1、1,第四章 病毒的基本性状,病原生物学与免疫学教研室 潘凤兰 副教授 联系方式:81487384 (o),2,公元前1500-1300年埃及浮雕提供了关于脊髓灰质炎最早纪录。年轻祭司的一条腿萎缩了,与脊髓灰质炎症状相似。,3,4,5,唇疱疹,疱疹性齿龈炎,6,单纯疱疹病毒 HSV,7,麻疹,8,1892年,俄国Ivanovski重复了麦尔的试验,发现患病叶片汁液通过细菌过滤器仍能引发健康的烟草发病,认为病原不是细菌,而是比细菌小的感染性的因子引起。有感染性的滤过因子 virus的中文译名病毒的概念,9,简 介病毒(virus):是一类非细胞型的微生物。 特点: 1、体积微小。多在电镜下才可观察
2、到。 2、结构简单,无细胞结构。只含一种类型核酸(DNA或RAN)。 3、严格的细胞内寄生。 4、对抗生素不敏感。但对干扰素敏感。,10,病毒(virus):是一类体积微小、结构简单、只含一种类型核酸(DNA或RAN),严格细胞内寄生的非细胞型微生物。 病毒性疾病的特点 1、发病率高; 2、传染性强; 3、致死率高; 4、缺乏有效的治疗方法。,11,水痘带状疱疹,天花,狂犬病,12,病毒体(virion):具有一定形态结构和感染性的完整病毒颗粒。,第一节 病毒形态、结构与化学组成,13,一、病毒的大小和形态 1、病毒的大小: 测量单位为纳米(nm,1nm=10-3 m),14,病毒的大小,St
3、aphylococcus aureus,Chlamydia,Pox virus,Herpes virus,Influenza virus,Picornavirus (polio),300 20 nm,Size of viruses,15,球形病毒(spherical virus),丝杆状病毒(filamentous virus),弹状病毒(bullet shaped virus),砖形病毒(brick shaped virus),蝌蚪状病毒(tadpole shaped virus),病毒的形态,Five shapes,16,Viral structure,核心 core,衣壳 capsid,
4、刺突 spike (包膜子粒 peplomer),核衣壳nucleocapsid,包膜envelope,病毒的结构,17,二、病毒的结构和化学组成,(一)病毒体的结构: 1、 核心(core) 2、 衣壳(Capsid),3、包膜(envelop),核衣壳nucleocapsid,裸露病毒naked virus = 核衣壳 = 病毒体包膜病毒enveloped virus = 核衣壳 + 包膜 = 病毒体,18,19,1、 核心(core):仅由裸露的核酸构成。DNA:dsDNA(多见) ssDNA: +ssDNA和 -ssDNARNA:ssRNA(多见): +ssRNA ssRNA dsRN
5、A,single-stranded (ss) or double-stranded (ds),20,核酸的功能: 1)病毒的复制 2)决定病毒的特性 3)使病毒具有感染性,21,2、 衣壳(Capsid): 衣壳由一定数量的壳粒组成。,22,二十面体对称型,病毒衣壳的几种对称形式(根据壳粒的数目和排列方式不同),23,螺旋对称型,24,复合对称型,25,衣壳的功能:1)保护核酸2)参与感染过程3)具有抗原性,26,3、包膜(envelop): 包绕在核衣壳外,包膜表面有钉状突起物称做刺突(spike )或包膜子粒 如 血凝素(HA) 神经氨酸酶(NA),27,*包膜具两重性:宿主细胞膜的特性
6、病毒的(糖蛋白刺突)特性*从宿主细胞“出芽”获得*对脂溶剂敏感(乙醚实验),28,包膜的功能:1)维护病毒的完整性2)具有与宿主细胞膜亲和及融合的性能3)具有病毒抗原的特异性,29,第二节 病毒的增殖Multiplication of Virus,30,病毒的增殖方式,31,一、病毒的复制过程,1、吸附 2、穿入 3、脱壳4、生物合成 5、组装和释放,复制周期(replication cycle),32,1.吸附(adsorption)感染的第一步和关键*病毒体表面配体蛋白 + 易感细胞表面受体*决定病毒的嗜组织性和宿主特异性,33,2.穿入(penetration)病毒体穿过细胞膜,进入细胞
