1、,疟原虫的镜下形态 及鉴别要点,授课内容,1.4种疟原虫厚、薄血膜中各期形态结构及鉴别要点2.镜检示教,疟原虫生活史简图（间日疟为例）,人体疟原虫的基本结构,疟原虫基本构造为细胞质（胞浆）、核和疟色素这三要素。1.细胞浆 被染成蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细胞浆逐渐增多。2. 核 即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红色。3. 疟色素 不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂状，黑褐色。,薄血膜中常见的血液成分,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,血小板,单核细胞,淋巴细胞,红细胞,如何确定血片为阴性, 检查全部厚血膜未查见疟原
2、虫。 最少检查100个厚血膜油镜视野 未查见疟原虫。 镜检时间应不低于20分钟。,疟原虫种、期英文缩写,间日疟Pv恶性疟Pf三日疟Pm卵形疟Po环状体R大滋养体T裂殖体S配子体G,薄血膜Pf形态,恶性疟环状体感染的红细胞：大小正常，颜色较深。虫体大小：较小，约为红细胞直径1/5-1/6。胞浆：蓝色，环状，纤细，有时位于红细胞的边缘。常见多个原虫同寄生于一红细胞的现象。核：红色一个，常有二个。疟色素：无。,恶性疟原虫-环状体,环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大核1个，但2个常见，红细胞常含2个以上原虫,恶性疟环状体,被寄生的红细胞形态正常，一个红细胞内有一个环状体，另一个红细胞内有三个
3、环状体，其中一个环状体贴于红细胞上缘。（800 ）虫体大小已超过被寄生红细胞直径的1/2，空泡大，无阿米巴样伪足，红细胞形态正常，不胀大，未见茂氏点。（1250 ）,Pf鸟眼状环状体，一个细胞寄生2环状体,恶性疟厚血膜环状体,恶性疟裂殖体前期、裂殖体,被寄生的红细胞不胀大，无茂氏点；虫体小于正常红细胞，核已分裂成7块，色素团块黑褐色。（900）被寄生的红细胞不胀大，虫体小于正常红细胞，内含20个裂殖子，色素团块位于左侧。 （900 厚血膜）,恶性疟成熟裂殖体,红细胞：大小正常，颜色 较深，可见茂氏小点。大小：虫体较小。胞浆和核：裂殖子832 个，通常为818个， 排列不规则，核红色，胞浆蓝色。
4、色素：黑褐色，集中于中央或一侧。,恶性疟雌（大）配子体形态,形状：新月形，两端稍尖。胞浆：深蓝色。核：一个，较小，致密，深红色，位于中央，核周可见透明不染色带。疟色素：黑褐色，密布于核的周围。,薄血膜恶性疟雄（小）配子体形态,形状：腊肠形，两端钝圆。胞浆：浅蓝色或淡紫红色。核：一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，核周可见不染色带。疟色素：黑褐色，松散分布于核周围。,薄血膜恶性疟雌、雄配子体,雌配子体：半月形，两端较尖；核小致密，位于虫体上1/3部，色素围于核周；胞浆深蓝色。虫体外包有红细胞膜。（1250）雄配子体：腊肠形，两端钝圆；核大疏松，位于虫体中部，色素围于核周；胞浆淡红色。虫体外包有红
5、细胞膜。（800）,恶性疟厚薄血膜下环状体、配子体,薄血膜Pv形态,间日疟 环状体感染的红细胞：胀大不明显，基本正常。虫体大小：较大，约为红细胞直径1/3。胞浆：环状，浅蓝色。核：红色，一个，偶有二个。疟色素：无。,薄血膜间日疟大滋养体形态,感染的红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等、分布均匀、数目较多、鲜红色的薛氏小点。虫体大小：较大。胞浆：不规则，浅蓝色，出现阿米巴伪足，有空泡。核： 红色，一个。疟色素：有，细小杆状，黄褐色，分布不均匀。,间 日 疟 大 滋 养 体,虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显； 疟色素细小，黄褐色。,间日疟大滋养体,间日疟成熟裂殖体,红细胞：胀大，褪色， 可见薛氏小
6、点。大小：个体较大。胞浆和核：裂殖子1224个， 通常为16 18个排列不规 则，核红色，胞浆浅蓝色。疟色素：黄褐色，常集于疟原虫的一边。,间日疟裂殖体,薄血膜间日疟雌（大）配子体形态,形状大小：圆形或椭圆型，较大。胞浆：深蓝色。核：一个，较小，深红色，常偏于一边，核周可见明显不染色带。疟色素：黄褐色，均匀散在，数目较多。,间日疟雄（小）配子体形态,形状大小：圆形，虫体较 大。胞浆：浅蓝色。核：一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，周围有明显不着色带。疟色素：黄褐色，散在分布。,薄血膜 Pv T、S,1.被寄生的红细胞明显胀大，有薛氏点；滋养体胞浆有明显阿米巴样伪足。（1250）2.核已分裂成7
