数情况下对机体是保护性的生理反应，但在一定条件下也可以导致免疫病理损伤,特异性免疫应答免疫系统识别和清除抗原过程,一、免疫应答的类型,固有免疫应答（非特异性免疫应答）机体在种系发生和漫长进化过程中逐渐形成的一类可以遗传的天然免疫功能，在识别和排除病原微生物的入侵过程中发挥固有免疫应答的作用，最先形成1）先天固有，稳定遗传；2）作用无特异性；3）即刻发挥免疫效应；4）维持时间短且无免疫记忆；适应性免疫应答，又称获得性免疫应答,参
2、与固有免疫的组分,组织屏障 皮肤屏障、黏膜屏障、胎盘屏障和血-脑屏障免疫细胞 吞噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、NKT细胞、T细胞和B1细胞等免疫分子 补体、急性期蛋白、防御素、细胞因子、抗菌肽和溶菌酶等,可溶性天然免疫分子, 天然免疫分子 识 别 对 象 效 应 溶菌酶细菌胞壁的糖肽 消化细菌胞壁 甘露糖结合蛋白（MBP） 富含甘露糖的糖 致敏微生物；蛋白及脂多糖 激活补体 C反应蛋白（CRP） 细菌表面多糖及 致敏微生物；磷酯胆碱 激活补体 补体与细胞及微生物表 杀伤靶细胞；面的糖及蛋白质共 趋化炎症细胞等价结合 LPS结合蛋白（LBP）LPS 促进LPS与CD14结合 可溶性CD14
3、LPS 促进细胞与LPS结合,天然免疫细胞,肥大细胞 哨兵细胞巨噬细胞 常驻边防细胞中性粒细胞野战细胞NK细胞机动兵细胞树突细胞 工程兵细胞,适应性免疫应答,是抗原特异性免疫细胞受抗原刺激后活化、增殖、分化，并产生一系列免疫生物学效应的过程。其包括：T细胞介导的细胞免疫应答B细胞介导的体液免疫应答免疫耐受,特异性免疫应答的主要特征,高度特异性更有效地识别自我和非我抗原物质有免疫记忆作用可形成免疫耐受,二、适应性免疫应答的基本过程,1.感应阶段 是指APC摄取、加工、处理、提呈抗原；T/B细胞的抗原受体特异性识别抗原，此阶段又称抗原识别阶段2.增殖和分化阶段3.效应阶段 是指免疫效应细胞和效应分
4、子共同发挥作用，产生体液免疫和细胞免疫效应的阶段。其结果是清除非己抗原物质或诱导免疫耐受，从而维持机体正常生理状态，病理情况下也可能引发免疫相关性疾病,第二节 抗原提呈,APC或靶细胞胞浆内自身产生或摄入胞内的抗原消化降解为一定大小的抗原肽片断，以适合与胞内MHC分子结合，此过程称为抗原加工（antigen processing）或抗原处理抗原肽与MHC分子结合称抗原肽-MHC分子复合物，并表达在细胞表面，以供T细胞识别，此过程称为抗原提呈（antigen presenting）,第二节 抗原提呈,根据被提呈抗原的来源不同，可将其分为外源性抗原和内源性抗原；前者来源于细胞外的抗原，如被吞噬或吞
5、饮的细胞、细菌、微生物蛋白分子或某些自身成分等。后者是细胞内合成的抗原，如病毒感染细胞所合成的病毒蛋白、肿瘤细胞合成的蛋白以及胞内某些自身正常成分等。,第二节 抗原提呈,外源性抗原可在局部或通过淋巴液和血液转运至淋巴组织，被该部位的抗原提呈细胞（APC）摄取、加工、处理，并以抗原肽-MHC-类分子复合物的形式表达于APC表面，供特异性CD4+Th细胞识别，此为溶酶体途径或MHC-类途径内源性抗原在胞内加工后形成的抗原肽则与MHC-类分子结合，以抗原肽-MHC-类分子复合物的形式提呈给CD8+T细胞，此为胞质溶胶途径或MHC-类途径,一、胞质溶胶途径（MHC-类途径）,二、溶酶体途径（MHC-类
