1、产前诊断技术及其进展,产前诊断又称宫内诊断或出生前诊断 是指胎儿出生之前应用各种先进的科技手段，采用影像学、生物化学、细胞遗传学及分子生物学等技术了解胎儿在宫内的发育状况。,产前诊断的定义,产前诊断的目的,产前诊断是实现优生的重要途径，其理想效果是限制群体中所带有害基因的繁衍。 对一些患有严重遗传性疾病的胎儿，产前诊断后可终止妊娠，不使其成为家庭和社会的负担。,产前诊断的发展概况,我国古代就有产前诊断胎儿性别的记载; 有文献从1930年开始做腹部羊膜腔穿刺; 1949年Bart发现性染色质(现称X小体);,产前诊断的发展概况,1956年开始应用羊水细胞性染色质检查。以鉴别胎儿性别，并用于协助诊
2、断某些常见的X连锁遗传病的产前诊断，如血友病，进行性肌营养不良症等。,产前诊断的发展概况,七十年代，美国应用羊膜囊穿刺术进行产前诊断,每年大约有15，000位孕妇进行宫内诊断以预测遗传性疾病。,出生前或出生时出现的解剖和生理异常，可以是全部的也可以是局部的，可以是宏观的也可以是微观的。 出生时/前出现的畸形：发育不全、功能障碍和疾病。,出生缺陷定义,在围产医学领域，出生缺陷和遗传性疾病正在成为社会关注的重大卫生问题。出生缺陷干预是一个系统工程，需要全社会的参与，而产前诊断是其中非常重要的一环。,产前诊断适应症,35岁以上的高龄孕妇；产前筛查出的高危人群；曾生育过染色体病患儿的孕妇；产前检查怀疑
3、胎儿染色体病的孕妇；夫妇一方为染色体异常携带者；孕妇可能为某种X连锁遗传病基因携带者；其他，如曾有不良孕产史或特殊致畸因子接触者；羊水过多或过少者。,产前诊断的方法,有创性检查： 无创性检查：,产前诊断的方法,一、有创性检查：1、羊膜腔穿刺2、绒毛取样3、脐静脉穿刺4、胚胎镜,羊膜腔穿刺,羊膜腔穿刺取材时间 妊娠16-21周当没有足够的羊水细胞生长时，必须在 14天内告知临床医生和病人,绒毛取材,取材方法 经阴绒毛活检 取材时间最好在停经 50-70 天之间 经腹绒毛活检 取材时间10-14周妊娠,经腹脐静脉穿刺,经腹脐静脉穿刺取材时间 妊娠18周开始直至足月优点：胎血细胞培养制备染色体只需培
4、养48-72小时即可收获细胞进行核型分析。,经腹脐静脉穿刺应用：,快速胎儿核型分析 胎儿红细胞压积 嵌合胎盘 胎儿血小板计数 甲状腺功能减低 血红蛋白病甲状腺功能亢进 FISH的快速诊断胎儿贫血 胎儿感染,胚胎镜,一般在妊娠18-22周进行。可发现胎儿外观异常(皮肤、颌面、肢体、神经管畸形)，可进行胎儿组织活检、脐带穿刺采集胎儿血。,另外胎儿组织取样还有： 胎儿皮肤取样、胎儿肝活检、胎儿肌 肉取样等技术。,产前诊断的方法,二、无创性检查： 1、超声影象检查 长期观察证实，B超对胎儿和母亲无害。 一般认为，超生强度低于20mW/cm2，持续间不超过30分钟，对孕早期（3个月以内胎儿）时安全的。,
5、正常结构缺如，如无脑儿； 赘生物形成，如畸胎瘤； 阻塞所致的脏器扩张，如脑积水； 疝的形成：如脑膨出； 胎儿结构大小异常：如小头畸形; 胎儿脏器运动异常：如胎心结构缺损； 其它：羊水过多或过少,超声检查范畴,产前诊断的方法,2、母体血中的胎儿细胞检测 1969年人们发现母体血中存在很少量的胎儿细胞，这使人们想到可以通过分离母体血中的胎儿细胞来对一些疾病作产前诊断。 该技术尚处于发展的早期，一系列的问题尚待解决。,产前诊断的方法,2、母体血中的胎儿细胞检测 方法： 流式细胞术分选法 磁珠分离法 免疫亲和层析法 密度梯度离心法,产前诊断的方法,3、循环胎儿DNA在产前诊断中的应用：意义：用于检测胎
6、儿性别用于检测胎儿血型(RhD)检测来源于父亲的特异的DNA序列可诊断染色体非整倍体胎儿诊断和筛查常染色体隐性遗传病,产前诊断的技术方面,产前诊断的技术方法 细胞学方法 生物化学方法 仪器检查方法 分子生物学,1、生物化学方法： 利用羊水、羊水细胞、绒毛细胞或血液进行蛋白质酶和代谢产物的检测，诊断胎儿是否正常，这种方法亦常用于遗传性代谢病及分子病的产前诊断。,产前诊断的技术方面,酶学分析,样品来源羊水穿刺培养的羊水细胞(成纤维细胞)羊水中酶活性测定绒毛取样绒毛细胞直接匀浆测定酶活性培养绒毛细胞测定酶活性,酶活性测定的酶种类,临床诊断血清芳基硫酸酯酶A，-半乳糖苷酶白细胞-艾杜糖苷酶测定，-葡萄
