1、流感疫苗生产及研究进展,内容,病毒性灭活疫苗概述,定义及分类,纯化全病毒疫苗：冻干人用狂犬病疫苗出血热、森脑-含氢氧化铝佐剂裂解：流感病毒裂解疫苗,灭活疫苗：称死疫苗，是指利用加热或甲醛等理化方法将人工大量培养的完整的病原微生物杀死，使其丧失感染性和毒性而保持免疫原性，并结合相应的佐剂而制成的疫苗。,长春公司的病毒性灭活疫苗,两种灭活剂的比较,常用的裂解剂,流行性感冒（Influenza）即流感，是由甲（A）、乙（B）、丙（C）三型流感病毒分别引起的急性呼吸道传染病。常造成不同程度的流行，对人类的健康造成巨大的威胁。,流感和流感病毒,流感的流行特点,是在短期内突然发生，迅速蔓延，造成不同程度的
2、流行，包括世界大流行，局部暴发流行及散发。具有一定的季节性：温、寒带地区常在冬、春季节流行，但热带和亚热带地区任何季节都可以流行。流感病毒传播迅速、流行广泛、抗原易变异，人群的特异性免疫状况不稳定。发病率高，并伴有一定的死亡率。最高的为青少年，高危人群为年迈体弱或带有慢性疾病患者。每次流感流行后在人群中总要造成不同程度的超额死亡。流感患者和隐性感染者是流感的主要传染源。从潜伏期末到发病的急性期（约7天）都有传染性。,死亡率升高超过一定的正常临界水平,流感病毒形态结构,流感病毒的超细微结构照片,流感病毒电镜照片,流感病毒形态结构,甲型流感病毒基因组各节段的大小与功能 节段 长度（bp）编码蛋白
3、主要功能RNAI 2341 PB2 RNA转录酶；识别和结合来源于宿主细胞的帽子RNA2 2320 PB1 RNA转录酶主要成分；启动转录和RNA合成延伸RNA3 2233 PA 具有解旋酶话性RNA4 1778 HA 结合靶细胞受体，诱导病毒与靶细胞融合诱导中 和抗体，凝集红细胞RNA5 1565 NP 与基因组RNA结合，参与形成核糖核蛋白（RNP） 颗粒RNA6 1413 NA NA活性；水解细胞多糖受体，协助新生病毒颗 粒从被感染宿主细胞表面游离下来，促使子代病 毒释放RNA7 1027 M1、M2 病毒基质膜蛋白，有保护作 用；质子通道作用RNA8 890 NS1、NS2 非结构蛋白
4、，抑制宿主细胞蛋白合成或参与 vRNA合成,流感病毒的理化特性 流感病毒对热敏感，通常5630min被灭活，但有些毒株5690min被灭活。 最适PH为7.0-8.0可被紫外线灭活因其为带囊膜的病毒，故对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂敏感。,流感病毒的变异,原因：流感病毒结构特点天然宿主的广泛存在密切接触,方式： 抗原漂移（Antigenic drift） -小变异，同一亚型 -基因点突变所致 -引起流行抗原转换（Antigenic shift） -大变异 -基因片段交换 -引起大流行,抗原漂移（Antigenic Drift）,RNA,Sialic acid,Antibodies,Hemaggl
5、utinin,Neuraminidase,HA 和/或 NA 基因的点的变异 频繁发生 A 型和B型发生,抗原转换（Antigenic shift),人类和动物毒株的RNA发生交换 (HA 和/或NA基因的全球性变异),导致新的亚型出现 少见但后果严重 只在 A型出现,1918Spanish Influenza H1N1,1957Asian Influenza H2N2,1968Hong Kong Influenza H3N2,2009Novel Influenza H1N1,H7 1980,1985,1995,2005,1975,1996,2002,H5,2002,1997,H9,1999,
6、流感的流行情况,抗原漂移所引起的历史上的流感流行,PB1HANA,PB1NA,N Engl J Med 10.1056/nejmoa0903810,甲型H1N1流感病毒,4种不同来源的基因 4 different genes:北美猪流感病毒 North America swine欧亚猪流感病毒 Asia/Europe swine人流感病毒 Human influenza禽流感病毒 (非H5) Avian (Non-H5),流感的实验室诊断,流感已成为全球患病人数最多的一类疾病。接种流感疫苗是目前预防和控制流感最经济、最有效的手段，已被广泛采用，并证明有效率达到 70以上。,流感疫苗,目前，使用
7、的流感疫苗是三价的，包括两种甲型（H1N1，H3N2）和一种乙型(B)流感病毒抗原成分，应用最广泛的有： 灭活：Inactivated influenza vaccine（IIV）：6月以上 减毒：Live attenuated influenza vaccines（IAIV）：2-49岁,当前主要应用的疫苗种类,灭活疫苗种类和生产工艺,全病毒疫苗 裂解疫苗 亚单位疫苗,灭活疫苗种类,3-4月份10-11月份,生产周期5-6个月,生产工艺,生产工艺,单价原液制备,毒种和病毒尿囊液制备,毒种MOI接种量,温湿度培养时间通风,温度时间,颜色量,选胚,接种,培养,收获,纯化,裂解,质量控制,中间产品
8、质量控制,单价病毒原液质量控制,某些病毒能够与人或动物的红细胞发生凝集，这称之为红细胞凝集反应（HA）。这种凝集反应被加入的特异性血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验（HI）。,血凝和血凝抑制试验,血凝和血凝抑制试验,血凝素含量检测（单扩）,标准直线,半成品质量控制,成品检测指标,目前广泛应用流感疫苗季节性四价流感疫苗细胞基质流感疫苗喷鼻减毒活疫苗基因工程流感疫苗病毒样颗粒、病毒载体及DNA流感疫苗通用流感疫苗,研发与展望,疫苗效果影响因素,接种疫苗是当今预防和控制流感发生和流行最有效的手段。目前，使用的流感疫苗是三价的，包括两种甲型（H1N1，H3N2）和一种乙型(B)流感病毒抗原成分，应用最
9、广泛的有： 灭活：Inactivated influenza vaccine（IIV）：6月以上 减毒：Live attenuated influenza vaccines（IAIV）：2-49岁,目前广泛应用的流感疫苗,近年获批上市的新型流感疫苗,充实一下新型流感疫苗表,1985年后在全球流行的原单一谱系B型流感病毒BYamagata，逐渐演变为二种抗原性截然不同的BVictoria和BYamagata二个谱系交替或者一个谱系为主的混合流行。这二个谱系B型病毒之间很少或者没有交叉保护,甲型和乙型流感病毒血凝素基因进化树,四价流感疫苗背景,已获批的四价流感疫苗,在研的四价流感疫苗,研究中的流感疫苗,1、病毒样颗粒流感疫苗2、病毒载体流感疫苗3、DNA流感疫苗,通用流感疫苗,研发趋势,流感病毒家族中各亚型的流感病毒其M1蛋白、M2蛋白、NP蛋白和HA蛋白的保守表位部分非常稳定。将这些蛋白与佐剂或载体联合制备出通用流感疫苗，可以刺激机会产生交叉免疫保护反应。,常用信息网站,关爱生命 呵护健康,