7、*融合:包膜病毒 + 部分裸露病毒*胞饮:裸露病毒 + 部分包膜病毒*直接注入:噬菌体,34,3.脱壳(uncoating):病毒脱去衣壳释放核酸*一些裸露病毒:穿入时即脱壳*包膜病毒:在细胞溶酶体酶作用下脱壳*复杂病毒(痘病毒):细胞溶酶体脱外壳, 病毒脱壳酶脱内壳,35,4、生物合成(1)是指病毒核酸的复制与蛋白质的合成过程。(复制出子代核酸和蛋白质外壳)(2)此阶段在宿主细胞内找不到完整的病毒体,称为隐蔽期。(3)生物合成的基本过程: 转录mRNA 翻译早期蛋白质 复制子代核酸 合成晚期蛋白质,36,病毒生物合成的方式:自学,胞饮,1. 双链DNA病毒:以正链DNA为模板,转录产生mRN
8、A,再在细胞核糖体上合成蛋白质。,2. 单链DNA病毒:先形成双链DNA,然后同1。,3. 正链RNA病毒:正链RNA具有mRNA功能,先合成一聚蛋白,加工后形成具有各种功能的病毒蛋白。,4. 负链RNA病毒:先转录产生mRNA,再合成蛋白。,5. 双链RNA病毒:以负链RNA为模板转录,然后同4。,6. 逆转录病毒:以正链RNA为模板逆转录为DNA即cDNA,后者整合到细胞染色体,然后再合成mRNA和蛋白质。,37,(1)装配: 新合成的子代病毒核酸与蛋白质在宿主细胞内组装为成熟病毒颗粒的过程。 大部分DNA病毒在细胞核内组装:如腺病毒大部分RNA病毒在细胞浆内组装:如脊髓灰质炎病毒有些病毒
9、在细胞核膜上组装:如疱疹病毒也有病毒在细胞膜上组装:如流感病毒,5.装配与释放,38,(2)释放: 成熟病毒从宿主细胞游离出来的过程称为释放。 释放的方式: 细胞裂解:裸露病毒 出芽:包膜病毒 细胞间桥或细胞融合:巨细胞病毒,39,40,41,病毒增殖的结局: (1) 复制出完整的子代病毒颗粒。 (2) 病毒基因与宿主细胞基因整合,不产生子代病毒颗粒。 (3) 异常现象。,42,二、与病毒增殖有关的异常现象1 、顿挫感染: 病毒在宿主细胞内不能正常增殖 非容纳细胞: 不能为病毒增殖提供条件的细胞 容纳细胞: 能为病毒增殖提供条件的细胞,43,2、缺陷病毒形成: 因病毒基因不完整或基因位点发生改
10、变,不能进行正常增殖的病毒称为缺陷病毒。 但当它与另一种病毒共同培养时,若后者能弥补缺陷病毒的不足,使缺陷病毒增殖出完整的病毒体,则这种有辅助作用的病毒被称为辅助病毒。,44,3、干扰现象(interference) 两种病毒感染同一种细胞或同一机体,常发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象,称为干扰现象。,45,干扰现象的种类: 异种干扰 同种干扰 自身干扰,46,干扰现象的机理(1)病毒诱导宿主细胞产生干扰素。(2)易感细胞表面受体为干扰病毒占据破坏。(3)缺陷干扰颗粒(defective interfering particle, DIP )的干扰作用。,47,(1)病毒间的干扰现象能够终
11、止感染,使机体康复,是机体非特异性免疫的重要组成部分。,干扰现象的意义:,48,(2)病毒疫苗使用注意事项避免病毒疫苗间干扰现象的发生。避免病毒疫苗被野毒株的病毒干扰而影响疫苗的免疫效果。,49,第三节 病毒遗传学,50,病毒的遗传是相对的,变异才是绝对的。,51,一、病毒变异的类型: 遗传物质 基因突变 变异 基因重组与重配 基因整合 非遗传物 基因产物的互补作用 质变异 病毒的表型交换和表型混合,52,1、 基因突变: 单一核苷酸的碱基发生变化。 基因突变可产生突变株。,53,温度敏感突变株(temperature sensitive mutant ,ts突变株) 在2835下可增殖,在
12、3740条件下不能增殖。 ts突变株有较高的恢复原来病毒特性的回复突变率(10-4)。经多次突变后,可获得稳定的病毒突变株,而突变株多为减毒株,利用此机理可制备病毒疫苗,如脊髓灰质炎疫苗。,(1)条件致死突变株,54,(2)宿主范围突变株(hr株) Host range mutants 是指某些病毒由于突变,使其对宿主细胞的感染范围发生改变,只能在特定的细胞中增殖,称为宿主范围突变株 。如狂犬病疫苗。,55,(3)耐药突变株: 病毒酶基因改变 降低对药物亲和力 对药物不敏感,56,2、 基因重组与重配 两种有亲缘关系、但性状不同的病毒感染同一细胞时,病毒之间交换核酸片段而引起的变异。,57,基