7、糖苷酸酶皮肤成纤维细胞芳基硫酸酯酶A，-岩藻糖苷酶，-半乳糖苷酶，-葡萄糖苷酶及氨基己 糖苷酶产前诊断羊水上清芳基硫酸酯酶A，-岩藻糖苷酶，-半 乳糖苷酶及氨基己糖苷酶测定培养细胞-岩藻糖苷酶，-半乳糖苷酶绒毛,常见的溶酶体贮积症及其酶缺陷,病 名 酶 缺 陷粘多糖贮积症(MPS) H型-L-艾杜糖苷酸酶MPS B-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶MPS B型-半乳糖苷酶MPS 型芳基硫酸酯酶BGM1神经节苷脂贮积症-半乳糖苷酶GM2神经节苷脂贮积症N-乙酰-D-氨基己糖苷酶(Hex)Tay-Sachs病Hex ASandhorff病HexA 、HexBGm2激活蛋白缺乏症酶蛋白正常，不能降解天然Gm2
8、，可降解人工底物异染性脑白质营养不良芳基硫酸酯酶A戈谢病-葡萄糖苷酶尼曼-匹克氏病型鞘磷脂酶Fabry病-半乳糖苷酶岩藻糖苷贮积症-L-岩藻糖苷酶糖元贮积症型（Pompes病） -葡萄糖苷酶,2、细胞学方法 抽取羊水、脐静脉血或吸取绒毛进行细胞培养，分析胎儿染色体有无异常，以避免染色体异常的胎儿出生。,产前诊断的技术方面,产前诊断常用DNA分析方法,常用DNA分析方法短重复序列长度多态性（STR）单链DNA构象多态性（SSCP）多重PCR巢式PCR限制性内切酶,荧光原位杂交技术 (FISH),利用非放射性的萤光信号对原位杂交样本进行检测的技术特点 快速准确常用13，18，21，X,Y及染色体微
9、小片段缺失,荧光原位杂交技术 (FISH),原理 FISH技术是用萤光集团标记特异性的DNA探针，再将标记信号的DNA探针与待测样本进行原位杂交，在荧光显微镜下对萤光信号进行辨别和计数，最终通过萤光信号的颜色和树木的异常与否，达到诊断疾病的目的。,存在的问题： 在10-20的病例中结果无意义 2-10%的病例中有母体细胞的污染 可能有假阴性的结果,荧光原位杂交技术 (FISH),产前诊断的工作程序,遗传咨询疾病的临床诊断、鉴别诊断实验室诊断（确诊、鉴别诊断、预分析）细胞遗传学生化遗传学分子遗传学妊娠确定取材产前诊断报告结果,产前检测的伦理学问题,强调知情选择实验室或超声波检查结果模棱两可的可能
10、性。产前诊断过程对胎儿和孕妇可能造成的医源性伤害。,自主权原则 医生应该向孕妇或夫妇公布所有与临床相关的发现，包括该病临床上可能出现所有表现。,产前检测的伦理学问题,产前检测的伦理学问题,生育的选择权在受检的夫妇，而不在医师或政府；涉及生育的问题，妇女是最重要的决定者；,申请夫妇必须理解产前筛查及产前诊断不能保 证出 生胎儿必定正常；不是任何一位孕妇在任何孕期都能进行产前诊断；夫妇必须明白他们的胎儿可能会有某种遗传风险而此 病只是有可能会检查出来；,产前诊断的局限性,产前诊断的局限性,告知父母：由于有许多疾病在出生前是无法确定的，产前诊断不能确保出生健康的胎儿；除了因某病儿而寻求产前诊断外，医
11、生并不知道该家庭是否具有某种病的风险。, 就诊夫妇必须明确产前筛查和产前诊断的区别 就诊夫妇必须明确没有一种检查实验是完美无缺的,产前诊断的准确性,产前诊断合同,要点：特定疾病的介绍本例产前诊断的背景 产前诊断的项目内容双方签字及联系方式,特定疾病的介绍,疾病名称疾病的致病机理目前的诊断方法、准确性实验室的免责声明由于这种遗传异质性，实验室仅对实验结果的可靠性负责，对临床诊断出错所致的结论偏差不负责 取材所造成的各种后果与实验室无关,未来:新生儿脐带血DNA全面检查,诊断:细胞遗传学;分子学；基因芯片易感性全面测定- 过敏检测(包括药物)- 感染- 糖尿病- 心脏疾病- 癌症(某些特定的)- 肥胖症,衷心感谢！,
