1、QIAxcel 全自动毛细管核酸分析系统培训手册DNA版基因有限公司 1基因有限公司生命科学组目 录一、 QIAxcel 全自动毛细管核酸分析系统简介二、 QIAxcel 全自动毛细管核酸分析系统安装和维护三、 氮气瓶的安装及使用四、 Gel Cartridege 凝胶卡夹的安装及校正五、 培训所需试剂、仪器及耗材六、 DNA 样品演示实验七、 BioCalculatorTM 软件基本功能及数据分析八、 常见问题解答基因有限公司 2一QIAxcel 全自动毛细管核酸分析系统介绍QIAGEN 是全球核酸、蛋白质分离纯化试剂和新技术的权威供应商 ,总部设在德国。其主打产品是 QIAxcel,用于高
2、通量 DNA/RNA 分离分析 ,这个产品广泛用于遗传分析,疾病检测以及食品鉴定等方面。相比其它同类产品而言,其特点是高效,省时,安全,适用于标准化。(一)产品介绍:技术参数:1 自动加样 全自动化 96 孔加样;2 高通量 12 通道上样,96 孔板连续检测;3 无需制胶 更换式凝胶试剂盒;4 快速分析 11.3 小时/96 个样品;5 高灵敏度 PCR 产物检测最低 DNA 浓度为 0.1ng/ul;6 高分辨率 500bp 以下达 25 个 bp;7 数据显示 电泳图谱和峰图8 体积小 便于搬运;9 污染小 无敞开式 EB 污染。10 重量 23kg(二)BioCalculator TM
3、 软件1操作简单,多种分离方法可供选择2多种内嵌式方法模板适用各种用途3数据分析界面友好:既可用于定性分析也可用于定量分析,一次完成多组数据分析4数字化实验数据采集: 实验数据以电泳峰图和胶图两种形式显示 可适时电泳峰图和胶图 电子化实验数据方便储存和传递基因有限公司 3二QIAxcel 全自动毛细管核酸分析系统安装和维护(一)安装条件1位置要求:稳定水平的操作平台放置设备,远离震荡设备。2温度要求:253湿度要求:40954电源:100-230V, 50-60 Hz, 360W (VA)5电脑要求: Processor处理器: Pentium IV 1.8 或更高 硬盘: 40GB 内存:
4、512 MB RAM 显示器: 800x600 操作系统:Microsoft Windows XP 6氮气要求:纯度为99.999%的 高纯氮气7(二)维护用湿布清洁仪器的外表面。不能灭菌,不需要用化学物质清洁仪器外表面,否则可能会引起表面损坏。如果矿物油偶尔滴在样品支架或溢出到样品支架时,用热水和肥皂水清洗(和新的卡夹第一次使用时清洗的过程相同) 。凝胶卡夹的储存温度推荐为 1030,相对湿度为 4095。基因有限公司 4三氮气瓶的安装及使用关于氮气瓶的安装,将由工程师完成或请在工程师指导下完成此工作1 先将减压阀安装到氮气瓶上2 请选择如下图所示规格的转接头,将氮气瓶和仪器连接起来。安装完
5、成后要确保不能漏气。3 仪器打开前,先打开氮气瓶总阀,并将减压阀压力调到 40psi 左右,再开始实验。4 实验完成后,将减压阀和氮气瓶总阀关闭四Gel Cartridege 凝胶卡夹的安装及校正(一)凝胶卡夹的安装1 使用前将卡夹中的所有试剂室温平衡,并将卡夹置于盛有 DNA Washing Solution 的 catridege stand 中平衡 20min.2 用温和的去污剂清洗盛溶液的盘子,然后用去离子水彻底冲洗干净3 加 8ml 的 DNA Washing Solution 到盛溶液的盘子的 WP 和 WI 槽4 加 16ml 的 Separation Buffer Soluti
6、on 到盛溶液的盘子的 BUF 槽5 然后加 2ml 的矿物油到 WP 和 WI 槽,加 4ml 的矿物油到 BUF 槽,防治洗液和分离液挥发(图 1)基因有限公司 5图 16 加 15ul 的 Alignment Marker 到 0.2ml 的连管中,每孔加一滴矿物油,然后插入到盛溶液的盘子的 MARKER1 的位置(图 2)7 加 15ul 的 Intensity Calibration Marker 到彩色的 0.2ml 的连管中,然后插入到盛溶液的盘子的 MARKER2 的位置(图 2)图 28 点击上的按钮,仔细将盛满溶液的盘子放到仪器的对应支架上9 去掉凝胶卡夹后面的封胶带,打开
7、仪器上的卡夹门,将凝胶卡夹正面朝前插入仪器卡夹内,凝胶卡夹上的加密钥匙插入仪器相应的适配器中,关上卡夹门,凝胶卡夹的 ID 号将会在仪器的控制面板上显示(图 3) 。基因有限公司 6图 3(二)凝胶卡夹的浓度校正1 双击 快捷图标,进入软件操作,在下选中 (图4)基因有限公司 7图 42点击按钮(图 5 A)图 53打开 CAL.seq 文件,点击(图 6)基因有限公司 8图 64点击绿色的按钮,运行程序,程序结束后,在仪器的控制面板,下选择(图 7)图 7基因有限公司 95校正过程结束后, (Cal )会出现凝胶卡夹的 ID 的后面(图 8 C) 。图 86去掉仪器控制面板下 列表中的 Purge.mtd 和 HVpurge.mtd 方法,保留 CAL.mtd 方法,并且重新命名样品的名字,双击控制面板上绿色的按钮7程序运行完成后,确认所有通道只有一个峰。8在 下选择 Parameters(图 9)图 9