1、一般毒性实验,1,急性毒性试验,第一节：急性毒性试验,急性毒性参数,危险性评估,慢性毒性试验,毒作用机制,试验目的,第一节：急性毒性试验,经口急性毒性试验：LD50,经呼吸道静式吸入式急性毒性试验：LC50,经皮肤急性毒性试验：LD50,最常用的方法是测定LD50 这又是为什么呢？,一些常见化学物的急性LD50,LD50,死亡率随剂量变化最敏感的是中段，由此不难理解将半数致死量作为判定化学物毒性指标的原因。,LD50 or LC50,经典急性毒性试验,曲线拟合法 Bliss 法,插值法 累积法、改良寇氏法、霍恩法,LD50的测定,死亡率呈正态分布。最小剂量组的死亡率80%。,剂量按等比级数分组
2、；,改良寇氏法适用条件,各组动物数应相等；,观察时间,毒性反应观察,染毒途径与方式,剂量与分组,选择实验动物,某化学物LD50的测定,种属和品系：,年龄和体重：,数量和性别：,啮齿类常用小鼠或大鼠。非啮齿类常用狗或猴。,变异不应超过该批平均体重的20。小鼠：1822克。大鼠：180-220克。,小动物每组10只。雌雄各半。,选择试验动物,无相关资料,了解结构和性质相似化学物的毒性资料，确定预期毒性中值。以此与其毒性中值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设2个剂量组为预试验剂量。,剂量与分组,灌胃、喂食、吞咽胶囊,静式吸入、动式吸入,经皮肤染毒,经注射染毒,定性试验、定量试验,注射量
3、的规定,经口染毒,呼吸道染毒,染毒方式,中毒症状死亡情况病理变化,毒性作用观察,一般为14天,观察时间,C57,Kunming,急性毒性分级,外源化合物的急性毒性分级(WHO，2003),第二节：局部毒性试验,皮肤刺激试验,急性眼刺激试验,2.1.急性眼刺激试验,观察时间：7天，可延长至21天,观察指标：结膜、角膜、虹膜,染毒方式：一侧眼结膜囊内,剂量：一次剂量,实验动物：家兔,2.1.急性眼刺激试验,2.2.皮肤刺激试验,观察时间：不超过14天,观察指标：红斑、水肿,染毒方式：涂抹于动物皮肤上,剂量：一次或多次剂量,实验动物：家兔、豚鼠,2.2.皮肤刺激试验,第三节：亚慢性和慢性毒性试验,概
4、念,第三节：亚慢性和慢性毒性试验,概念,毒性效应谱、毒作用特点、靶器官,毒作用机制、毒作用可逆性,剂量-反应关系,毒效应差异，确定安全系数，结果外推至人,亚慢性和慢性毒性试验主要目的,（一）实验动物选择,亚慢性毒性试验 年龄：大鼠50100g 狗 46月 数量：小动物20 大动物8 性别：雌雄各半,慢性毒性试验年龄：大鼠 5070g 狗 4月 小鼠 初断乳数量：小动物40 大动物8性别：雌雄各半,研究方法,染毒期限,食品毒理学,环境毒理学,致癌试验,工业毒理学,（二）染毒期限,经口: 鼠常用灌胃、喂饲法。犬用胶囊法。 经呼吸道：持续4h。 注射染毒：腹腔注射。,（三）实验动物染毒方式,（四）剂量选择和分组,亚慢性毒性的剂量选择 阴性对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 急性毒性的阈剂量 1/201/5 LD50 组距：24倍,慢性毒性的剂量选择 阴性对照组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 亚慢性阈剂量或其1/51/2 1/10 LD50 组距：210倍,一般观察：外观体征、行为活动、体重、摄食 眼部检查 血生化指标 尿常规检查 体温、心电图检查 病理检查：大体解剖、组织病理学 特异性指标,（五）观察指标,结果评价,剂量依赖性趋势,反应重现性,相关指标变化,性别差异,效应的时间变化趋势,效应差异的大小,历史对照的作用：差异是否由受试物引起,参考资源,Thank You！,