6、途径）,第三节 T细胞介导的细胞免疫应答,胸腺内发育成熟的初始T细胞进入血循环，穿越淋巴结的高内皮静脉到达外周淋巴器官，转归为初始T细胞，初始T细胞识别APC所提呈的特异性抗原而产生免疫应答。T细胞介导的细胞免疫应答通常由TD抗原引起，在多种免疫细胞协同下完成。参与细胞免疫应答的细胞主要包括APC、具有免疫调节作用的细胞和效应T细胞等。,一、T细胞对抗原的识别,未接受抗原刺激的T细胞被称为初始T细胞（naive T cell）。初始T细胞表面的TCR在特异性识别APC所提呈抗原肽时，须同时识别与抗原肽形成复合物的MHC分子，此即T细胞双识别。这种特性称为MHC限制性（MHC restricti
7、on）APC将抗原提呈给特异性T细胞，该过程涉及两种细胞表面多种分子间的相互作用，形成免疫突触（immune synapse）,一、T细胞对抗原的识别,T细胞TCR特异性识别抗原 初始T细胞与APC随机接触，通过某些黏附分子相互作用发生短暂而可逆性的结合，TCR从APC表面大量抗原肽-MHC分子复合物中筛选特异性抗原肽。识别后传导第一活化信号T细胞共受体参与T细胞的抗原识别 T细胞表面CD4或CD8分子是TCR识别抗原的共受体。二者分别与APC表面MHC类或类分子结合，可提高TCR与特异性p-MHC的亲和力，从而明显增强T细胞对抗原刺激的敏感性。,二、T细胞活化、增殖和分化,（一）T细胞活化
8、T细胞接受抗原刺激后，需要双信号和细胞因子的作用才能够完全活化。,第二节 T细胞活化的过程,T细胞的完全活化有赖于双信号和细胞因子的作用。T细胞活化的第一信号来自其受体TCR与抗原的特异性结合，即T细胞对抗原识别T细胞活化的第二信号来自协同刺激分子，即APC上的协同刺激分子与T细胞表面的相应受体的相互作用两个信号的介导，涉及到一系列免疫分子,协同刺激,初始T细胞的完全活化需要两种活化信号的协同作用。第一信号由TCR识别抗原产生，经CD3分子将信号传导到细胞内。由于接受抗原刺激的是抗原特异性T细胞克隆，第一信号的基本作用是使T细胞克隆被抗原活化后产生的适应性免疫应答,具有严格的特异性。第二信号（
9、或称为协同刺激信号）则由抗原提呈细胞（APC）或靶细胞表面的协同刺激分子与T细胞表面的相应协同刺激分子受体相互作用而产生,初始T细胞激活的第一信号和第二信号,1.T细胞活化的第一信号,APC将抗原肽-MHC分子复合物递呈给T细胞，TCR特异性识别于MHC分子凹槽中的抗原肽，引起TCR交联并启动抗原识别信号，即第一信号，导致CD3和共受体（CD4或CD8）分子的胞浆段尾部相聚，激活与胞浆段尾部相联的酪氨酸激素，促使含酪氨酸的蛋白磷酸化，启动激酶活化的级联反应，最终通过激活转录因子二导致编码细胞因子及其受体的基因转录和产物合成,2.T细胞激活的第二信号,APC和T细胞表面黏附分子对（如B7/CD2
10、8、LFA-1/ICAM-1或ICAM-2、CD2/LFA-3等）结合，可向T细胞提供第二激活信号，即共刺激信号，从而是T细胞完全活化。 B7/CD28是重要的共刺激分子，其主要作用是促进IL-2合成受阻，则抗原刺激不能激活特异性T细胞，导致T细胞失能（anergy）。激活的专职APC高表达共刺激分子，而正常组织及精制的APC则不表达或仅表达共刺激分子。由于缺乏共刺激信号使自身反应性T细胞处于无能状态，从而有利于维持自身耐受。CTLA4与CD28具有高度同源性，但该分子与B7的亲和力比CD28高约20倍。CD28 / B7参与T细胞的激活，但在T细胞激活至峰值后CTLA4表达则增加，后者与B7
11、结合可启动抑制性信号，从而有效制约特异性T细胞克隆的过度增殖。,3.细胞因子参与T细胞活化,除上述双信号外，T细胞的充分活化还有赖于细胞因子参与。活化的APC和T细胞可分泌IL-1、IL-2、IL-2、IL-12等多种细胞因子，它们在T细胞激活中发挥重要作用,（二）T细胞增殖和分化,激活的T细胞迅速进入细胞周期，通过有丝分裂而大量增殖，并分化为效应T细胞，然后离开淋巴细胞随血循环到达感染部位。多种细胞因子参与T细胞增殖和分化过程，其中最重要者为IL-2。静止T细胞仅表达低亲和力IL-2R（）；激活的T细胞可高表达IL-2R （）并分泌IL-2。通过自分泌及旁分泌作用，IL-2与T细胞表面IL-
