1、临床输血前检查及配合性试验规范性要求,吴国光南宁输血医学研究所,输血医学与临床医学,输血医学是现代临床医学的组成部分输血医学是医学发展史上的重要里程碑输血医学是最早获得成功的组织移植输血医学是现代医学发展的重要支持手段输血医学是未来医学成功的重要载体,现代输血治疗理念,各类血液成分的适应症、指征和输注量，相关病例的输血和细胞治疗，输血不良反应的预防、诊断、处理，确保治疗的安全和有效性。,输血治疗的目的,1、补充携氧能力：输红细胞2、恢复血容量：输血浆、白蛋白3、补充胶体渗透压：输白蛋白4、血小板异常引起出血：输血小板5、控制感染：输粒细胞6、凝血因子缺乏引起的出血：输冷冻血浆、低温沉淀物7、补
2、充体内免疫能力：输免疫球蛋白8、补充人体微量元素：补铜、锌、锗等,输血救死扶伤的主要医疗措施,输血能对伤病员有害，甚至危及生命,现代输血医学和细胞治疗学科工作,核心问题：血液和血液成分输注治疗的安全和有效性 ，影响输血安全性的最主要因素之一 ： 血液和血液成分输注相关的免疫反应 Transfusion related immune reactions,国际性研究项目（Hemovigilance Programs）报告,* 英国输血不良反应调查；非传染性的输血反应数超过95%， 其中主要是输注相关的免疫反应 * 法国、加拿大和美国大量报告，输血相关的发病及致死的案例中，主要来自非输注相关的免疫反
3、应的危险，,临床常见严重输血相关的免疫反应,1，急性免疫性溶血反应2，延迟性免疫性溶血性反应3，发热，非溶血性免疫反应4，过敏反应5，输血相关急性肺损伤（TRALI）6，输血相关移植物抗宿主病（TA-GVHD）7，血小板同种免疫（HLA，HPA）8，粒细胞同种免疫（HNA）,引发输血相关免疫反应的基础是多态性的人类血型抗原和遗传标记,1，红细胞 抗原： 2，HLA抗原：3，粒细胞抗原:4，血小板抗原：5，血浆蛋白抗原：,多态性抗原存在是介导输血相关同种免疫反应的基础,* 血液的各种主要成分的遗传多态性， 红细胞、血小板和白细胞等成分都携带着有免疫活性的抗原， 人种、人群、地区的多态性差异。*
4、抗原和抗体的免疫应答是输血免疫反应问题的根本原因。,输血前检查及配合性试验, 预防、诊断和治疗输血相关免疫反应的实验室技术，血液和血液成分输注的安全和有效性的技术保障， 血液机构和临床输血科的工作基础。,输血前检查及配合性试验的基础免疫血液学技术,免疫血液学：描述各种成份的特异性抗原、抗体和他们的特异性免疫反应性，红细胞、血小板、白细胞和血浆蛋白的免疫活性抗原和涉及的抗体导致各类输血相关性免疫反应，现代免疫血液学的技术核心是血型血清学和分子生物学，构成了先进水平的临床输血前检查及配合性试验内容。,为什么要规范输血前检查及配合性试验, 确保结果的可信度， 确保结果的一致性，确保结果的临床参考价值
5、，为受血者提供安全和有效性的保障。,输血前检查及配合性试验目的和要求, 为受者选择血液或血液制品，血液成分在受者体内有效存活，无不良反应， 输入的红细胞在受者体内不凝集或不溶血、血小板不破坏、血浆成分不导致受者细胞显著破坏， 输入的血液或制品与受者血液在免疫血液学方面“相容”，使受者获得恢复健康所需的血液成分。,输血前检查及配合性试验的主要程序,受者的病史和标本等的检查、核对及处理；ABO和Rh系定型；抗体筛选和鉴定；交叉配血试验；标签和发血。,受者的病史和标本等的检查、核对及处理,（一）病史资料和信息的要求；（二）标本的要求。,ABO和Rh定型,（一） ABO定型和定型试验的规范性操作； 样
6、本、试剂、设备、技术的要求（二） ABO定型和定型试验中的常见问题。,Rh定型和定型试验,（一）Rh定型和定型试验 常规操作；（二） Rh定型和定型试验中注意的问题。1导致Rh血型鉴定出现假阳性的原因：2导致Rh血型鉴定出现假阴性的原因 。,抗体筛选和鉴定（一） 目的和原则,目的：受血者血清和血浆作常规的抗体筛选试验，发现有临床意义的不规则抗体，原则：受检的血清与试剂红细胞反应，发现37中有反应活性的抗体。试验环境和反应相：盐水试验法、白蛋白介质法、低离子强度介质法（LISS）、酶技术、抗球蛋白试验、聚凝胺（polybrene）促凝技术和PEG（聚乙烯乙二醇）促凝技术和微柱凝集试验等。,抗体筛