7、块，黄褐色色素渐趋集中；被寄生的红细胞明显胀大。 （800）3.核已分裂成18块，色素颗粒聚集成块状，位于虫体中部左下方，另一色素团块呈斜条状，位于虫体左上部；被寄生的红细胞明显胀大，有薛氏点。其左上方为一大滋养体。（1250）,间日疟早期大滋养体，薛氏点明显,间日疟大滋养体,厚血膜 Pv,1. Pv环状体（上右左各1个）、大滋养体（下1个）2. Pv大滋养体（4个）3. Pv大滋养体（上）、裂殖体（下）,三日疟大滋养体、裂殖体,被寄生红细胞不胀大，无点彩；虫体较大，斜列于红细胞中，呈带状，核条状，色素颗粒粗大，主要分布于虫体边缘部分。（800）裂殖子8个，呈花瓣状排列，色素聚于虫体中部。（8
8、00 ）,三日疟裂殖体,1.裂殖子6个，排列成菊花状，色素居中。薄血膜2.裂殖子8个，排列成菊花状，色素居中。薄血膜3.裂殖子6个，排列成菊花状，色素居中。厚血膜,三日疟雌、雄配子体,雌配子体：虫体已充满寄生红细胞，核三角形，较致密，位于虫体下端；色素颗粒粗大，砂粒状，散于胞浆中。（800 ）雄配子体：虫体已充满寄生红细胞，核大疏松，几乎占满左侧半个红细胞；色素粗大，散在；红细胞不胀大。 （800 ）,三日疟厚血膜裂殖体，裂殖子6个,卵形疟环状体、大滋养体,被寄生红细胞稍胀大，早期出现粗大薛氏点。（1250 ）被寄生红细胞稍胀大，有粗大薛氏点及伞状边缘；虫体小于正常红细胞，不呈阿米巴状。（ 8
9、00 ）,卵形疟雌、雄配子体,雌配子体：寄生虫细胞稍胀大，有粗大薛氏点；虫体小于正常红细胞，核1个，致密；色素颗粒状，散在虫体内。（800 ）雄配子体：寄生虫细胞稍胀大，薛氏点粗大明显；虫体小于正常红细胞，核大，疏松，位于虫体中部；色素粗大、粒状、散在（1250 ）,卵形疟大滋养体（2个）、雄配子体,卵形疟 厚、薄血膜裂殖体，裂殖子分别为10个、12个,卵形疟配子体，红细胞扫把状边缘,厚薄血膜的优缺点及适用范围,薄血膜：用血量少1-1.5ul，疟原虫的形态完整，便于疟原虫虫种的鉴定。为保证检测的敏感性，常耗时较多，不适用于大规模调查；常出现漏诊。厚血膜：用血量较多4-5ul，疟原虫胞浆和核有一
10、定程度的固缩，较难识别；但须查范围小，节省时间，阳性检出率较高。,红细胞通常胀大 薛氏点明显 成熟环状体粗大滋养体有阿米巴样伪足可见不同发育期的原虫,间日疟（P. vivax ）鉴定要点,1.环状体纤细, 红细胞不涨大2.一个红细胞内可有几个环状体 3.一个环状体可有2个核 4.幼稚环状体可贴在红细胞边缘 5.配子体呈新月形或腊肠形 6.可出现茂氏点,恶性疟（P.falciparum）鉴定要点,三日疟（P.malariae）鉴定要点,1.环状体可呈方形2.带状形大滋养体是其特点 3.成熟裂殖体呈菊花状，内含612个裂殖子 4.红细胞不胀大，略缩小5.有时有西门氏点,卵形疟（P. ovale）鉴
11、定要点,红细胞略胀大或不变大 红细胞边缘呈车轮状环状体有时呈现鱼眼状薛氏点明显 成熟裂殖体呈菊花状,类似三日疟原虫,但更粗大原虫呈卵圆形,疟原虫与其它物体的鉴别,白细胞残骸和幼稚红细胞残骸 白细胞破裂后散出的颗粒，易误认为环状体的核，但看不到胞浆；白细胞残骸和幼稚红细胞残骸常为蓝色，与疟原虫胞浆相似，有时与其它红点或与血小板巧合在一起，容易误认为疟疾原虫。鉴别时如果形同大滋养体，可根据疟色素来鉴别；如形同环状体，可根据虫体大小、折光是否均匀、核与胞浆是否在同一平面，其它视野内有无疟疾原虫等仔细分析判定。,灰尘和染色液的色素沉着 灰尘和染色液的色素沉着在血膜的表面上时，易被误认为是疟色素，可依据
12、其颗粒的形状、大小、色泽、有无核与胞浆的结构来鉴别也可转动显微镜的微调，看是否在同一水平面上。,细菌 细菌尤其是球菌在厚血膜中常被染成红色小点，与疟原虫的核相似，最易混淆。球菌形体较大，边缘光滑，且与红细胞不在同一平面。水中原虫 水中原虫有时也可看到核、胞浆和空泡，与间日疟大滋养相似，但无疟色素，而空泡多如网眼植物种子 有很清晰的厚薄一致的边界，染色较深、无疟色素，也看不到核，且有柄脱落时的痕迹,疟原虫镜下形态,镜检示教,Pf，环状体：双核多见，幼稚环状体常贴于红细胞边缘,A member of the UN forces in East Timor. Presented with high
13、temperature.,P.Falciparum (恶性疟) Ringform (环状体),Pf，雌配子体,Pf，配子体、环状体,Pv，环状体3个，左侧为3个MP寄生同一红细胞,Pv，2个环状体寄生同一红细胞，少见；中部2个大滋养体,Pv，左上为未成熟裂殖体，右下为大滋养体,Pv，雄配子体,Pv，雄配子体,Pf，环状体，数量多,Pv，环状体，大滋养体（厚血膜中不易区分，主要看胞浆多少）,PMalarae (三日疟) Trophozoite（大滋养体）,Pm带状大滋养体,（带状大滋养体） （红细胞不胀大）,卵形疟裂殖体,小结：血片镜检中鉴定是否为疟原虫的五条原则,1、疟原虫要有核有浆（红核蓝浆）。2、疟原虫各期（除环状体外）均含有疟色素。3、疟原虫自然形态要像；疟原虫呈半透明状态，模糊一团不透明者不是。4、体积最大的疟原虫也不能超过中性粒细胞大。5、数量极少，似是而非者判为可疑，应重新选择时机多次制片、多次检查，结合临床表现并交上级大夫鉴定或行药物试治。,谢谢大家,