12、2R集合，介导T细胞增殖和分化。此外，IL-4、IL-12、IL-15等细胞因子也在T细胞增殖和分化中发挥重要作用,1.CD4+T细胞的增殖分化,局部微环境中存在的细胞因子种类是调控Th0细胞分化的关键因素，例如IL-12可促进Th0细胞分化为Th1细胞；IL-4可促进Th0细胞分化为Th2细胞， Th0细胞的分化方向是决定机体免疫应答类型的重要因素： Th1细胞主要介导细胞免疫应答， Th2细胞主要介导体液免疫应答,2.CD8+T细胞的增殖分化,初始CD8+T细胞的激活主要有两种方式：Th细胞非依赖性：如病毒感染的DC，由于其高表达共刺激分子，可直接刺激CD8+T细胞合成IL-2，促使CD8
13、+T细胞自身增殖并分化为细胞毒T细胞，而无需Th细胞辅助Th细胞依赖性：CD8+T细胞作用的靶细胞一般仅低于表达或不表达共刺激分子，不能刺激初始CD8+T细胞，而需要APC及CD4+T细胞的辅助,2、CD8+T细胞的增殖分化,2.CD8+T细胞的增殖分化,机体对特定抗原长生初次免疫应答后，部分活化的T细胞可转变为记忆T细胞（Tm），参与再次免疫应答。当抗原再次进入机体，少量抗原即可刺激Tm，并迅速产生强烈、持久的应答。,三、T细胞应答的效应及其机制,初始T细胞接受抗原刺激后增殖、分化为效应T细胞，其细胞表面高表达FasL，可介导靶细胞凋亡；效应T细胞可分泌多种活性分子，如细胞毒素（穿孔素、颗粒
14、酶等）、各种蛋白酶、细胞因子等发挥不同的生物学效应不同类型效应T细胞作用与不同靶细胞，其生物学效应及机制各异。主要介绍CD8+T细胞和CD4+Th1细胞介导的细胞免疫效应,（一）CTL介导的细胞毒效应,CTL主要杀伤胞内寄生病原体（病毒、某些胞内寄生菌等）的宿主细胞、肿瘤细胞等。CTL多为CD8+T细胞，可识别MHC-类分子递呈的抗原；约10%的CTL为CD4+T细胞，可识别MHC-类分子递呈的抗原。CTL可高效、连续特异性地杀伤靶细胞，而不损害正常组织。,（一）致死性攻击,穿孔素/颗粒酶途径Fas/FasL途径,1.效-靶细胞结合,效应CTL高表达黏附分子（如LFA-1、CD2等），可有效结
15、合表达相应配体（ICAM、LFA-3等）的靶细胞。一旦TCR遭遇特异性抗原，TCR的激活信号可增强效-靶细胞表面黏附分子对的亲和力，并在细胞接触部位形成紧密、狭小的空间，使CTL分泌的非特异性效应分子集中于此，从而选择性杀伤所接触的靶细胞，但不影响临近正常细胞。,2.致死性攻击,CTL主要通过两条途径杀伤靶细胞穿孔素/颗粒酶途径：TNF与FasL途径：,（二）Th1细胞介导的细胞免疫效应,某些胞内寄生的病原体（如分枝杆菌属的结核杆菌和麻风杆菌）可在巨噬细胞的吞噬小体内生长，并逃避特异性抗体和CTL攻击。针对此类胞内寄生病原体，Th1细胞可通过活化巨噬细胞及释放各种活性因子而攻击之。,1.Th1
16、 细胞对巨噬细胞的作用,Th1细胞可产生多种细胞因子，通过多途径作用与巨噬细胞（1）激活巨噬细胞（2）诱生并募集巨噬细胞,2.Th1细胞对T细胞的作用,Th1细胞产生IL-2等细胞因子，可促进Th1细胞、CTL等增殖，从而放大免疫效应,3.Th1细胞对中性粒细胞的作用,Th1细胞产生淋巴毒素和THF-，可活化中性粒细胞，促进其杀伤病原体的作用,第四节 B细胞介导的体液免疫应答,成熟的B细胞离开骨髓进入外周循环，这些细胞若未遭遇相应抗原，即在数周内死亡；若遭遇特异性抗原，则活化、增殖，并分化为浆细胞，通过产生和分泌抗体而发挥清除病原体的作用。在B细胞应答，由浆细胞所产生的抗体（存在于体液中）是主