13、因重组:两种不同病毒的核酸片段分子内的互换基因重配:分节段的RNA病毒核酸片段分子间的互换 如流感病毒容易发生变异,与流感病毒分节段的遗传基因有关。,A,B,a,b,A,b,a,B,分子内基因重组(单链核酸) gene recombination,A,B,C,A,S,T,A,B,T,A,S,C,分子间基因重配(双链核酸) reassortment,A,B,a,b,59,3、病毒基因组与宿主细胞基因组整合 病毒基因组的一部分或全部插入宿主细胞染色体的现象。如肿瘤病毒、逆转录病毒。,60,非遗传物质变异:这种变异不能遗传 基因产物的互补作用:蛋白质水平的相互作用 缺陷病毒- 缺陷病毒 感染性病毒
14、- 缺陷病毒或灭活病毒,61,virus AP+C-,virus BP-C+,互补作用Complementation,P+C-,P+C-,P+C-,P-C+,P-C+,P-C+,PolymeraseExpressedNo capsidprotein expressedNo virus out,No polymeraseExpressedCapsid proteinExpressedNo virus out,The same viruses out,62,virus A,virus B,virus A,virus A,virus B,virus B,表型混合,表型交换,病毒的表型交换和表型混合,
15、63,二、病毒遗传变异的生物学意义 用于病毒性疾病的诊断、治疗和预防 如:减毒活疫苗 牛痘接种法预防天花,64,第四节 理化因素对病毒的影响,65,概念: 灭活(inactivation) 病毒受理化因素作用后失去感染性称。 灭活的病毒仍保留其抗原性、红细胞吸附、血凝和细胞融合等特性。,66,影响因素:一、物理因素: 1、温度大多数病毒耐冷不耐热,6030min可灭活。肝炎病毒例外。在干冰温度(-70)和液氮温度(-196)下更可长期保持其感染性,反复冻融可使许多病毒灭活。,67,温度使病毒变性的机理: 使病毒衣壳蛋白、包膜的糖蛋白刺突和病毒复制所需的酶类发生变性。,68,2、PH: 大多数病
16、毒在PH59的范围较稳定,病毒体对PH的稳定性常被用于病毒体鉴定的指标之一。常在中性或弱酸性的环境中保存病毒。,69,3、射线: 射线、X射线以及紫外线均能使病毒灭活。 但有些病毒经紫外线灭活后,经可见光照射,可使灭活的病毒复活,故不宜用紫外线来制备灭活病毒疫苗。,70,二、化学因素的影响,1、脂溶剂 包膜病毒对脂溶剂敏感,借此可鉴别有包膜病毒和无包膜病毒。2、各种化学消毒剂 对许多化学消毒剂(酚类、氧化剂)敏感。,71,3、抗生素与中草药 对抗生素不敏感,所以保存病毒标本时, 可加一些青、链霉素抑菌。 某些中草药对病毒有一定的抑制作用。,72,具有广谱抗病毒作用 可抑制病毒核酸的复制和蛋白的
17、合成,达到抗病毒的目的 抗细胞增殖作用 IFN有抗细胞分裂和增殖作用,抑制活化的癌基因的复制和表达。因此,它具有抗肿瘤作用,干扰素的作用,73,第五节 病毒的分类与命名法,74,病毒的分类1. 按宿主分: 动物病毒、植物病毒、真菌病毒、细菌病毒2. 按入侵部位、传播途径及所致疾病分: 呼吸道、肠道、肝炎、虫媒、嗜神经、经皮肤 粘膜传播及肿瘤病毒,75,3. 按核酸类型和包膜分:DNA病毒 双股有和无包膜 复合对称有包膜 单正股无包膜RNA病毒 双股 无包膜 单正股有和无包膜 单负股有包膜 逆转录病毒: HIV,76,二、病毒的命名规则:不采用拉丁双命名法科、属的名用斜体,科名的首字母大写;种名
18、首字母不大写,不用斜体,但如果是发现者命名的要大写。 例:疱疹病毒科:family Herpesviridae 单纯疱疹病毒2型:herpes simplex virus 2,77,第六节 亚 病 毒(subvirus)非典型病毒,是比病毒更小的致病因子。包括类病毒、朊病毒、卫星病毒。,78,朊病毒或朊粒p312Prion,79,朊 粒Prion 无核酸的蛋白质传染性因子,是蛋白酶抗性蛋白,致病因子是朊粒蛋白,可引起哺乳动物传染性海绵状脑病。,80,朊粒病(prion disease)为人畜共患病,最早于200年前发现羊瘙痒病(Scrapie), 后来发现CJD、Kuru,1986年发现牛海绵