7、选和鉴定（二） 抗体筛选和鉴定技术,1抗体筛选和鉴定实验的试剂细胞； 2抗体的鉴定实验；（1）自身细胞检查 ；（2）使用试剂细胞中的谱红细胞(Panel Red Cell)检查 ，,用自身细胞检查抗体,目的：1，质控要求； 2，确定血清内是否有自身抗体； 3，确定血清内是否有自身抗体和同种抗体二者同时存在 。,用谱红细胞检查抗体,1，谱红细胞的组成；2，使用的反应环境和特异性技术；3，解释谱细胞的反应结果的主要因素 。,交叉配血试验,（一） 要求和内容 1， “主侧”配血：受血者血清对供者红细胞反应，是检测对供者红细胞起反应的抗体; 2， “次侧”配血：受血者红细胞对供血者血清，是检测对受者红
8、细胞起反应的抗体。3自身对照：受血者红细胞对受血者血清，目的是显示自身抗体、直接抗球蛋白试验阳性及假阳性的存在。,交叉配血试验,（二）影响交叉配血试验的一些因素1，样本的原因；2，试剂的原因；3，试验条件的原因；4，技术的原因；5，自身抗体的原因；6，不明的同种抗体的原因。,标签和发血,（一）要求 配、发血单上，清楚受者的姓名、床号、ABO及Rh血型、医院、献血员姓名、编号、交叉配血试验结果的解释、发出血液制品的名称、日期和时间，工作人员的姓名，反复核对输血申请单和血液的标签正确无误，将血液或血液制品及时发出。（二）责任 以患者安危为己任，高度科学性和责任心，熟练和灵活应用免疫血液学试验的原理
9、和技术，与临床观察密切结合，全面、细致和综合观察和分析试验结果。使输血前的检查工作真正成为患者安全输血治疗的保障。,安全输血（成分）的免疫血液学措施和规范化,输红细胞前免疫血清学试验基本内容,1，ABO，正反定型,2，Rh D定型，3，抗体筛选和鉴定试验(不同介质),4，交叉配合试验(不同介质）5，在37oC中，供者红细胞与受者血清没有任何反应，供者血清与受者红细胞没有任何反应。,血小板的安全输注,输血前免疫血清学试验： 策略和技术程序1，通常要求血小板ABO配合输注(没有国际性的正式规定),2，如ABO配合的血小板输注效果差：（1）检测HLA抗体。（2）选择ABO和HLA交又配合的血小板供体
10、。3，如果HLA交叉配合的血小板效果不佳，检测血小板特异性选择血小板交叉配合的供体。,新鲜冷冻血浆、液体血浆的安全输注,一般不做交叉配血，所输血浆必须与受者血型相容，不一定要求相同,HLA与安全输血,HlA抗体和相应抗原反应的预防措施，供、受体间淋巴细胞毒试验交叉配合试验，HLA抗体的检测和鉴定，输注三洗红细胞、冷冻保存复苏红细胞。使用白细胞滤器、输注去白细胞的血液成分，照射处理血液成分。,低温沉淀液物的安全输注,输血前免疫血清学检查选择血型相容的低温沉淀物制品，,IgA缺乏受者输血的特殊要求,IgA缺乏受者须输：IgA缺乏的血液制品，避免严重输血免疫反应,免疫血液学技术规范化的要素,1. 人
11、员2. 设备3. 试剂 4. 标本5. 采用的技术6. 记录7. 其它,常用试剂规范化的基本要求,1. 水和生理盐水的质控2. 试剂细胞的质控3. 定型血清的质控4. 反应增强介质的质控5. 抗球蛋白试剂的质控6. 其它试剂的质控,技术操作的规范化,1，技术操作的基本质量要求，2， 凝集物检查的质量保证，3， 结果的解释及实验结果记录，4，凝集的判读与记录的质量保证5，严格的标准技术操作规程,技术人员技术素质的规范化,1. 掌握基本的血型血清学技术和知识，2. 了解血型抗体特性，抗体鉴定须知，3. 了解各项技术的长处和缺陷，4. 心理素质和职业道德的的要求，5. 新知识和技术的了解和追求。,结言,规范化输血前检查及配合性试验，才能及时和正确的处理血型血清学疑难问题及异常结果，是输血医学服务机构的重要任务，高质量和高水平服务的体现。免疫血液学的技术人员是解决问题的主体，必须全面理解和操作各项试验过程，掌握解决疑难问题的技巧和能力。,共同提高,南宁输血医学研究所掌握目前国际上先进的免疫血液学技术和相关的分子免疫血液学技术, 并开展了进一步的研究和临床应用工作.南宁输血医学研究所将作为一个开放的输血医学平台, 欢迎各位同事共同工作,为我国的输血医学事业作出贡献!,南宁输血医学研究所团队,谢谢！ 吴国光：,