17、要的效应分子，故将此类应答称为体液免疫应答（humoral immune response）,B淋巴细胞的显微结构,（一）B细胞对TD抗原的识别,B细胞针对TD抗原的应答需抗原特异性T细胞辅助。与TCR不同，BCR分子可变区能直接识别天然抗原决定基，而无需APC对抗原的处理和递呈，也无MHC限制性。必须指出的是，虽然抗原特异性B细胞与Th细胞所识别的表位不同，但二者须识别同一抗原分子的不同表位，才能相互作用。,（二）特异性B细胞的活化,与T细胞相似，B细胞活化也需要双信号和细胞因子参与。,第一活化信号经由Ig/Ig传导入胞内,二、B细胞活化、增殖和分化,B细胞表面的BCR共受体复合物（CD21
18、-CD19-CD81）在B细胞活化中发挥如下重要作用：可使B细胞对抗原刺激的敏感性增强；对结合又补体片断的免疫复合物或抗原，BCR可特异性识别其中的抗原组分，而BCR共受体的CD21可与补体片断（如C3d）结合，通过受体/共受体交联，使CD19胞内段相联的酪氨酸激酶和Ig/Ig相关的酪氨酸激酶发生磷酸化，通过一系列级联反应，促使相关基因表达，使B细胞激活和增殖,B细胞的发育过程,抗原非依赖阶段：在胚肝或骨髓,淋巴干细胞,原B细胞,前B细胞,未成熟细胞,成熟B细胞,Ig 基 因 重 排,胞浆+,sIgM+,抗原依赖阶段：外周淋巴器官,成熟B细胞,sIgM+,sIgD+,sIgM+,sIgD+,活
19、化B细胞,sIgM+,sIgD+,抗原,记忆B细胞,sIgG+,sIgA+,浆细胞,胞浆Ig,B细胞的抗原呈递功能,2.B细胞激活的同刺激信号,B细胞激活有赖于T细胞辅助，通过B细胞与Th细胞间复杂的相互作用，B细胞获得其活化所必需的共刺激信号。初始Th细胞特异性识别APC（主要是DC）所递呈的抗原肽-MHC-类分子复合物而被激活，在外周淋巴组织（如淋巴结等）的T细胞区增殖，并分化为效应Th细胞。效应Th细胞识别B细胞递呈的特异性抗原，诱导表达多种膜分子，其中最重要者为CD40L。Th细胞表面CD4OL可与B细胞表面CD40结合，向B细胞提供共刺激信号。其主要效应为：促进B细胞进入增殖周期；使
20、B细胞表达B7分子增加，以增强,B细胞的激活需要第一信号和第二信号的协同刺激,(二)B细胞的增殖、分化,抗原特异性B细胞的增殖和分化B细胞在生发中心的分化成熟与转归,（三）B细胞在生发中心的分化成熟,Th,B7,MHC-II TCR,CD4,ICAM LFA-1,APC,Th,B,CD40L CD40,分泌细胞因子,Th 细胞活化、增殖,B 细胞扩增,浆细胞,BCR,抗原,TD 抗 原 诱 导 体 液 免 疫 应 答 的 过 程,Bm,CD28,二、体液免疫应答的一般规律,病原体初次侵入机体所引发的应答称为初次免疫应答（primary immune response）。在初次应答的晚期，随着抗
21、原被清除，多数效应T细胞和浆细胞均发生死亡，同时抗体浓度下降。 但是，应答过程中所形成的记忆性T细胞和B细胞具有长寿命而得以保存，一旦再次遭遇同样的抗原刺激，记忆性淋巴细胞可迅速、高效、特异地产生应答，此即为再次免疫应答（secondary immune respone）,（一）初次免疫应答,机体初次接受抗原刺激后，抗体产生的过程可人为划分为若干阶段：潜伏期对数期平台期下降期初次应答主要产生IgM类抗体，后期可产生IgG，所产生的抗体总量及其与抗原的亲和力均较低,（二）再次免疫应答,相同抗体再次侵入机体，免疫系统可迅速、高效地产生特异性应答。由于记忆性B细胞表达高亲和力BCR，可竞争性结合低剂