19、状脑病(bovine spongiform encephalopathy, BSE),即疯牛病(mad cow disease)。人和动物中已知有近20种传染性海绵状脑病(TSE),朊粒病在人类主要有以下5种: 1. 库鲁病(Kuru) 2. 克雅病(Creutzefeldt-jakob disease, CJD) (传染性痴呆病或早老性痴呆病) 3. 克雅病新变种(new variant of CJD, nvCJD) 4. 吉斯特曼-斯召斯列综合症( Gerstmann-Straussler syndrome, GSS) 5. 致死性家族性失眠症(fatal familial insomni
20、a, FFI ),81,朊粒病共同临床特点潜伏期很长(550年),一旦发病6个月至1年全部死亡,表现为进行性痴呆,共济失调,震颤等,82,患瘙痒症的绵羊,患BSE的牛,83,库鲁病人,疾病早期,疾病晚期,84,河南省确诊一例罕见的致死性失眠症患者(2006年),一名年近五旬的男子已有半年多不能正常睡眠了,此前,在他的家族三代人中,已有近10人在20至50岁期间患这种“不知名”的怪病而相继去世。近日,河南省人民医院神经内科确诊其患的是罕见的致死性家族性失眠症。 据报道,该男子从今年1月份起突然出现睡眠障碍,有时浅浅入睡,有时会全身痉挛性抖动,还做一些匪夷所思的动作。例如,他的双臂在空中挥舞,像是
21、抓住了什么东西,然后使劲塞进嘴巴里,醒后他自己却一点也不知道。 经过夜间如此的“重体力劳动”,白天他无精打采,有些嗜睡,却又睡不着,双手不停地在身上抓挠,腿上、背上都留下了深深的抓痕,并出现了低烧、认知障碍和轻微的精神异常,有时连家门也摸不着。发病后,该男子和家人异常恐慌。原来,这个怪病的魔影已经笼罩其家族半个世纪,相继夺去了三代近10人的生命。,85,这名男子曾到多家医院就诊,但医生都没有见过这样的病人,说不清他得的到底是啥病。随着对病情的掌握和剖析,一个可怕的诊断浮现在医生脑海中, 致死性家族性失眠症,影像学检查也完全支持这一诊断。 从1986年意大利发现第一例致死性家族性失眠症至今,世界
22、上共报道了27个家系82例患者。2004年,湖北协和医院发现了我国第一例患者,但不久就死亡了。该男子如此庞大的患病家系,在我国还前所未有,世界上也非常罕见。,86,耐受蛋白酶消化和常规消毒,只有强碱(10N NaOH),高压消毒(134,1小时)才能灭活不含核酸,用常规PCR无法检测超长的潜伏期(平均20年),发病前无法检测和诊断变异和跨种属感染,具有大量的潜在感染来源,主要为牛、羊、鹿等反刍动物,传播的潜在危险不明,很难预测和控制感染途径多:已知有消化道(食入)、神经、血液均可感染。100%病死率,缺乏治疗药物,无法研制预防疫苗,朊病毒的特殊性质,87,1. 疯牛病是世界性问题,100多个国
23、家曾进口来自疯牛病发源地英国和西欧的动物饲料、血、骨产品。我国幅员辽阔,情况虽然尚不明朗,但潜在危险迫在眉睫2. 我国牛羊等牲畜和肉食加工业仍然分散,难以管理3. 我国周边国家,已有疯牛病出现。印度、巴基斯坦等均为英国危险动物饲料进口国,处于一触即发的危机状态。现代化国际贸易,多渠道人员、物质交往,为疯牛病输入造成温床4. 内源性朊粒病潜在危险很大,CJD可以自发。已知我国CJD发病年龄有年轻化倾向,已发现青壮年CJD5. 医源性感染(神经外科、器官移植、激素治疗、血源等)情况不清,难以控制,我国的严峻形势,88,病例讨论 某3岁幼儿园男孩,秋季因水样腹泻去医院就诊,诊断为病毒引起的婴幼儿秋季
24、腹泻。治疗应注射: A、抗生素 B、干扰素,89,1、病毒属于型微生物,必须在内生存,对抗生素。2、病毒体积微小,起测量单位是,必须在观察。3、病毒侵入细胞后以方式增殖,感染细胞产生的可抑制其增殖。病毒的复制周期包括、和五个阶段。,思考题,90,4、病毒基本结构仅由和构成,又称为。5、病毒受理化因素作用后失去感染性称-。6、大多数病毒耐 不耐 , min可灭活。 病毒例外。7、朊粒病在人类主要有-和-,在动物中已知有-和-。其致病因子是-。,91,作 业,名词解释: 1、 virus 2、virion 3、 inactivation 4、interference 5、 Prion问答题: 1、病毒的结构和化学组成? 2、病毒复制增殖的基本过程?其中生物合成过程中合成的早期蛋白质和晚期蛋白质分别是?,92,THANK YOU!,