1、技能训练4 病料的采取、保存、送检,通过实训，使学生初步掌握动物传染病病料的采取、包装和送检的方法,实训目标,煮沸消毒器、外科刀、外科剪、镊子、试管、平皿、广口瓶、包装容器、注射器、采血针头、脱脂棉、载玻片、酒精灯、火柴、保存液、来苏儿，新鲜动物尸体等,仪器材料,方法步骤,（一）病料的采取（二）病料的保存（三）病料的包装和送检方法,（一）病料的采取,1采取病料的时间 最好在动物死后立即采取，以不超过6h为宜。,2采取病料器械的消毒 刀、剪、镊子等：可煮沸消毒30min；玻璃器皿等：可高压灭菌或干热灭菌，或于0.5%1%碳酸氢钠水中煮沸30min；软木塞和橡皮塞：于0.5%石炭酸水溶液中煮沸10
2、15min；载玻片：在1%2%碳酸氢钠水中煮沸1015min。水洗后用清洁纱布擦干，将其保存于酒精与乙醚等份液中备用。注射器和针头：放于清洁水中煮沸30min即可。,3各种组织脏器病料的采取,采取病料应无菌操作。采取病料的种类，应根据不同的传染病，相应地采取其脏器和内容物。在无法估计是某种传染病时，应进行全面采取。临床诊断应待采取病料完毕后进行。,淋巴结及内脏 有病变的部位各采取12cm3的小方块，分别置于灭菌试管或平皿或小瓶中。脓汁及渗出液 用注射器或吸管抽取，置于灭菌试管中。血液 心血通常在右心房采取；血清的采取，以无菌操作采取血液10ml，置于灭菌的试管中；全血的采取，在注射器中先吸入5
3、%柠檬酸1ml，再以无菌操作采取全血至10ml，注入灭菌好的试管或小瓶中。,乳汁 乳房和挤乳者的手用新洁尔灭等消毒，弃去最初所挤的34股乳汁，再采集10ml左右的乳汁于灭菌的试管中。胆汁 采取方法同心血烧烙采取法。肠 用线扎紧一段肠道两端，然后将两端切断，置于灭菌器皿中。皮肤 取大小约1010cm2的皮肤一块，保存于30%甘油缓冲溶液中，或10%饱和盐水溶液，或10%福尔马林溶液中。,胎儿、禽和小动物 将整个尸体包入不透水的塑料薄膜、油布或数层油纸中，装入箱内送检。 脑、脊髓、管骨 可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水中，或将整个头割下，或将整个管骨包入浸过0.1%升汞溶液的纱布或油布中，装箱送检。
4、供镜检的涂片 先将脓汁、血、黏液等病料置于玻片上，再用一灭菌签均匀涂抹，或用另一玻片抹之。,（二）病料的保存,病料应保存在新鲜状态，以免病料送达实验室时已失去原来状态，影响正确诊断。,1. 常用的保存剂,病毒检验材料 一般用灭菌的50%甘油缓冲盐水或鸡蛋生理盐水。细菌检验材料 一般用灭菌的液体石蜡，或30%甘油缓冲盐水，或饱和氯化钠溶液。血清学检验材料 固体材料（小块肠、耳、脾、肝、肾及皮肤等）可用硼酸或食盐处理。液体材料如血清等可在每毫升中加入3%5%石炭酸溶液12滴。病理组织材料 用10%福尔马林液和95%100%酒精等。,2几种保存液的配制法,（1）30%甘油生理盐水溶液： 纯中性甘油3
5、0.0ml 0.02%酚红1.5ml 氯化钠 0.5g中性蒸馏水加至于l00.0ml 碱性磷酸钠 1.0g 混合后置高压灭菌器中灭菌30min。,（2）50%甘油缓冲盐水溶液： 中性纯甘油150.0ml 酸性磷酸钠0.46g 中性蒸馏水 50.0ml 碱性磷酸钠 10.74g 氯化钠2.5g 将后三种药物溶于100ml中性蒸馏水中，然后与150ml中性纯甘油和50ml中性蒸馏水混合。混合后分装，于高压灭菌器内灭菌30min。,（3）饱和食盐溶液 取一定量的蒸馏水加入纯氯化钠，不断搅拌至不能溶解为止（一般为8%39%左右），然后用滤纸过滤。,（4）鸡蛋生理盐水溶液 先将新鲜鸡蛋的表面用碘酊消毒，
6、然后打开将内容物倾入灭菌的三角瓶中，加灭菌生理盐水（占总量的10%），摇匀后，用灭菌纱布过滤，然后加热至5658维持30min，第二天及第三天按上述方法再加热一次，即可使用。,（三）病料的包装和送检方法,1病料送检 应附病料送检单，该单需复写三份，其中一份留为存根，两份寄往检验室，待检查完毕后，退回一份。附送检单。,动物病理材料送检单,2病料的包装和送检 液体病料最好收集在灭菌玻璃管中，管口用火焰封闭，封闭时注意勿使管内病料受热。将封闭的玻璃管用棉花纸包裹，装入较大的试管中，再装盒运送。3病料装于容器内至送到检验部门的时间应越短越好。运送途中应避免病料接触高温及日光，以免材料腐败或病原微生物死亡。,课后作业,1写出实习报告 2掌握常见病料的采集、包装、送检方法,