22、量抗原而被激活，故仅需很低抗原量即可有效启动再次免疫应答。再次免疫应答过程中，记忆性B细胞作为APC摄取、处理抗原，并将抗原递呈给记忆性Th细胞。激活的Th细胞所表达的多种膜分子和大量分泌型细胞因子又作用于记忆性B细胞，使之迅速增殖并分化为浆细胞，合成和分泌抗体。,由于记忆性B细胞在初次应答的生发中心已经历增殖、突变、选择及抗体类别转换、亲和力成熟，故其应答过程及所产生的抗体具有如下特征：应答迅速而持久，其潜伏期明显缩短，迅速到达平台期，下降期平缓；应答强度高，其平台区抗体水平比初次应答高10倍以上，且持续时间长；再次应答的抗体类别主要使IgG；再次免疫应答产生的抗体亲和力明显高于初次应答。,
23、体液免疫应答的一般规律,_ 初次应答 再次应答_ 潜伏期 长 短 高峰浓度 低 高 维持时间 短 长 Ab类型 主要为IgM 主要为IgG Ab效价 低 高 亲和力 低 高_,三、 B细胞对TI抗原的免疫识别,某些抗原，如某些细菌多糖、多聚蛋白质及脂多糖等，能刺激初始B细胞，而无需抗原特异性T细胞的辅助，称为TI-Ag。能在无胸腺动物诱导强的抗体应答TI抗原分为TI-1和TI-2，以不同机制刺激B细胞TI-1常称为B细胞丝裂原TI-2为细菌胞壁与荚膜多糖，只能刺激成熟B细胞,第二节 B细胞对TI抗原的免疫识别,B细胞对TI-2抗原的应答作用,为机体提供了一种抗一类重要病原体的快速而特殊的反应。
24、大多数胞外菌有胞壁多糖，它能使细菌抵抗吞噬细胞的吞噬消化在没有抗原特异性T细胞辅助下，迅速产生的抗荚膜多糖抗体能包被有荚膜的化脓菌，使之易被吞噬消化,TI-2抗原,主要是细菌胞壁与荚膜多糖,含有高密度重复性B细胞表位，可与抗原特异性B细胞的BCR广泛交联,四、B细胞应答的效应,中和作用免疫调理作用激活补体抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用分泌型IgA的局部抗感染作用免疫损伤作用,第五节 免疫耐受,免疫耐受（immunotolerance）指机体免疫系统接触某种抗原后所表现出的特异性免疫无应答或低应答。免疫耐受可天然形成，如机体对自身组织抗原的自身耐受；也可为后天获得，如人工注射某种抗原后诱导的获得
25、性耐受。免疫耐受形成的抗原称为耐受原（tolerogen）。同一抗原物质在不同情况下可为耐受原或免疫原（immumogen），取决于抗原的理化性质及剂量、免疫途径和机体的遗传背景等因素。,免疫耐受的建立与免疫应答的建立具有共同的特点，即均需抗原的诱导，均具有抗原特异性和免疫记忆。免疫耐受的特异性是指机体仅对某一特定抗原无应答或低应答，但对其他无关抗原仍保持正常的免疫应答能力。因此，免疫耐受有别于免疫抑制或免疫缺陷所导致的非特异性免疫抑制或无反应，后者无抗原特异性，对各种抗原均呈无应答或低应答。,一、免疫耐受的诱导条件和形成机制,（一）免疫耐受诱导条件1、抗原因素（1）抗原性质（2）抗原剂量（3）抗原免疫途径（4）其他因素,2、机体因素,免疫系统成熟程度动物种类与品系机体生理状态,（二）免疫耐受形成的机制,中枢免疫耐受克隆清除及克隆流产,2、外周免疫耐受克隆无能,二、免疫耐受的建立、维持和终止,（一）免疫耐受的建立和维持（二）免疫耐受的终止,三、研究免疫耐受的意义,免疫学理论的核心问题是免疫系统对“自己”和“非己”的有效识别，是维持机体免疫稳定和正常生理功能的基础和关键。,课堂练习,T细胞活化的第一信号和第二信号分别是什么B细胞活化的第一信号和第二信号简述细胞免疫的过程简述体液免疫的过程初次免疫应答和再次免疫应答的异同,
